4, 1

1 מוסד תקציבי של המדינה הפדרלית מרכז מחקר גנטי רפואי של האקדמיה הרוסית למדעי הרפואה

2 SBEE HPE "האוניברסיטה הרפואית הממלכתית של רוסטוב של משרד הבריאות של רוסיה"

3 GBUZ "בית חולים קליני אזורי מס' 1 על שם פרופסור S.V. Ochapovsky" של מחלקת הבריאות בטריטוריית קרסנודר

4 FGBU "מרכז מחקר גנטי רפואי"

על מנת להצדיק את הנהגת סקר המונית של יילודים למחלות מטבוליות תורשתיות (HMD) באמצעות ספקטרומטריית מסה טנדם (MS/MS), מחקר רטרוספקטיבי של דגימות דם ארכיוניות של ילדים (n=86) שמתו בשנה הראשונה של החיים בוצעו. שינויים בפרופילים של חומצות אמינו ואצילקרניטינים זוהו ב-4 מקרים (4.7%). באחד מהם נמצאה עלייה מרובה בריכוז לאוצין, איזולאוצין ואלין, ספציפית למחלה. התמונה הקלינית וזיהוי של מוטציה באקסון הראשון של הגן BCKDHB (с.98delG) במצב הטרוזיגוטי אישרו בעקיפין את האבחנה של לאוצינוזה. בשלושת המקרים הנותרים, השינויים שזוהו בפרופיל של חומצות אמינו ואצילקרניטינים אינם בעלי אותו אופי ספציפי. במקרים אלה, יהיה צורך בבדיקות דם חוזרות על ידי טרשת נפוצה/טרשת נפוצה, מחקרים קליניים וביוכימיים נוספים. כתוצאה מהמחקר, אושרה ההכרח להחדיר את שיטת טרשת נפוצה/טרשת נפוצה לתוכניות סקר ילודים ל-NBO לצורך האבחון והטיפול בזמן.

אבחון רטרוספקטיבי

ספקטרומטריית מסה טנדם

מחלות מטבוליות תורשתיות

1. Krasnopolskaya K. D. מחלות מטבוליות תורשתיות. מדריך עזר לרופאים. - מ.: ROO "מרכז להסתגלות חברתית ושיקום ילדים" פוהט ", 2005. - 364 עמ'.

2. Mikhailova S. V., Zakharova E. Yu., Petrukhin A. S. מחלות נוירומטבוליות בילדים ובני נוער. אבחון וגישות לטיפול. - מ.: "ליטרה", 2011. - 352 עמ'.

3. Chace H. D. אבחנה מהירה של ניתוח כמותי של מחסור ב-MCAD של octanoylcarnitine ו-acylcarnitines אחרים בכתמי דם של יילוד על ידי ספקטרומטריית מסה טנדם / Chace H. D., Hillman S. L., Van Hove J. L. et al. // כימיה קלינית. - 1997. - V. 43. - מס' 11. - R. 2106-2113.

4. Nyhan L. W., Barshop B. A., Ozand P. T. Atlas of metabolic diseases. - מהדורה שנייה. - לונדון: Hodder Arnold, 2005. - 788 עמ'.

5. Rashed M. S. יישום קליני של ספקטרומטריית מסה טנדם: עשר שנים של אבחון והקרנה למחלות מטבוליות תורשתיות // J. of Chrom. ב' - 2001. - ו' 758. - מס' 27-48.

6. Sweetman L. הפרעות במתן שמות וספירה (מצבים) הנכללים בלוחות הקרנת יילודים / Sweetman L., Millington D. S., Therrell B. L. et al. // רפואת ילדים. - 2006. - ו' 117. - עמ' 308-314.

7. Van Hove J. L. Medium-chain acl-CoA dehydrogenase deficiency: אבחנה על ידי ניתוח acylcarnititne בדם/Van Hove J. L., Zhang W., Kahler S. G. et al. // Am. ג'יי המם. ג'נט. - 1993. - V. 52. - עמ' 958-966.

מבוא

עד כה, ידועות יותר מ-500 צורות נוזולוגיות של מחלות מטבוליות תורשתיות (NBO). החלק העיקרי של NBO הוא נדיר ביותר, אך השכיחות הכוללת שלהם באוכלוסייה היא 1:1000-1:5000. ככלל, NBOs מתבטאים בשנה הראשונה לחיים עם תסמינים לא ספציפיים המסווים אותם באופן קליני כפתולוגיה סומטית אחרת שאינה תורשתית. יחד עם זאת, אבחון בזמן של מחלות תורשתיות מטבוליות חשוב, שכן עבור רבים מהן פותחו וממשיכים להתפתח שיטות יעילות לטיפול פתוגני, שבלעדיהן תוצאת המחלה נותרת קטלנית. ידוע בדרך כלל שאחת הגישות המוצדקות והיעילות ביותר לגילוי מוקדם של פתולוגיה תורשתית היא בדיקה גנטית של יילודים. הפיתוח של השיטה של ​​ספקטרומטריית מסה טנדם (MS/MS) עם יינון אלקטרוספריי הפך את ההקרנה המוני ספקטרומטרית בקנה מידה גדול ליישום בפועל של הקרנת המונים על NBOs עד סוף שנות ה-90. שיטת מיקרו רגישה זו מאפשרת לקבוע בו-זמנית את הריכוזים של עשרות חומצות אמינו ואצילקרניטינים במספר מיקרוליטר של דם, החשובים לאבחון של NBO. יעילותה של בדיקת המעבדה MS/MS אפשרה לכלול אותה בתוכניות הממלכתיות של סקר ילודים לגילוי אמינואצידופתיה, אסידוריה אורגנית ופגמים בחמצון β המיטוכונדריאלי של חומצות שומן במספר מדינות. עם זאת, בפדרציה הרוסית, שיטת MS/MS לא הוכנסה למערכת הבדיקות ההמוניות של יילודים והיא זמינה להקרנה סלקטיבית ל-NBO רק במספר מרכזים רפואיים פדרליים.

מטרת מחקר זה הייתה לבסס מדעית את הצורך לכלול מחקרי טרשת נפוצה/טרשת נפוצה בתוכניות אזוריות לבדיקה המונית של יילודים לאבחון של אמינואצידופתיה, חומצה אורגנית ופגמים בחמצון β המיטוכונדריאלי של חומצות שומן בהתבסס על ניתוח מסה ספקטרומטרי רטרוספקטיבי. של דגימות דם מילדים חולים שמחלותיהם הסתיימו.מוות בשנה הראשונה לחייהם.

מטופלים ושיטות מחקר

מחקר רטרוספקטיבי זה כלל ילדים (n=86, יחס בנים:בנות 48/38) שמתו בשנה הראשונה לחייהם (בגיל 5 ימים עד 11 חודשי חיים) בתוך שנה קלנדרית אחת (2010) בשטח המנהלי של קרסנודר. טריטוריה . המחקר כלל ילדים עם מומים מולדים (n=29), מחלות זיהומיות - דלקת ריאות, אלח דם, דלקת קרום המוח חיידקית (n=37), נגעים ב-CNS סביב הלידה (n=11), תסמונת מוות פתאומי (n=6) ומחלות נוספות (n=6) =3). קבוצת הביקורת כללה 438 יילודים בריאים קלינית (227 בנות, 211 בנים) בגילאי 3-8 ימים. בקבוצה זו נקבעו ערכי ייחוס של ריכוזי חומצות אמינו ואצילקרניטינים בדם נימי בילדים בריאים בתקופת היילוד.

החומר למחקר היה דגימות דם היקפיות בארכיון על טפסי בדיקת נייר סטנדרטיים שהושגו בימים 3-8 לחיים לצורך בדיקת ילודים סטנדרטית. הריכוז של חומצות אמינו ואצילקרניטינים (טבלה 1) בדם נקבע על ידי ספקטרומטריית מסה טנדם (MS/MS) באמצעות ספקטרומטר מסה טנדם Agilent 6410 quadrupole (Agilent Technologies, ארה"ב) לפי השיטה המוסמכת של CHROMSYSTEM מס' V1 07 05 57136 001. המחקר בוצע במעבדה לגנטיקה רפואית, SBEE HPE "Rostov State Medical Institute של משרד הבריאות של רוסיה".

שולחן 1

מטבוליטים נקבעים על ידי MS/MS

	מטבוליט	סֵמֶל		מטבוליט	סֵמֶל
חומצות אמינו
				3-מתילקרוטונילקרנטין
	חומצה אספרטית			3-hydroxyisovalerylcarnitine
	חומצה גלוטמית			Hexanoylcarnitine
	לאוצין + איזולאוצין			אוקטנוילקרניטין
	מתיונין			אוקטנוילקרניטין
	פנילאלנין			דקנוילקרניטין
				דקנוילקרניטין
				דודקנוילקרניטין
				מיריסטילקרניטין
	ציטרולין			Tetradecenoylcarnitine
				Tetradecinoylcarnitine
				Hydroxymyristylcarntine
א ק איל ק א ר ן אי ט אי ן י				פלמיטוילקרניטין
	קרניטין חופשי			Hexadecenoylcarnitine
	אצטילקרניטין			Hydroxyhexadecenoylcarnitine
	פרופיוניל קרניטין			הידרוקסיפלמיטוילקרניטין
	מלונילקרניטין			סטארוילקרניטין
	בוטירילקרנטין			אולאוילקרניטין
	מתילמלונילקרניטין			Hydroxystearoylcarnitine
	Isovalerylcarntin			Hydroxyoleoilcarnitine
	גלוטרילקרניטין			הידרוקסילינוילקרניטין

עיבוד סטטיסטי של הנתונים שהתקבלו בוצע באמצעות חבילת התוכנה Statistica 6.0 וגיליונות אלקטרוניים של Excel 2007. לקביעת המאפיינים המספריים התיאוריים של המשתנים, נעשה שימוש בשיטות סטנדרטיות של ניתוח סטטיסטי: חישוב החציון, 0.5 ו-99.5 אחוזונים.

לאבחון גנטי מולקולרי מאשש של לאוצינוזה, DNA בודד מכתמי דם יבשים באמצעות ערכת DiatomDNAPrep (LLC Biocom, רוסיה). בחירת הפריימרים להגברת PCR בוצעה עבור 10 אקסונים של הגנים BCKDHA ו-BCKDHB. ריצוף של שברי PCR לזיהוי מוטציות נדירות בוצע על פי פרוטוקול היצרן על מנתח גנטי ABIPrism 3500 (Applied Biosystem, ארה"ב).

תוצאות מחקר ודיון

כתוצאה ממחקר ריכוזי חומצות אמינו ואצילקרניטינים בדם ההיקפי של 438 יילודים בריאים קלינית, נקבעו ריכוזי אחוזון של 0.5 ו-99.5 אחוזים של המטבוליטים שנחקרו, בהם השתמשנו מאוחר יותר כערכים ייחוס (טבלה 2). השוואת ריכוזי חומצות אמינו ואצילקרניטינים, שנקבעו בדגימות דם של 86 ילדים שמתו בשנה הראשונה לחייהם, עם ערכי ייחוס של ריכוזים, הראתה כי ב-82 חולים (95.3%) אף אחד מהפרמטרים שנבדקו לא מעבר ל-0.5 ו-99, 5 אחוזונים של קבוצת הביקורת, מה שאפשר לנטוש את הגרסה העובדת של נוכחות של הפרעות במטבוליזם של חומצות אמינו וקרניטין שלא אומתו in vivo. עם זאת, ב-4 ילדים (4.7%), הריכוזים של כמה חומצות אמינו ואצילקרניטינים היו גבוהים פי כמה מהגבולות העליונים של מרווח הייחוס של קבוצת הביקורת (טבלה 2).

שולחן 2

תוצאות של הערכה רטרוספקטיבית של ריכוזי חומצות אמינו ואצילקרניטינים בילודים (n=4) עם רמת מטבוליטים בודדים מחוץ לטווח של 0.5-99.5 אחוזונים

	מטבוליטים	ריכוזים של מטבוליטים בודדים (מיקרומול/ליטר)
		ערכי התייחסות של קבוצת הביקורת (n=438) בטווח 0.5-99.5 אחוזים	ערכי מטופל בודד (n=4) *
			מטופל 1	מטופל 2	מטופל 3	מטופל 4
חומצות אמינו
			2503,868
						1457,474
א ק איל ק א ר ן אי ט אי ן י

* הערה:

חולה 1 - נער KM (אבחנה: ברונכיוליטיס חסימתית), נפטר בגיל 11 חודשים;

חולה 2 - ילד CF (אבחנה: דלקת ריאות), נפטר בגיל חודש;

חולה 3 - ילדה PV (אבחנה: אלח דם), נפטרה בגיל 12 ימים.

חולה 4, נערת הרשות (אבחנה: דלקת ריאות), נפטרה בגיל 6 ימים.

במקרה הראשון, בחולה CM שנפטר בגיל 11 חודשים ואובחן כחולה ברונכיוליטיס חסימתית, ספקטרומטריית מסה טנדם של חומצות אמינו ואצילקרניטינים בדגימות דם ארכיוניות גילתה שינויים בתכולת לאוצין, איזולאוצין ו-וואלין, שהם ספציפי מספיק כדי להצביע על סבירות גבוהה לפגם מטבולי מולד במסלול הקטבוליזם של לאוצין ואיסולאוצין. בדגימות הדם הארכיוניות שנחקרו נמצאה עלייה בריכוז של לאוצין ואיזולאוצין ביותר מפי 9 ושלין - פי יותר מפי 3 בהשוואה לערכי הייחוס, מה שמצביע על אבחנה של "מחלה עם ריח של שתן סירופ מייפל".

מהנתונים הקליניים הזמינים לטובת לאוצינוזה בילד KM, העידו הביטויים הקליניים הבאים: סירוב מוקדם להנקה, תסמינים של אנצפלופתיה ביילוד, עלייה בתסמינים נוירולוגיים - שינויים בטונוס השרירים, עוויתות, אפילפסיה, פיגור פסיכומוטורי. לילד היו לעיתים קרובות דלקות קשות בדרכי הנשימה, שגרמו לברונכיוליטיס אובליטרנס, שהייתה סיבת המוות בגיל 11 חודשים. אין לנו מידע על האם לילד היה ריח ספציפי של שתן, אבל העלייה בריכוז המטבוליטים האופייניים לאוצינוזה והתסמינים הקליניים האופייניים מאששים את ההנחה שלנו. בנוסף, אבחון DNA של לאוצינוזה באמצעות דגימות דם ארכיוניות תומך באבחון של מחלת ריח שתן סירופ מייפל. ניתוח גנטי מולקולרי גילה מחיקת c.98delG באקסון הראשון של הגן BCKDHB בילד במצב הטרוזיגוטי. אותה מוטציה נמצאה בדם האם. בשל המספר המצומצם של דגימות דם ארכיוניות של הילד ואי-זמינות החומר הביולוגי של אביו, לא ניתן היה למצוא את המוטציה השנייה. עם זאת, שילוב של נתונים גנטיים קליניים, ביוכימיים ומולקולריים תומכים באבחון של לאוצינוזה (או מחלת ריח שתן סירופ מייפל, MIM ID 248600) במקרה הנחקר.

בשלושת המקרים הנותרים, השינויים שזוהו בפרופיל של חומצות אמינו ואצילקרניטינים אינם בעלי אופי ספציפי כמו במקרה הקודם. אי אפשר להניח NBOs מסוימים על סמך נתוני MS/MS, ועוד יותר מכך לקבוע בוודאות, במקרים אלה. לאבחנה מבדלת של aminoacidopathy וחומצת אורגנית, בדיקות דם חוזרות בשיטת MS/MS, יהיה צורך במחקרים קליניים וביוכימיים נוספים.

מידת העלייה במטבוליטים הספציפיים למחלה משתנה ותלויה בגורמים רבים. יש לקחת בחשבון את אופי התזונה של הילד, נטילת תרופות מסוימות בעת פענוח התוצאות. לפיכך, נטילת תרופות המכילות חומצה ולפרואית או טריגליצרידים בעלי שרשרת בינונית מביאה לעלייה ב-C6, C8 ו-C10, מה שמקשה על אבחון מחסור ב-acyl-CoA dehydrogenase בעל שרשרת בינונית. צריכת תרופות המכילות קרניטין עלולה להוביל גם לעלייה בריכוזים של אצילקרניטינים קצרים ובינוניים. התוכן של אצילקרניטינים ארוכי שרשרת בפלזמה ובדם מלא שונה, מכיוון שהם קשורים לממברנות אריתרוציטים, לכן להמטוקריט יש ערך מסוים. למעט חריגים מסוימים, עלייה של 1 וחצי עד פי שניים בריכוז מחייבת בדיקת דם שנייה. לפיכך, רמות המטבוליטים שהם פתוגנומוניים לחומצה פרופיונית ואיזווולרית עולות בדרך כלל ביותר מפי 5, ואפילו שינוי קל בריכוז הגלוטארילקרניטין מצריך לא רק בדיקת דם חוזרת, אלא גם מחקר נוסף של חומצות שתן אורגניות האופייניות. של חומצה גלוטרית מסוג I.

סיכום

מחקר רטרוספקטיבי של דגימות דם מילדים צעירים שמתו מסיבות שונות, שבוצע בשיטת MS/MS, איפשר להציע פתולוגיה מטבולית תורשתית במספר מקרים. באחד מהם אושרה אבחנה של המחלה על ידי ריח של שתן סירופ מייפל (לאוצינוזה). אמצעי אבחון בזמן במקרים כאלה הם מרכיב חשוב באבחון דיפרנציאלי של שגיאות מטבוליות מולדות. חקר הריכוזים של חומצות אמינו ואצילקרניטינים בדגימות של נוזלים ביולוגיים יכול להיות בעל ערך אבחנתי בניתוח מקרים של תמותת תינוקות. אבחון שלאחר המוות של מחלה מטבולית תורשתית בילד שנפטר מהווה אינדיקציה לייעוץ גנטי רפואי של המשפחה. יש צורך ליישם באופן נרחב את שיטת MS/MS בהקרנת יילודים ככלי עיקרי לאיתור אמינואצידופתיה, חומצה אורגנית ופגמים בחמצון חומצת שומן β-מיטוכונדריה ביילודים לצורך אבחון וטיפול בזמן של NBO.

סוקרים:

פולביצ'נקו אלנה ולדימירובנה, ד"ר מד. Sci., פרופסור, חוקר ראשי של המחלקה לשיקום וסיוע רפואי וחברתי של המוסד התקציבי של המדינה הפדרלית "FNKTs of Pediatric Hematology, Oncology and Immunology על שם דמיטרי Rogachev" של משרד הבריאות של רוסיה, מוסקבה.

מיכאילובה סבטלנה ויטלייבנה, ד"ר מד. Sci., ראש המחלקה לגנטיקה רפואית, המוסד הפדרלי התקציבי של המדינה "בית החולים הקליני לילדים של רוסיה של משרד הבריאות של רוסיה", מוסקבה.

קישור ביבליוגרפי

Baydakova G.V., Antonets A.V., Golihina T.A., Matulevich S.A., Amelina S.S., Kutsev S.I., Kutsev S.I. אבחון רטרוספקטיבי של מחלות מטבוליות תורשתיות בשיטה של ​​ספקטרומטריית מסה טנדם // בעיות מודרניות של מדע וחינוך. - 2013. - מס' 2.;
כתובת אתר: http://science-education.ru/ru/article/view?id=8953 (תאריך גישה: 12.12.2019). אנו מביאים לידיעתכם את כתבי העת בהוצאת ההוצאה "האקדמיה להיסטוריה של הטבע"

ספקטרומטריית מסה טנדם היא אחת השיטות המודרניות לניתוח תרכובות, שנמצאת בשימוש נרחב למטרות מדעיות ומעשיות שונות. שיטה זו מאפשרת ניתוח של כמה מאות תרכובות בכמויות מיקרו של חומר ביולוגי. בשיטות הבריאות העולמיות, שיטה זו משמשת לסריקה המונית של יילודים למחלות מטבוליות תורשתיות (HMD). בנקודה של דם מיובש, ניתן לקבוע חומצות אמינו (כולל פנילאלנין) ואצילקרניטינים. הקביעה הכמותית של חומרים אלו מאפשרת לשלול כמה עשרות מחלות תורשתיות השייכות לקבוצות שונות של NBOs (הפרעות בחילוף החומרים של חומצות אמינו, חומצות אורגניות ופגמים בחמצון b המיטוכונדריאלי של חומצות שומן). בעבר, אבחון הפרעות אלו הצריך כמות גדולה של חומר ביולוגי, מספר מחקרים (ניתוח חומצות אמינו, כרומטוגרפיית גז-ספקטרומטריית מסה, קביעת הספקטרום של אצילקרניטינים), אשר דרשו זמן רב ועלויות חומר. TMS מאפשר לך לכמת את כל התרכובות הללו בריצה אחת! להפרעות תורשתיות בחילוף החומרים של חומצות אמינו, חומצות אורגניות ופגמים בחמצון בטא המיטוכונדריאלי של חומצות שומן יש כ-100 צורות נוזולוגיות, רובן מתבטאות בתקופת היילוד. התדירות שלהם היא יותר מ-1:5000 ילודים חיים. רופאים רבים מאמינים בטעות שמחלות מקבוצה זו הן כה נדירות, עד שיש להחריג אותן רק כמוצא אחרון, ולעתים קרובות האבחנה הנכונה נעשית כבר במועד מאוחר יותר או שהמחלה אינה מאובחנת כלל.

במהלך הניתוח נקבעים 52 אינדיקטורים (חומצות אמינו ואצילקרניינים)

מהי ספקטרומטריית מסה טנדם

ספקטרומטריית מסה טנדם (TMS) היא אחת השיטות המודרניות לניתוח תרכובות, שנמצאת בשימוש נרחב למטרות מדעיות ומעשיות שונות. שיטה זו מאפשרת ניתוח של כמה מאות תרכובות בכמויות מיקרו של חומר ביולוגי.

היכן מיושמת שיטה זו?

בשיטות הבריאות העולמיות, שיטה זו משמשת לסריקה המונית של יילודים למחלות מטבוליות תורשתיות (HMD). בנקודה של דם מיובש, ניתן לקבוע חומצות אמינו (כולל פנילאלנין) ואצילקרניטינים. הקביעה הכמותית של חומרים אלו מאפשרת לשלול כמה עשרות מחלות תורשתיות השייכות לקבוצות שונות של NBOs (הפרעות בחילוף החומרים של חומצות אמינו, חומצות אורגניות ופגמים בחמצון β המיטוכונדריאלי של חומצות שומן). על פי נתוני ספרות זרה, השכיחות הכוללת שלהם היא 1:2000 ילודים חיים. בעבר, אבחון הפרעות אלו הצריך כמות גדולה של חומר ביולוגי, מספר מחקרים (ניתוח חומצות אמינו, כרומטוגרפיית גז-ספקטרומטריית מסה, קביעת הספקטרום של אצילקרניטינים), אשר דרשו זמן רב ועלויות חומר. TMS מאפשר לך לכמת את כל התרכובות הללו בריצה אחת!

אילו מחלות ניתן לזהות בשיטה זו?

למרבה הצער, בדיקה אוניברסלית רגישה וספציפית אחת לאבחון של כל ה-NBOs המוכרים עדיין לא קיימת, אבל טכנולוגיות שמטרתן לזהות כמה עשרות ואפילו מאות מחלות בניתוח אחד כבר הופכות למציאות. TMS היא אחת מהשיטות הללו. שיטה זו מאפשרת לזהות באמינות גבוהה כ-40 הפרעות תורשתיות בחילוף החומרים של חומצות אמינו, חומצות אורגניות ופגמים בחמצון בטא המיטוכונדריאלי של חומצות שומן. רוב המחלות הללו מופיעות במהלך תקופת היילוד. רשימת המחלות שניתן לאבחן באמצעות טכנולוגיה זו ניתנת בסעיף הניתוחים.

מדוע חשוב לאבחן מחלות מטבוליות מוקדם ככל האפשר?

רופאים רבים סבורים בטעות ש-NBO הם כל כך נדירים שיש להחריג אותם רק כמוצא אחרון, ולעתים קרובות מאוד האבחנה הנכונה נעשית כבר במועד מאוחר יותר או שהמחלה לא מאובחנת כלל.

עם זאת, כבר ידועות יותר מ-150 צורות של NBO שעבורן פותחו שיטות טיפול אפקטיביות, וחייו ובריאותו של המטופל תלויים במידה רבה באיזו מהירות ונכונה האבחנה נעשית. עבור 20 מחלות שניתן לאבחן באמצעות TMS, פותחו טיפולים ספציפיים. אבחון בזמן הוא הצלת חיים ובריאות של המטופל!

כללים לאיסוף דגימות דם

הדם נאסף בכרטיס סינון סטנדרטי (#903) המשמש לבדיקת PKU של ילודים. הדם יכול להיות נימי (מהאצבע, העקב) או ורידי. יש צורך להרוות היטב את האזור הנבחר על המסנן! בכרטיס המסנן יש לציין בבירור את השם המלא, על ידי מי וממנו הופנה המטופל, תאריך לידה ומספר טלפון של הרופא המטפל. הדגימה מיובשת במשך 2-3 שעות באוויר. רצוי לצרף תמצית מההיסטוריה הרפואית.

תיאור

הַדְרָכָה

אינדיקציות

פרשנות של תוצאות

מסמכים שיש להשלים

תיאור

שיטת קביעה

ספקטרומטריית מסה טנדם עם יינון אלקטרוספריי.

חומר במחקר דם נימי שנאסף בכרטיס סינון מיוחד מס' 903

ביקור בית זמין

ניתוח הספקטרום של חומצות אמינו ואצילקרניטינים על ידי ספקטרומטריית מסה טנדם (TMS)

מהן הפרעות מטבוליות? הפרעות מטבוליות תורשתיות או במילים אחרות חילוף חומרים הן כ-500 מחלות שונות הנגרמות מתפקוד לקוי של זרזים ביוכימיים מיוחדים – אנזימים. אנזימים מספקים תהליכים לפירוק של חומצות אמינו, חומצות אורגניות, חומצות שומן וביומולקולות אחרות. רבים מאמינים בטעות שמכיוון שמחלות של קבוצה זו הן נדירות ביותר, יש להוציא אותן אחרונה. עם זאת, על פי הספרות*, אחד מכל 3000 יילודים סובל מהפרעות מטבוליות תורשתיות!

מקום מיוחד בין המחלות הללו תופסות מחלות שמתחילות בילדות המוקדמת. מחלות אלו משולבות לעיתים קרובות עם פתולוגיה חמורה של יילודים ו/או מתרחשות במסווה של מצבים כגון אלח דם, פגיעה סביב הלידה במערכת העצבים, זיהום תוך רחמי. גילוי מאוחר של מחלות מקבוצה זו עלול להוביל לנכות חמורה ואף למוות. נקבע כי 5%** מכלל המקרים של "תסמונת מוות פתאומי של תינוקות" הם תוצאה של הפרעות מטבוליות תורשתיות. עם זאת, חלק מהמחלות הללו מטופלות ביעילות עם אבחון בזמן. אחת השיטות המודרניות לאבחון הפרעות מטבוליות היא ספקטרומטריית מסה טנדם (TMS). שיטה זו מאפשרת לקבוע בכמות קטנה של חומר ביולוגי (טיפת דם מיובש), המאפשרת לך לחשוד במחלה תורשתית בסבירות מסוימת. במדינות מסוימות, שיטה זו משמשת לבדיקת כל הילודים ל-10-30 הפרעות מטבוליות תורשתיות. במילים אחרות, כל הילודים עוברים מחקר ביוכימי מיוחד הנקרא סקר. * Vilarinho L, Rocha H, Sousa C, Marcão A, Fonseca H, Bogas M, Osório RV. ארבע שנים של הקרנת יילודים מורחבת בפורטוגל עם ספקטרומטריית מסה טנדם. J Inherit Metab Dis. 23 בפברואר 2010 ** Olpin SE החקירה המטבולית של מוות פתאומי של תינוקות. Ann Clin Biochem, 2004, יולי 41 (Pt4), 282-293 **Opdal SH, Rognum TO The Sudden Infant Death Syndrome Gene: האם זה קיים? Pediatrics, 2004, V.114, N.4, pp. e506-e512 מהי הקרנה? סקר (מאנגלית. סקר - סקר) היא בדיקה המונית של חולים לאיתור מחלות שונות, שאבחנה מוקדמת שלהן יכולה למנוע התפתחות של סיבוכים קשים ונכות. אילו מחלות הן בדיקת חובה של יילודים בארצנו? ברוסיה קיימת תוכנית ממלכתית הכוללת בדיקת חובה (סקר) של כל הילודים ל-5 מחלות תורשתיות בלבד: פנילקטונוריה (PKU), סיסטיק פיברוזיס, גלקטוזמיה, תסמונת אדרנוגניטל ותת פעילות בלוטת התריס מולדת.

אנו מפנים את תשומת לבך לעובדה שמרשימה זו, מחקר ה-PHEEL כולל רק בדיקה לאיתור פנילקטונוריה (לרשימה מלאה של מחלות מטבוליות תורשתיות שהתגלו באמצעות בדיקת PHEEL, ראה למטה בטקסט).

לאילו מחלות ניתן לבדוק את הילד בנוסף? סקר ילודים, שמטרתו לאבחן הפרעות מטבוליות על ידי TMS, אינו מבוצע כיום ברוסיה. ברוסיה, מחקר זה עדיין מתבצע כפי שנקבע על ידי רופא אם יש חשדות למחלות מטבוליות תורשתיות, למרות שרבות מהמחלות של קבוצה זו אינן באות לידי ביטוי מיד לאחר הלידה, אך לילוד כבר יש אותן. עם זאת, שיטת טנדם מסה ספקטרומטריית (TMS) שהוזכרה לעיל יכולה לבחון בנוסף ילד שזה עתה נולד לאי הכללה של 37 מחלות תורשתיות שונות הקשורות להפרעות מטבוליות של חומצות אמינו, חומצות אורגניות ופגמים בחמצון ß של חומצות שומן. Aminoacidopathy Aminoacidopathy מתפתחת עקב מחסור באנזימים ספציפיים הדרושים לחילוף החומרים של חומצות אמינו. זה מוביל לרמות גבוהות באופן חריג של חומצות אמינו ונגזרותיהן בדם ובשתן, שיש להן השפעה רעילה על התאים והרקמות של הגוף. התסמינים העיקריים הם עיכוב התפתחותי, פרכוסים, תרדמת, הקאות, שלשולים, ריח חריג של שתן, ליקויי ראייה ושמיעה. הטיפול מורכב ממתן תזונה מיוחדת וויטמינים. יעילות הטיפול תלויה באיזו מוקדמת ומדויקת האבחנה נעשית. למרבה הצער, חלק מהמחלות מקבוצה זו אינן ניתנות לטיפול. חומצה אורגנית/חומצה אורגנית חומצת אורגנית/חומצה אורגנית היא תוצאה של פגם בפירוק כימי של חומצות אמינו עקב פעילות לא מספקת של האנזים. הביטויים הקליניים שלהם דומים לאלו של aminoacidopathy. הטיפול מורכב מרישום תזונה מיוחדת ו/או ויטמינים. למרבה הצער, חלק מהמחלות מקבוצה זו אינן ניתנות לטיפול. פגמים בחמצון ß של חומצות שומן חמצון ß של חומצות שומן הוא תהליך רב שלבי של פיצול שלהן, וכתוצאה מכך נוצרת האנרגיה הדרושה לחיי התא. כל שלב בתהליך החמצון מתבצע תחת פעולתם של אנזימים ספציפיים. בהיעדר אחד מהאנזימים, התהליך מופרע. תסמינים: ישנוניות, תרדמת, הקאות, רמת סוכר נמוכה בדם, פגיעה בכבד, בלב, בשרירים. הטיפול מורכב במינוי של דיאטה דלת שומן עם האכלה תכופה וחלקית, מוצרים תזונתיים מיוחדים אחרים, כמו גם לבוקרניטין. רשימה מלאה של מחלות מטבוליות תורשתיות שזוהו

1. מחלה עם ריח של שתן סירופ מייפל (לאוצינוזה).
2. ציטרולינמיה סוג 1, ציטרולינמיה ביילוד.
3. Argininosuccinic aciduria (ASA) / מחסור ב-argininosuccinate lyase lyase.
4. מחסור ב-ornithine transcarbamylase.
5. מחסור בסינתאז קרבמיל פוספט.
6. מחסור ב-N-acetylglutamate synthase.
7. היפרגליקינמיה לא קטוטית.
8. טירוסינמיה סוג 1.
9. טירוסינמיה סוג 2.
10. הומוציסטינוריה/מחסור ב-cystathionine beta synthetase.
11. פנילקטונוריה.
12. מחסור בארגינינמיה/ארגינאז.
13. אסידמיה פרופיונית (מחסור ב-propionyl CoA carboxylase).
14. חומצת מתילמלונית.
15. חומצה איזוואלרית (מחסור ב- isovaleryl CoA dehydrogenase).
16. מחסור ב-2-methylbutyryl CoA dehydrogenase.
17. מחסור של isobutyryl CoA dehydrogenase.
18. חומצת גלוטרית מסוג 1 (מחסור ב- glutaryl-CoA dehydrogenase סוג 1).
19. מחסור ב-3-methylcrotonyl CoA carboxylase.
20. מחסור מרובה בקרבוקסילאז.
21. חוסר ביוטינידאז.
22. אסידמיה מאלונית (מחסור ב-malonyl CoA decarboxylase).
23. מחסור באצטו-אצטיל CoA במיטוכונדריאלי בתיולאז.
24. מחסור ב-2-methyl-3-hydroxybutyryl CoA dehydrogenase.
25. מחסור ב-3-hydroxy-3-methylglutaryl CoA lyase.
26. מחסור ב-3-methylglutaconyl CoA hydratase.
27. מחסור ב-acyl-CoA dehydrogenase שרשרת בינונית.
28. מחסור ב-acyl-CoA dehydrogenase שרשרת ארוכה מאוד.
29. מחסור ב-acyl-CoA dehydrogenase קצר שרשרת.
30. מחסור ב-3-hydroxyacyl-CoA dehydrogenase בעל שרשרת ארוכה (פגם חלבון תלת-פונקציונלי).
31. חומצת גלוטרית מסוג II (מחסור ב- glutaryl-CoA dehydrogenase type II), מחסור מרובה של acyl-CoA dehydrogenases.
32. הפרעה בהובלת קרניטין.
33. מחסור של קרניטין פלמיטויל טרנספראז מסוג I.
34. מחסור של קרניטין פלמיטויל טרנספראז מסוג II.
35. מחסור בטרנסלוקאז של קרניטין/אצילקרניטין.
36. מחסור ב-2,4-dienoyl CoA רדוקטאז.
37. מחסור ב-3-ketoacyl-CoA thiolase שרשרת בינונית.
38. מחסור ב-acyl-CoA dehydrogenase בינוני/קצר שרשרת.

חומר למחקר: דם נימי שנאסף על גבי כרטיס סינון מיוחד מס' 903.

סִפְרוּת

1. Chace D.H., Kalas T.A., Naylor E.W. היישום של ספקטרומטריית מסה טנדם להקרנה של יילודים לאיתור הפרעות תורשתיות של מטבוליזם ביניים. Annu Rev Genomics Hum Genet. 2002; כרך. 3; ע. 17-45.
2. Leonard J.V., Dezateux C. סקר למחלה מטבולית תורשתית בתינוקות שזה עתה נולדו באמצעות ספקטרומטריית מסה טנדם. BMJ. 2002; כרך. 324(7328); ע. 4-5.
3. Millington D., Kodo N., Terada N., Roe D., Chace D. הניתוח של סמנים אבחוניים של הפרעות גנטיות בדם ובשתן של בני אדם באמצעות ספקטרומטריית מסה טנדם עם ספקטרומטריית מסה של יונים משניים נוזליים.1991 Int.J.Mass Spectr תהליך יון. 111:211-28.
4. צ'ייס ד.ה. ספקטרומטריית מסה במעבדה הקלינית. Chem Rev. 2001 פברואר;101(2):445-77.
5. Duran M., Ketting D., Dorland L., Wadman S.K. זיהוי של אצילקרניטינים באמצעות ספקטרומטריית מסה יינון כימי של ספיגה. J Inherit Metab Dis. 1985;8 Suppl 2:143-4.
6. Millington D.S., Kodo N., Norwood D.L., Roe C.R. ספקטרומטריית מסה טנדם: שיטה חדשה לפרופיל אצילקרניטין עם פוטנציאל להקרנה של יילודים לאיתור שגיאות מולדות בחילוף החומרים. J Inherit Metab Dis. 1990;13(3):321-4.
7. Chace D.H., DiPerna J.C., Mitchell B.L., Sgroi B., Hofman L.F., Naylor E.W.. Electrospray טנדם ספקטרומטריית מסה לניתוח של אצילקרניטינים בדגימות דם מיובשות שלאחר המוות שנאספו בנתיחה מתינוקות עם סיבת מוות בלתי מוסברת. Clinic Chem. 2001;47(7):1166-82.
8. Rashed M.S., Bucknall M.P., Little D., Awad A., Jacob M., Alamodi M., Alwattar M., Ozand P.T. בדיקת כתמי דם לאיתור שגיאות מולדות של חילוף החומרים על ידי אלקטרוספריי טנדם ספקטרומטריית מסה עם תהליך אצווה של microplate ואלגוריתם מחשב לסימון אוטומטי של פרופילים חריגים. Clinic Chem. 1997 יולי; 43(7):1129-41.
9. Millington D.S., Terada N., Chace D.H., Chen Y.T., Ding J.H., Kodo N., Roe C.R. תפקידה של ספקטרומטריית מסה טנדם באבחון הפרעות חמצון חומצות שומן. Prog Clinic Biol Res. 1992; 375:339-54.
10. Rashed M.S., Ozan P.T., Harrison M.E., Watkins P.J.F., Evans S. 1994. Electrospray טנדם מסה ספקטרומטריית בניתוח חומצות אורגניות. קהילה מהירה. ספקטרום מסה. 8:122-33
11. Vreken P., van Lint A.E., Bootsma A.H., Overmars H., Wanders R.J., van Gennip A.H. אבחון מהיר של חומצות אורגניות פגמים בחמצון חומצות שומן על ידי ניתוח כמותי אלקטרוספריי טנדם-MS אציל-קרניטין בפלזמה. עו"ד Exp Med Biol. 1999; 466:327-37.
12. Griffiths W.J., Jonsson A..P, Liu S., Rai D.K., Wang Y. Electrospray וספקטרומטריית מסה טנדם בביוכימיה. Biochem J. 2001 1 במאי; 355(Pt 3):545-61.
13. דולי ק.סי. ספקטרומטריית מסה טנדם במעבדה לכימיה קלינית. Clin Biochem. 2003 ספטמבר; 36(6):471-81.
14. Mikhailova S.V., Ilyina E.S., Zakharova E.Yu., Baydakova G.V., Bembeeva R.Ts., Shekhter O.V., Zakharov S.F. "חוסר קרבוקסילאז מרובה הנגרם על ידי מוטציות בגן הביוטינידאז// גנטיקה רפואית. - 2005. - מס' 2. - סי' 633-638.
15. Baydakova G.V., Bukina A.M., Goncharov V.M., Shekhter O.V., Bukina T.M., Pokrovskaya A.Ya., Zakharova E.Yu., Mikhailova S.V., Fedonyuk I.D., Kolpakchi L.M., Semykina L.I. אבחון של מחלות מטבוליות תורשתיות על בסיס שילוב של שיטות של טנדם ספקטרומטריית מסה ואבחון אנזימים, Medical Genetics, 2005, כרך 4, מס' 1, עמ'. 28-33.
16. Zakharova E.Yu., Ilyina E.S., Bukina A.M., Bukina T.M., Zakharov S.F., Mikhailova S.F., Fedonyuk I.D., Baidakova G.V., Semykina L. .I., Kolpakchi L.M., Zaitseva M.N. "תוצאות סקר סלקטיבי למחלות מטבוליות תורשתיות בקרב חולי מחלקות נוירופסיכיאטריות". הקונגרס הכל-רוסי השני, "טכנולוגיות מודרניות ברפואת ילדים וכירורגיית ילדים", הליכים של הקונגרס, עמ' 141-142.
17. Baidakova G.V., Boukina A.M., Boukina T.M., Shechter O.V., Michaylova S.V. I'lina E.S, Zakharova E.Yu שילוב של ספקטרומטריית מסה טנדם וניתוח אנזימים ליזוזומליים - כלי יעיל להקרנה סלקטיבית עבור IEM במרפאה נוירולוגית. הסימפוזיון השנתי ה-41 של SSIEM, אמסטרדם, 31 באוגוסט עד 3 בספטמבר, 2004.
18. Mikhaylova S.V., Baydakova G.V., Zakharova E.Y., Il'ina E.S. מקרים ראשונים של מחסור ביוטינידאז ברוסיה. כתב העת European Journal of Human Genetics Vol.13-Supplement1-May, 2005, p. 386.
19. Baydakova G.V., Zakharova E.Yu., Zinchenko R.A. מחסור של חומצת שומן acyl-CoA בינונית שרשרת דהידרוגנאז. חומרים של הקונגרס V של האגודה הרוסית לגנטיקה רפואית, אופא, מאי 2005, גנטיקה רפואית, כרך 4, מס' 4, עמ'. 153.
20. Zakharova E.Yu., Baydakova G.V., Shekhter O.V., Ilyina E.S., Mikhailova S.V. Tandem mass spectrometry - גישה חדשה לאבחון הפרעות מטבוליות תורשתיות, Proceedings of the V Congress of the Russian Society of Medical Genetics, Ufa, May 2005, Medical Genetics, vol. 4, no. 4, p.188.
21. Mikhaylova S.V., Zakharova E.Y, Baidakova G.V., Shehter O.V., Ilina E.S תוצאה קלינית של חומצת גלוטארית מסוג I ברוסיה. י. ירושה. Metab.Dis 2007, v. 30, עמ'. 38 22. Baydakova GV, Tsygankova PG. אבחון פגמים בחמצון β במיטוכונדריה ברוסיה. J Inherit Metab Dis (2008) 31 (Suppl 1) p.39

הַדְרָכָה

מה לעשות אם יש צורך לבדוק ילד עבור הפרעות מטבוליות תורשתיות?

• לפי הזמנה לרופא או באופן עצמאי בכל משרד רפואי INVITRO, יש לרכוש מראש ערכת בדיקה הכוללת:

הכנה למחקר וכללי נטילת דם מיילודים

1. לקיחת דגימות דם מיילודים מתבצעת במוסדות מיילדות על ידי עובד שעבר הכשרה מיוחדת, ובמקרה של שחרור מוקדם של יילוד (עד 4 ימי חיים) - על ידי אחות פטרונות שהוכשרה במיוחד.
2. בעת בדיקת יילודים, יש לבצע דגימת דם לא לפני 4 ימים בלידה מלאה ו-7 ימים בפגים. ביילודים נלקח דם מהעקב, בילדים מעל 3 חודשים - מהאצבע.
3. ביילודים חייבים לעבור לפחות 4 ימים מתחילת השד המלא או האכלה מלאכותית ועד לדגימת דם. דגימת דם מתבצעת 3 שעות לאחר האכלה (בילודים - לפני ההאכלה הבאה).
4. לפני לקיחת דם מיילוד יש לשטוף היטב את כף הרגל של הילד בסבון, לנגב בעזרת ספוגית סטרילית הרטובה באלכוהול 70% ולאחר מכן לסחוב את האזור המטופל במטלית יבשה סטרילית!
5. הדקירה מתבצעת עם מצלקת חד פעמית סטרילית לעומק של 2.0 מ"מ (אזורי הניקוב מוצגים על). טיפת הדם הראשונה מוסרת עם ספוגית יבשה סטרילית.
6. על ידי לחץ רך על העקב, הם תורמים להצטברות של טיפת דם שנייה, שעליה מוחל כרטיס נייר סינון מיוחד בניצב וספוג לחלוטין ובאמצעות 5 אזורים המתוארים בקו עגול. כתמי דם לא יהיו קטנים מהגודל המצוין בטופס, סוג הכתמים חייב להיות זהה משני הצדדים. לעולם אל תשתמש בצד הנגדי של נייר הסינון כדי למלא עיגולים.
7. לאחר נטילת דם יש לייבש את אזור הדקירה בעזרת ספוגית סטרילית ולהדביק מדבקה קוטל חיידקים על מקום הדקירה. תשומת הלב! הדיוק והאמינות של המחקר תלויים באיכות דגימת הדם!
8. יבש כרטיס נייר סינון מיוחד למשך 2-4 שעות לפחות בטמפרטורת החדר. הימנע מאור שמש ישיר! לשם כך, החזירו את הדש החיצוני של הכרטיס לאחור והביאו את קצהו מתחת למשטח הנגדי של המסנן (שם לא מצוינים עיגולים), . לאחר שטיפות הדם יבשות לחלוטין, העבר את דש הכרטיס על פני השטח של המסנן. חתמו בתחתית הכרטיס את שם המשפחה וה-I.O של הילד (שם) וציינו את תאריך דגימת הדם (Date), . מניחים את הכרטיס במעטפה קטנה ומכניסים אותו למעטפה גדולה חתומה מראש. יש למלא את טופס ההזמנה ולצרף אותו גם במעטפה הגדולה.
9. תנו את המעטפה הגדולה למשרד הרפואי הקרוב ביותר של INVITRO (המעטפה אינה סגורה). עובד INVITRO יבדוק בנוכחותכם את תכולת המעטפה ואת תקינות מילוי טופס ההזמנה.

אחסון והובלה: לפני ואחרי דגימת דם, אחסן את הערכה בטמפרטורת החדר במקום יבש; הימנע ממגע עם מערכות חימום; הימנע מאור שמש ישיר; בעת ההובלה, ארזו את הסט(ים) בשקית ניילון אטומה.

אינדיקציות לקביעת תור

• מקרים דומים של המחלה במשפחה.
• מקרים של מוות פתאומי של ילד בגיל צעיר במשפחה.
• הידרדרות חדה במצבו של הילד לאחר תקופה קצרה של התפתחות תקינה (התקופה האסימפטומטית יכולה להיות בין מספר שעות למספר שבועות).
• ריח חריג של גוף ו/או שתן ("מתוק", "עכבר", "כרוב מבושל", "רגליים מזיעות" וכו').
• הפרעות נוירולוגיות - פגיעה בהכרה (עייפות, תרדמת), סוגים שונים של התקפים עוויתיים, שינויים בטונוס השרירים (יתר לחץ דם בשרירים או טטרפרזיס ספסטי).
• הפרעות בקצב הנשימה (ברדיפניאה, טכיפניאה, דום נשימה).
• הפרות מאיברים ומערכות אחרות (פגיעה בכבד, hepatosplenomegaly, קרדיומיופתיה, רטינופתיה).
• שינויים בפרמטרים מעבדתיים של דם ושתן - נויטרופניה, אנמיה, חמצת מטבולית / אלקלוזה, היפוגליקמיה / היפרגליקמיה, פעילות מוגברת של אנזימי כבד ורמות קריאטין פוספוקינאז, קטונוריה.
• אבחון נוסף של 37 מחלות מטבוליות תורשתיות יחד עם תוכנית ממלכתית חובה לאיתור 5 מחלות תורשתיות: סקר ילודים: "HEEL".

פרשנות של תוצאות

פירוש תוצאות הבדיקה מכיל מידע עבור הרופא המטפל ואינו מהווה אבחנה. אין להשתמש במידע בסעיף זה לצורך אבחון עצמי או טיפול עצמי. אבחון מדויק נעשה על ידי הרופא, תוך שימוש הן בתוצאות בדיקה זו והן במידע הדרוש ממקורות אחרים: היסטוריה, תוצאות בדיקות אחרות וכו'.

יחידות מדידה במעבדת INVITRO: מיקרומול/ליטר. ערכי התייחסות לפרמטרים שנקבעו (פרשנות מפורטת של התוצאות)

פרשנות כללית לתוצאה

מחלות מטבוליות תורשתיות	שינוי בריכוז המטבוליטים
מחלת שתן סירופ מייפל (לאוצינוזה)	לאוצין ולין
ציטרולינמיה מסוג 1, ציטרולינמיה ביילוד	ציטרולין
Argininosuccinic aciduria (ASA) / Argininosuccinate ליאז ליאז חסר	ציטרולין
מחסור ב-Ornithine transcarbamylase	ציטרולין
מחסור בסינתאז קרבמיל פוספט	ציטרולין
מחסור ב-N-אצטילגלוטמט סינתאז	ציטרולין
היפרגליקינמיה לא קטוטית	גליצין
טירוסינמיה סוג 1	טירוזין
טירוסינמיה סוג 2	טירוזין
מחסור בהומוציסטינוריה/ציסטתיונין בטא סינתזה	מתיונין
פנילקטונוריה	פנילאלנין
מחסור בארגינינמיה/ארגינאז	ארגינין
חומצת פרופיונית (מחסור ב-propionyl-CoA carboxylase)	C3
חומצת מתילמלונית	C3 (C4DC)
אצידמיה איזוולרית (מחסור ב- isovaleryl-CoA dehydrogenase)	C5
מחסור ב-2-methylbutyryl CoA dehydrogenase	C5
חוסר איזובוטריל CoA דהידרוגנאז	C4
חומצת גלוטרית סוג 1 (מחסור ב- glutaryl-CoA dehydrogenase סוג 1)	С5DC
מחסור ב-3-methylcrotonyl CoA carboxylase	C5OH
מחסור מרובה בקרבוקסילאז	C5OH C3
חוסר ביוטינידאז	C5OH
חומצה מאלונית (מחסור ב-malonyl-CoA decarboxylase)	С3DC
מחסור באצטו-אצטיל CoA במיטוכונדריאלי בתיולאז	C5:1 C5OH
מחסור ב-2-methyl-3-hydroxybutyryl CoA dehydrogenase	C5:1 C5OH
מחסור ב-3-hydroxy-3-methylglutaryl CoA lyase	C5OH C6DC
מחסור ב-3-methylglutaconyl CoA hydratase	С6DC
מחסור ב-acyl-CoA dehydrogenase שרשרת בינונית	C6 C8 C10 C10:1
מחסור ב-acyl-CoA dehydrogenase שרשרת ארוכה מאוד	C14 C14:1 C14:2 C16:1
מחסור ב-acyl-CoA dehydrogenase קצר שרשרת	C4
חוסר שרשרת ארוכה של 3-hydroxyacyl-CoA דהידרוגנאז (פגם חלבון תלת-פונקציונלי)	C16OH C18OH C18:1OH C18:2OH
חומצת גלוטרית סוג II (חסר גלוטריל-CoA דהידרוגנאז סוג II), חסר רב באציל-CoA דהידרוגנאז	С4 С5 С6 С8 С10 С12 С14 С16 С18
הובלה לקויה של קרניטין	C0 ↓ ירידה כוללת באצילקרניטינים
מחסור של קרניטין פלמיטויל טרנספראז מסוג I	C0 C16 ↓ C18:1 ↓ C18:2 ↓
מחסור של קרניטין פלמיטויל טרנספראז מסוג II	C0 ↓ C16 C18:1 C18:2
מחסור בטרנסלוקאז של קרניטין/אצילקרניטין	C0 ↓ C16 C18:1 C18:2
מחסור ב-2,4-dienoyl CoA רדוקטאז	ג10:2
מחסור ב-3-ketoacyl-CoA thiolase שרשרת בינונית	С6DC С8DC
מחסור ב-acyl-CoA dehydrogenase שרשרת בינונית/קצרה	C4OH C6OH

מה לעשות אם המחקר מגלה שינוי באינדיקטורים? יש להבין כי השינויים שהתגלו במהלך TMS אינם מאשרים את המחלה באופן מלא, ובמקרים מסוימים, יש צורך לעבור בדיקות נוספות (ראה רשימת בדיקות נוספות וכן) כדי לאמת את מהימנות ההפרות שזוהו. מומלץ להתייעץ עם גנטיקאי ורופא ילדים על מנת לפתח טקטיקה לפעולה משותפת. שימוש בספרות (ערכי התייחסות)

1. Wiley V., Carpenter K., Wilcken B. הקרנת יילודים עם ספקטרומטריית מסה טנדם: ניסיון של 12 חודשים ב- NSW אוסטרליה. Acta Pediatica 1999; 88(סuppl):48-51.
2. Rashed MS, Rahbeeni Z, Ozand PT. יישום של ספקטרומטריית מסה טנדם אלקטרוספריי להקרנת יילודים. Semin Perinatol 1999; 23:183-93.
3. Schulze A., Lindner M., Kohlmüller D., Olgemöller K., Mayatepek E., Hoffmann G.F. סקר ילוד מורחב לאיתור שגיאות מולדות של מטבוליזם על ידי אלקטרוספריי יינון-טנדם ספקטרומטריית מסה: תוצאות, תוצאה והשלכות, רפואת ילדים, 2003; 111; 1399-1406.
4. Hoffman G., Litsheim T., Laessig R. יישום של ספקטרומטריית מסה טנדם בתוכנית ההקרנה של ויסקונסין לתינוקות. MMWR Morb Mortal Wkly Rep 2001; 50 (RR-3): 26–7.
5. Lin W.D., Wu J.Y., Lai C.C., Tsai F.J., Tsai C.H., Lin S.P., Niu D.M. מחקר פיילוט של הקרנת יילודים על ידי ספקטרומטריית מסה טנדם יינון אלקטרוספריי בטייוואן. Acta Paediatr Taiwan 2001; 42:224-30.
6. Zytkovicz T.H., Fitzgerald E.F., Marsden D., Larson C.A., Shih V.E., Johnson D.M., et al. ניתוח ספקטרומטרי מסה טנדם להפרעות אמינו, אורגניות וחומצות שומן בכתמי דם מיובשים של יילודים: סיכום שנתיים מתוכנית ההקרנה של ניו אינגלנד לתינוקות. Clin Chem 2001;47:1945–55.