קביעת קבוצת דם עם סרה סטנדרטית - מידע מפורט. קביעת סוג דם לפי סרה סטנדרטית קביעת סוג דם לפי שיטת הסרה

ההליך לקביעת קבוצות דם לפי מערכת ABO מורכב מזיהוי אנטיגנים A ו-B באדמית באמצעות נוגדנים סטנדרטיים ושימוש באגלוטינינים בפלזמה או בסרום של הדם המנותח עם אריתרוציטים סטנדרטיים. הטכניקה פותחה בתחילת המאה ה-20 והיא עדיין בשימוש פעיל ברפואה. קביעת האנטיגנים A ו-B מתבצעת הודות לקוליקונים האנטי-A והאנטי-B.

מושגי יסוד

אצל תורמים, לא רק אנטיגנים באריתרוציטים נקבעים תמיד, אלא גם אגלוטינינים בסרום (פלזמה) באמצעות אריתרוציטים סטנדרטיים. דם ורידי משמש כחומר ביולוגי. לפני המחקר, יש לוותר על מזון שומני יום לפני הניתוח ולא לעשן חצי שעה לפני הבדיקה. קבוצות הדם נקבעות פעמיים: תחילה במחלקה הרפואית שבה קוטפים את החומר, ולאחר מכן מאושרות במחקר במעבדה.

קביעת קבוצות דם לפי מערכת ABO היא הבדיקה העיקרית בה משתמשים בטרנספוזיולוגיה. כמו כן, לחלק מהחיות יש מערכת דומה של קבוצות דם, כמו שימפנזים, גורילות ובונובו.

היסטוריית גילוי

במדע ישנה דעה מקובלת לפיה השיטה לקביעת קבוצות דם לפי מערכת ABO זוהתה לראשונה על ידי קארל לנדשטיינר, מדען אוסטרי, בשנת 1900. אחר כך הוא תיאר בעבודתו שלושה סוגים של אנטיגנים. על כך כעבור שלושים שנה הוענק לו פרס נובל לרפואה ופיזיולוגיה. בשל העובדה שלא היו קשרים הדוקים בין מדענים קודם לכן, התברר מאוחר יותר שהסרולוג הצ'כי יאן ג'נסקי, ללא קשר למחקרו של ק' לנדשטיינר, תיאר לראשונה ארבע קבוצות דם אנושיות, אך מחקריו לא היו ידועים ברבים. קהל. נכון לעכשיו, הסיווג שפותח על ידי יא' ינסקי הוא המשמש ברוסיה וברפובליקות של ברית המועצות לשעבר. בארצות הברית, W.L. Moss יצר עבודה דומה משלו ב-1910.

שיטה לקביעת קבוצות דם לפי מערכת ABO באמצעות קוליקונים

יש לקבוע את קבוצת הדם בחדר עם תאורה טובה, תוך התבוננות בטווח הטמפרטורות שבין 15 ל-25 מעלות צלזיוס, שכן חריגות מנורמה זו עשויות להשפיע על תוצאות המחקר. ראשי התיבות ושם המשפחה של המטופל כתובים על הצלחת או הצלחת. משמאל לימין או במעגל, ייעודים סטנדרטיים של קבוצות מיושמים (O (I), A (II), B (III)). מתחתיהן מניחים טיפה אחר טיפה את הסרום המתאים עם פיפטות נפרדות לכל סוג. ואז מוסיפים להם את הדם של החולה. חומר למחקר נלקח מתנוך האוזן או האצבע. זה נדרש על ידי הטכניקה של קביעת קבוצת הדם לפי מערכת ABO.

זה גם לגיטימי להשתמש באדרציטים שנמצאים במבחנה לאחר היווצרות קריש. יש צורך שכמות הסרום תהיה פי עשרה מכמות הדם שנוספה. לאחר מכן מערבבים את הטיפות עם מוטות זכוכית (לכל אחד בנפרד). תוך חמש דקות, נער בעדינות את הצלחת, צפה בהופעת תגובת המגלוטינציה. זה נמצא בעובדה שמופיעים גושים אדומים קטנים, ואז מתמזגים לגדולים יותר. הסרום בשלב זה מאבד כמעט לחלוטין צבע.

על מנת להעלים את ההמגלוטינציה הכוזבת על ידי צבירה פשוטה של ​​אריתרוציטים, לאחר שלוש דקות מוסיפים טיפה אחת של תמיסת מלח ובודקים האם האגלוטינציה נמשכת. אם כן, אז זה נכון. הכל, קביעת קבוצות הדם לפי מערכת ABO הושלמה.

פרשנות של תוצאות

כתוצאה מכך, ניתן להבחין בארבע תגובות:

• צבירה אינה מתרחשת עם אף אחד מהסרים - הקבוצה הראשונה O (I);
• התגובה באה לידי ביטוי בסרה I(ab) ו-III(a) - הקבוצה השנייה A(II);
• צבירה מתרחשת עם סרה I(ab) ו-II(b) - הקבוצה השלישית B(III);
• אם התגובה מתרחשת עם שלושה סמים, יש צורך לבצע הליך נוסף עם ריאגנטים מקבוצת AB(IV), שהם סטנדרטיים; אם אין צפיפות בירידה כזו, אפשר להניח שזוהי קבוצת הדם הרביעית AB (IV).

שיטת אקספרס לגורם Rh

השיטה לקביעת קבוצות דם על פי מערכת ABO כוללת זיהוי סימולטני של גורם Rh (Rh).

פני הצלחת מורטבים מראש ועליו כתובים "סרום בקרה" ו"סרום אנטי רזוס". לאחר מכן מניחים טיפה אחת או שתיים של הריאגנטים הדרושים מתחת לכתובות והחומר המנותח מתווסף אליהם. לשם כך ניתן להשתמש גם בדם מאצבע (בכמות זהה לנפח הסרום) או אריתרוציטים שנותרו בתחתית הצינור לאחר הופעת קריש (חצי מנפח הסרום). בחירת החומר אינה משפיעה על התוצאה הסופית. לאחר מכן מערבבים את הדם והסרום עם מוט זכוכית יבש, ולאחר מכן התגובה צפויה להתרחש במשך חמש דקות. על מנת לבטל קריאות שגויות, מוסיפים תמיסת נתרן כלוריד איזוטונית (רק כמה טיפות) לאחר שלוש עד ארבע דקות. קביעת קבוצת הדם על פי מערכת ABO ו-Rh מתבצעת לעתים קרובות מאוד.

אם מתרחשת צבירה של תאי דם אדומים בטיפת סרום, הדבר מצביע על דם רזוס חיובי. על פי הסטטיסטיקה, Rh + נמצא ב-85% מאוכלוסיית העולם. היעדר זה מאפשר לנו לדבר על השתייכות Rh-שלילית. אם מופיעה אגלוטינציה בסרום הבקרה, אז הוא הפך לבלתי שמיש. למרבה הצער, האלגוריתם לקביעת קבוצת הדם לפי מערכת ABO לא תמיד עובד בצורה מושלמת.

אילו טעויות ניתן לעשות בטכניקה זו?

אי דיוקים בקביעת השתייכות הדם לקבוצה מסוימת תלויים בסיבות הבאות:

• טֶכנִי.
• פרטים ביולוגיים של הדם הנחקר.
• אופי פגום של סרומים ואריתרוציטים סטנדרטיים.

טעויות טכניות

שגיאות אפשריות בקביעת סוג הדם של מערכת ABO בצורה צולבת:

שגיאות של ספציפיות ביולוגית

השגיאות הקשורות לפרטים הביולוגיים של הדם המנותח מחולקות לשני סוגים.

• תלוי במאפיינים של אריתרוציטים.
• שגיאות עקב המאפיינים הביולוגיים של הסרום.

בואו נשקול כל סוג ביתר פירוט.

תלוי במאפיינים של תאי דם אדומים

• צבירה מאוחרת עקב צורות "חלשות" של אריתרוציטים ואנטיגנים. על מנת למנוע טעויות, יש צורך לקבוע את סוג הדם של התורמים והמקבלים באמצעות אריתרוציטים סטנדרטיים. יש לזהות Agglutinogen A 2 על ידי בדיקה חוזרת עם סוגים אחרים של ריאגנטים וכלי זכוכית אחרים, מה שמגדיל את זמן רישום התגובה.
• "Panagglutination" ("אוטואגלוטינציה") - היכולת של דם להראות את אותה תגובה בעלת אופי לא ספציפי עם כל הסרה, כולל זה שלו. לאחר חמש דקות, חומרת הצבירה כזו נחלשת, אם כי היא אמורה לעלות. מקרים דומים נצפים בחולים עם סרטן, כוויות וכו '. כביקורת, יש צורך להעריך את הביטוי של אגלוטינציה של אריתרוציטים מנותחים בסרום הסטנדרטי של הקבוצה הרביעית ובמי מלח. עם "panagglutination", קבוצת הדם נקבעת כתוצאה משטיפה משולשת של אריתרוציטים. אם זה לא נותן את התוצאה הרצויה, כדאי לקחת מחדש דגימת דם למבחנה שחוממת לפני ההליך ולהניח את הדגימה במיכל תרמי כדי לסייע בשמירה על טמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס ומעלה. לאחר מכן יש להעביר אותו למעבדה, שם שומרים על הטמפרטורה הנ"ל ומשתמשים בתמיסת מלח מחוממת, צלחת וריאגנטים.

• לפעמים אריתרוציטים של הדם המנותח מסודרים כמו "עמודות מטבעות", וניתן לטעות בהם כ-agglutinates. על ידי הוספת שתי טיפות של מי מלח איזוטוני וניעור עדין של הצלחת, תאי הדם האדומים נמצאים במיקום הנכון.
• צבירה לא מלאה או מעורבת המתרחשת בחולים עם הקבוצה השנייה, השלישית והרביעית כתוצאה מהשתלת מח עצם או בשלושת החודשים הראשונים לאחר עירוי דם 0 (I).

סרום שנקבע ביולוגית

שגיאות הקשורות לשימוש באריתרוציטים וסרה תקניים פגומים

סמים חלשים שפג תוקפם או בעלי טיטר של פחות מ-1:32 מסוגלים ליצור אגלוטינציה חלשה ומאוחרת. השימוש בריאגנטים כאלה אינו מקובל.

השימוש באריתרוציטים או סרום סטנדרטיים לא מתאימים, שהוכנו בתנאים לא סטריליים ואינם נשמרים מספיק, מוביל להופעת אגלוטינציה "חיידקית", שהיא בעלת אופי לא ספציפי.

ישנן הנחות פופולריות רבות לגבי סוגי הדם של מערכת ABO שהופיעו מיד לאחר גילויה בתרבויות שונות ברחבי העולם. כך, למשל, בשנות ה-30 של המאה הקודמת ביפן ובכמה מדינות אחרות, צברה פופולריות תיאוריה המקשרת בין סוג דם לסוג כזה או אחר של אישיות. תיאוריות דומות פופולריות כיום.

ישנה גם דעה שאדם עם קבוצה A נוטה להנגאובר חמור, O קשורה לשיניים טובות וקבוצה A2 קשורה לרמת IQ הגבוהה ביותר. אבל טענות כאלה לא הוכחו מדעית.

שקלנו את קביעת קבוצות הדם לפי מערכת ABO תוך שימוש בסמים סטנדרטיים.

קבוצות דם הן נורמליות בירושה סימנים אימונולוגיים שונים של דם. בהתבסס על מאפיינים אלו, כל האנשים מחולקים לארבע קבוצות, ללא קשר לגזע, גיל ומין. סוג הדם של אדם נשאר קבוע לאורך כל חייו. אנשים מסוג דם אחד נבדלים מאנשים מסוגי דם אחרים על ידי נוכחות או היעדר של אגלוטינוגנים (A ו-B) הכלולים באריתרוציטים ובאגלוטינינים α ו-β הכלולים בסרום.

קבוצות דם של מערכת AB0: קבוצת הדם 0(I) מכילה אגלוטינינים α ו- β, חסרים בה אגלוטינוגנים; סוג דם A (II) - agglutinin α ו- agglutinogen A; B(III) סוג דם-אגלוטינין ואגלוטינוגן B; סוג דם AB(IV) - מכיל אגלוטינוגנים A ו-B, אגלוטינינים חסרים.

הנמען הוא האדם שעובר עירוי דם, התורם הוא האדם שנותן את דמו לעירוי. תואם באופן אידיאלי עבור הנמען הוא הדם של אותה קבוצה. דם אינו תואם לחלוטין אם למקבל יש אגלוטינינים לאדמת הדם של התורם, מכיוון שבמקרים אלו משולב אגלוטינוגן A של דם אחד עם אגלוטינין A של השני, או אגלוטינוגן B עם אגלוטינין β. מה שנקרא מתפתח, כלומר, הדבקה של אריתרוציטים לגושים קטנים וגדולים. עירוי של דם לא תואם מוביל לתוצאות חמורות ויכול להיות סיבת המוות. לא ניתן לתת עירוי דם מכל קבוצה אחרת לנמען מקבוצה 0(I), למעט אותה. למקבל קבוצת AB(IV) אין אגלוטינינים כלשהם, כך שניתן להכניס לו עירוי דם מכל הקבוצות. הנמען של קבוצת AB(IV) הוא נמען אוניברסלי. דם מקבוצה 0(I) יכול לעבור עירוי לאנשים מכל סוג דם. לכן, אנשים עם קבוצת 0(I) נקראים תורמים אוניברסליים.

בנוסף לאגלוטינוגנים A ו-B, לעיתים מצויים אגלוטינוגנים אחרים באריתרוציטים (למשל וכו'). במקרים בהם הדם אינו תואם לגורם Rh (ראה), אי אפשר גם לבצע עירוי על מנת למנוע סיבוכים חמורים הקשורים להרס של כדוריות דם אדומות (המוליזה).

לפני כל עירוי דם, המתבצע על פי מרשם ובפיקוח רופא, חובה לקבוע את קבוצת הדם ולזהות את התאמתה.

אורז. 1-4. קביעת קבוצות דם עם סרה סטנדרטית (A, B, 0).
אורז. 1. דם נבדק מקבוצה 0(I).
אורז. 2. דם נבדק מקבוצה A (II).
אורז. 3. דם נבדק מקבוצה B (III).
אורז. 4. דם נבדק מקבוצת AB (IV).

שיטה לקביעת קבוצות דם. לקביעת סוג הדם הכינו צלחת נקייה, עיפרון זכוכית, סרומים סטנדרטיים של קבוצות דם 0 (I), A (II) ו-B (III), בקבוקונים עם תמיסת נתרן כלורי איזוטונית, אלכוהול ויוד, כותנה סופגת, זכוכית מוטות שקופיות או זכוכית ושלוש פיפטות, שחייבות להיות יבשות (מים הורסים).

הצלחת מחולקת בעיפרון לשלושה מגזרים, המסמנים 0 (I), A (I), B (III). טיפה אחת גדולה של סרום סטנדרטי של 0 (I), A (II), B (III) קבוצות דם מוחל על המגזר המקביל עם פיפטות שונות. לאחר שחרור טיפת סרום מהפיפטה, הוא מוריד מיד לתוך הבקבוקון שממנו נלקח. את האצבע מנגב באלכוהול לפני נטילת דם. לאחר הזרקה לעיסת האצבע, נסחטת טיפת דם החוצה בעזרת מחט. בעזרת מוט זכוכית או פינה של שקף זכוכית נקי, שלוש טיפות דם (כל אחת בגודל של ראש סיכה) מועברות לצלחת לצד הסרה של דם 0 (I), A (II) ו-B (III) קבוצות. לאחר ציון השעה בשעון, בכל פעם עם מוטות זכוכית חדשים מערבבים את הדם לסירוגין עם הסרה של קבוצות הדם 0 (I), A (II) ו-B (III), עד שהתערובת הופכת לוורודה אחידה. קביעת קבוצת הדם מתבצעת תוך 5 דקות. (עקבו אחרי השעון). לאחר זמן זה, מוסיפים טיפה אחת של תמיסת נתרן כלוריד איזוטונית לכל טיפה מהתערובת. לאחר מכן, הצלחת עם הדם מזועזעת מעט, מוטה לכיוונים שונים כך שהתערובת מתערבבת היטב עם תמיסת נתרן כלורי איזוטונית, אך אינה מתפשטת על הכוס. בתגובה חיובית, בתוך הדקות הראשונות מתחילת הערבוב, עוד לפני הוספת תמיסה איזוטונית, מופיעים בתערובת גרגירים אדומים זעירים המורכבים מתאי דם אדומים הדבוקים יחד. גרגרים קטנים מתמזגים לגדולים יותר, ולעיתים לפתיתים בגדלים שונים (תופעת האגלוטינציה). עם תגובה שלילית, התערובת נשארת בצבע ורוד אחיד. כאשר עורכים בדיקה עם שלושת הסמים המפורטים לעיל עבור כל סוג דם, שילוב מסוים של תגובות חיוביות ושליליות עלול ליפול (איור 1-4). אם שלושת הסרה נתנו תגובה שלילית, כלומר, כל התערובות נשארו בצבע ורוד אחיד, הדם שנבדק שייך לקבוצת 0 (I). אם רק הסרום A (I) של קבוצת הדם נתן תגובה שלילית, והסרום של קבוצות הדם 0 (I) ו-B (III) נתן תגובה חיובית, כלומר הופיעו בהם גרגרים, אז הדם הנבדק שייך ל- קבוצת A (II). אם הסרום B(III) של קבוצת הדם נתן תגובה שלילית, והסרום של קבוצות הדם 0(I) ו-A(II) - חיובי, אזי הדם הנבדק שייך לקבוצת B(III). אם כל שלושת הסרה נתנו תגובות חיוביות, כלומר גרנולריות הופיעה בכל מקום, הדם שנבדק שייך לקבוצת AB (IV). כל שילוב אחר מצביע על טעות בהגדרה. גורמים לטעויות בקביעת קבוצות דם ואמצעים למניעתן. 1. עודף דם אם נלקחת טיפה גדולה מדי. טיפת דם צריכה להיות קטנה פי 10 מטיפה של סרום. 2. אם הסרה חלשה או שהאריתרוציטים של הנבדק אינם נצמדים זה לזה היטב, ניתן לצפות באגלוטינציה (ראה), שכן התגובה מתחילה מאוחר או מתונה. יש צורך לקחת סמים אמינים, שפעילותם נבדקת ותאריך התפוגה לא פג. 3. בטמפרטורות סביבה נמוכות, אגלוטינציה קרה לא ספציפית - עלולה להתרחש פנאגלוטינציה. הוספה של נתרן כלוריד איזוטוני ואחריה ניעור הצלחת בדרך כלל מבטלת צבירה קרה. כדי למנוע זאת, טמפרטורת האוויר בסביבה לא צריכה להיות נמוכה מ-12 ולא גבוהה מ-25°. 4. בהתבוננות ארוכה התערובת מתחילה להתייבש מהפריפריה, שם מופיעה לעיתים גרגירים. בהיעדר גרנולריות בחלק הנוזלי של התערובת, ניתן לדבר על תגובת צבירה שלילית.

לאחר קביעת קבוצת הדם, על הרופא לבצע מיד ערך על הגיליון הקדמי. לאחר סיום העבודה, יש לשטוף היטב את הצלחת, הפיפטות ושקופיות הזכוכית מתחת לברז במים חמים, לנגב ולהניח בארון. באמפולות או בקבוקונים מאוחסנים בחדר יבש וחם בארון נעול בטמפרטורה של לא יותר מ-20 מעלות.

קביעת קבוצת הדם על ידי אריתרוציטים סטנדרטיים (מה שמכונה תגובה כפולה) משמשת רק במעבדות ובתחנות. בעבודה יומיומית הם משתמשים בתגובת האגלוטינציה עם סרה סטנדרטית לפי השיטה שתוארה לעיל.

החומרים מפורסמים לסקירה ואינם מרשם לטיפול! אנו ממליצים לפנות להמטולוג במכון הבריאות שלך!

סוג דם וגורם Rh הם חלבונים מיוחדים שקובעים את אופיו האינדיבידואלי, בדיוק כמו צבע העיניים או שיערו של אדם. לקבוצה ול-Rh יש חשיבות רבה ברפואה בטיפול באיבוד דם, מחלות דם, ומשפיעות גם על היווצרות הגוף, תפקוד האיברים ואפילו על המאפיינים הפסיכולוגיים של האדם.

הרעיון של סוג דם

אפילו רופאים קדומים ניסו לפצות על אובדן דם על ידי עירוי דם מאדם לאדם ואפילו מבעלי חיים. ככלל, לכל הניסיונות הללו הייתה תוצאה עצובה. ורק בתחילת המאה ה-20 גילה המדען האוסטרי קרל לנדשטיינר הבדלים בסוגי הדם בבני אדם, שהיו חלבונים מיוחדים באריתרוציטים - אגלוטינוגנים, כלומר, גורמים לתגובת אגלוטינציה - הדבקה של אריתרוציטים. היא הייתה הסיבה למותם של חולים לאחר עירוי דם.

ישנם 2 סוגים עיקריים של אגלוטינוגנים, אשר זכו לשמות A ו-B על תנאי. הדבקה של אריתרוציטים, כלומר, אי התאמה לדם, מתרחשת אם האגלוטינוגן מתחבר עם חלבון באותו שם - אגלוטינין, הכלול בפלסמת הדם, בהתאמה, א. ו ב. זה אומר שבדם אנושי לא יכולים להיות חלבונים באותו השם שגורמים לאגלוטינציה של אריתרוציטים, כלומר אם יש אגלוטינוגן A אז הוא לא יכול להכיל אגלוטינין א.

כמו כן, נמצא כי שני האגלוטינוגנים, A ו-B, יכולים להיות בדם, אך אז הוא אינו מכיל כל סוג של אגלוטינינים, ולהיפך. כל אלה הם הסימנים הקובעים את קבוצת הדם. לכן, כאשר החלבונים בעלי אותו שם באריתרוציטים ובפלזמה משולבים, מתפתח קונפליקט על קבוצת הדם.

סוגי קבוצות דם

בהתבסס על גילוי זה, 4 סוגים עיקריים של קבוצות דם זוהו בבני אדם:

• ה-1, שאינו מכיל אגלוטינוגנים, אך מכיל גם אגלוטינינים a ו-b, הוא סוג הדם הנפוץ ביותר, שנמצא אצל 45% מאוכלוסיית העולם;
• שנית, המכיל agglutinogen A ו agglutinin b, נקבע ב-35% מהאנשים;
• שלישית, שבה יש agglutinogen B ו-agglutinin a, ל-13% מהאנשים יש את זה;
• רביעית, המכיל גם אגלוטינוגנים A וגם B, ואינו מכיל אגלוטינינים, סוג דם זה הוא הנדיר ביותר, הוא נקבע רק ב-7% מהאוכלוסייה.

ברוסיה, ייעוד קיבוץ דם על פי מערכת AB0 מקובל, כלומר על פי התוכן של agglutinogens בו. בהתאם לכך, טבלת קבוצות הדם נראית כך:

סוג הדם עובר בתורשה. האם סוג הדם יכול להשתנות - התשובה לשאלה זו היא חד משמעית: היא לא יכולה. למרות שההיסטוריה של הרפואה יודעת את המקרה היחיד הקשור למוטציות גנים. הגן הקובע את קבוצת הדם ממוקם בזוג ה-9 של מערך הכרומוזומים האנושי.

חָשׁוּב! השיפוט לגבי סוג הדם המתאים לכולם איבד את הרלוונטיות שלו היום, כמו גם את הרעיון של תורם אוניברסלי, כלומר, הבעלים של קבוצת הדם הראשונה (אפס). תת-מינים רבים של קבוצות דם התגלו, ורק דם של קבוצה אחת עובר עירוי.

גורם Rh: שלילי וחיובי

למרות גילוי קבוצות הדם של לנדשטיינר, תגובות עירוי עדיין המשיכו להתרחש במהלך העירוי. המדען המשיך במחקר שלו, ויחד עם עמיתיו וינר ולווין, הוא הצליח לגלות עוד חלבון אנטיגן אריתרוציטים ספציפי - גורם Rh. הוא זוהה לראשונה בקוף הרזוס, שממנו קיבל את שמו. התברר ש-Rh קיים גם בדם של רוב האנשים: ל-85% מהאוכלוסייה יש את האנטיגן הזה, ול-15% אין אותו, כלומר יש להם גורם Rh שלילי.

הייחודיות של אנטיגן Rh היא שכאשר הוא חודר לזרם הדם של אנשים שאין להם אותו, הוא תורם לייצור נוגדנים אנטי-Rh. במגע חוזר עם גורם Rh, נוגדנים אלו נותנים תגובה המוליטית חמורה, הנקראת קונפליקט Rh.

חָשׁוּב! כאשר גורם ה-Rh שלילי, המשמעות היא לא רק היעדר אנטיגן Rh בתאי הדם האדומים. נוגדנים נגד רזוס עשויים להיות נוכחים בדם, שיכולים להיווצר במהלך מגע עם דם חיובי ל-Rh. לכן, ניתוח עבור נוכחות של נוגדני Rh הוא חובה.

קביעת קבוצת הדם וגורם Rh

סוג דם וגורם Rh כפופים לקביעה חובה במקרים הבאים:

• לעירוי דם;
• להשתלת מח עצם;
• לפני כל ניתוח;
• במהלך ההריון;
• עם מחלות דם;
• ביילודים עם צהבת המוליטית (אי התאמה של רזוס לאם).

עם זאת, באופן אידיאלי, לכל אדם, גם מבוגר וגם ילד, צריך להיות מידע על השתייכות לקבוצה ול-Rh. לעולם לא ניתן לשלול שיש פציעה חמורה או מחלה חריפה שבה ייתכן שיהיה צורך דחוף בדם.

קביעת קבוצת הדם

קביעת קבוצת הדם מתבצעת עם נוגדנים חד שבטיים שהושגו במיוחד על פי מערכת AB0, כלומר, אגלוטינינים בסרום, הנותנים אגלוטינציה של אריתרוציטים במגע עם האגלוטינוגנים באותו השם.

האלגוריתם לקביעת קבוצת הדם הוא כדלקמן:

1. הכן קוליקלונים (נוגדנים חד-שבטיים) אמפולות אנטי-A - ורודות, ואמפולות אנטי-B - כחולות. הכינו 2 פיפטות נקיות, מקלות ערבוב מזכוכית ושקופיות זכוכית, מזרק חד פעמי 5 מ"ל לאיסוף דם, מבחנה.
2. בצע דגימת דם מוריד.
3. טיפה גדולה של קוליקלונים (0.1 מ"ל) מונחת על שקף זכוכית או צלחת מסומנת מיוחדת, טיפות קטנות של הדם הנבדק (0.01 מ"ל) מעורבבות עם מוטות זכוכית נפרדים.
4. התבונן בתוצאה במשך 3-5 דקות. טיפת דם מעורבת יכולה להיות הומוגנית - תגובה מינוס (-), או פתיתים נושרים - תגובה פלוס או צבירה (+). הערכת התוצאות חייבת להתבצע על ידי רופא. אפשרויות למחקר של קביעת קבוצת הדם מוצגות בטבלה:

הגדרה של גורם Rh

קביעת גורם Rh מתבצעת בדומה לקביעת קבוצת הדם, כלומר באמצעות נוגדן חד שבטי בסרום לאנטיגן Rh. טיפה גדולה מהריאגנט (zoliclone) וטיפה קטנה של דם שזה עתה נלקח מורחים על משטח קרמי לבן ונקי מיוחד באותן פרופורציות (10:1). הדם מעורבב בזהירות עם מוט זכוכית עם המגיב.

קביעת גורם ה-Rh עם קוליקונים לוקחת פחות זמן, מכיוון שהתגובה מתרחשת תוך 10-15 שניות. עם זאת, יש צורך לעמוד במגבלת הזמן המקסימלית של 3 דקות. ממש כמו במקרה של קביעת קבוצת הדם, מבחנה עם דם נשלחת למעבדה.

בפרקטיקה הרפואית כיום, נעשה שימוש נרחב בשיטת אקספרס נוחה ומהירה לקביעת השתייכות קבוצתית וגורם Rh באמצעות סוליקלונים יבשים, המדוללים במים סטריליים להזרקה מיד לפני המחקר. השיטה נקראת "Erythrotest-Groupcard", היא נוחה מאוד גם במרפאות וגם בתנאי קיצון ושטח.

אופיו ובריאותו של אדם לפי סוג דם

דם אנושי כתכונה הגנטית הספציפית שלו עדיין לא נחקר במלואו. בשנים האחרונות, מדענים גילו גרסאות של תת-קבוצות דם, טכנולוגיות חדשות מפותחות לקביעת תאימות, וכן הלאה.

לדם מיוחסת גם היכולת להשפיע על בריאותו ואופיו של בעליו. ולמרות ששאלה זו נותרה שנויה במחלוקת, עובדות מעניינות הבחינו על ידי שנים רבות של תצפיות. לדוגמה, חוקרים יפנים מאמינים שניתן לקבוע את אופיו של אדם לפי סוג דם:

• הבעלים של קבוצת הדם הראשונה הם אנשים בעלי רצון חזק, חזקים, חברותיים ורגשיים;
• הבעלים של הקבוצה השנייה נבדלים על ידי סבלנות, הקפדה, התמדה, חריצות;
• נציגי הקבוצה השלישית הם אנשים יצירתיים, אך יחד עם זאת הם מושפעים מדי, שתלטניים וקפריזיים;
• אנשים עם קבוצת הדם הרביעית חיים יותר עם רגשות, אינם החלטיים, לפעמים קשוחים באופן בלתי סביר.

באשר לבריאות, בהתאם לסוג הדם, מאמינים שהוא החזק ביותר ברוב האוכלוסייה, כלומר בקבוצה הראשונה. אנשים עם הקבוצה השנייה נוטים למחלות לב וסרטן, הבעלים של הקבוצה השלישית מאופיינים בחסינות חלשה, עמידות נמוכה לזיהומים ומתח, ונציגי הקבוצה הרביעית נוטים לפתולוגיה קרדיווסקולרית, מחלות מפרקים, סרטן.

מאמר זה יתמקד בשיטות לקביעת קבוצת הדם לפי מערכת AB0 וכן בשיטה המפורשת לקביעת גורם Rh.

ראשית, בואו נדבר על המטרות של קביעת קבוצת הדם, כמו גם על ההיסטוריה של מחקר הנושא הזה. העניין בעירוי דם קיים כבר זמן רב. אפילו במצרים העתיקה ניסו הרופאים לשפוך אותו לפצועים, חולים, גוססים. בעיקר חיות צעירות שימשו כתורמים. הוא האמין כי יש להם כוח טבעי מיוחד, יתר על כן, הם אינם כפופים למידות רעות, כמו אנשים. עירוי מאדם לאדם לא הצליח לרוב. הסיבות לכך התגלו מאוחר יותר על ידי הרופא האוסטרי קרל לנדשטיינר. הוא קבע שלאדם יש אנטיגנים ונוגדנים שונים היוצרים מערכת חיסונית מיוחדת.

נכון להיום בודדו כחמש מאות אנטיגנים שונים, אך בפועל, קבוצות הדם נקבעות לפי מערכת AB0.

לפי המערכת הזו דם מכיל:

• אגלוטינוגנים A ו-B (אנטיגנים). לוקליזציה - אריתרוציטים;
• אגלוטינינים אלפא ובטא (נוגדנים). לוקליזציה - סרום.

מיקומם בדם:

• אנטיגן A יחד עם נוגדני אלפא;
• אנטיגן B יחד עם נוגדני בטא;
• נוגדני אלפא ובטא בלבד.

יחד עם זאת, לא ניתן לאתר אנטיגנים ונוגדנים באותו שם, שכן פגישתם מובילה לביטוי מהיר של מה שנקרא. תגובות isohemagglutination, אשר יובילו להמוליזה (הרס) של תאי דם אדומים ותגובות פתולוגיות אחרות.

הטכניקה לקביעת קבוצת הדם היא ליישם ידע על תכונה זו.

• קבוצה 1: ללא אגלוטינוגנים, הסרום מכיל אגלוטינינים;
• קבוצה 2: יש A ובטא;
• קבוצה שלישית: יש B ואלפא;
• קבוצה רביעית: יש A, B, ללא אגלוטינינים.

טכניקת הגדרה

טכניקה לקביעת קבוצת הדם לפי מערכת AB0 מבוסס על תצפית חזותית של צבירה.

יש לבצע מחקר כאשר:

שאל את שאלתך לרופא לאבחון מעבדה קלינית

אנה פונייבה. היא סיימה את האקדמיה הרפואית של ניז'ני נובגורוד (2007-2014) והתמחות באבחון מעבדה קליני (2014-2016).

השיטה משמשת לרוב במעבדות סרולוגיות. מהות השיטה היא קביעת נוכחות או היעדר של אנטיגנים קבוצתיים A ו-B בדם הנבדק באמצעות סרה סטנדרטית של isohemagglutinating, וכן נוגדנים קבוצתיים α ו-β באמצעות אריתרוציטים סטנדרטיים. התגובה עם סרה סטנדרטית מתבצעת כמתואר לעיל.

התגובה עם אריתרוציטים סטנדרטיים מתבצעת כדלקמן.

ציוד נדרש

הציוד לתגובה עם אריתרוציטים סטנדרטיים שונה בכך שהוא דורש אריתרוציטים סטנדרטיים של שלוש קבוצות דם: 0 (I), A (II), B (III). אריתרוציטים סטנדרטיים מוכנים מדם של תורמים עם סוג דם ידוע ומאוחסנים ב-4-8 מעלות צלזיוס. חיי מדף 2-3 ימים.

הליך תגובה

1. דם למחקר נלקח מוריד לתוך צינור יבש, צנטריפוגה או נשאר לבד למשך 20-30 דקות לקבלת סרום.

2. על הצלחת המסומנת מורחים באמצעות פיפטה שלוש טיפות גדולות (0.1 מ"ל) של סרום הדם הנבדק מהמבחנה, ולצדן - טיפה אחת קטנה (0.01 מ"ל) של קבוצות אריתרוציטים סטנדרטיות.

3. אמצעים נוספים מבוצעים בדומה לשיטה באמצעות סרה סטנדרטית של isohemagglutinating: את הטיפות המתאימות מערבבים עם מוטות זכוכית, מנערים את הצלחת, צופים במשך 5 דקות, מוסיפים לטיפות תמיסת נתרן כלוריד איזוטונית עם צבירה, ולאחר מכן התוצאה מוערכת.

טבלה 6-3. הערכת תוצאות קביעת קבוצת הדם בשיטת הצלבה

פרשנות של תוצאות

העריכו את הנתונים שהתקבלו משתי התגובות (עם סרה סטנדרטית של isohemagglutinating ואריתרוציטים סטנדרטיים - טבלה 6-3).

המוזרות של הפרשנות של תוצאות התגובה עם אריתרוציטים סטנדרטיים - אריתרוציטים מקבוצה 0 (I) נחשבים לבקרה (הם אינם מכילים אנטיגנים, מה שהופך תגובת צבירה ספציפית עם כל סרום בלתי אפשרית ביסודה).

התוצאה של שיטת הצלב נחשבת לאמינה רק אם, כאשר מעריכים את תוצאות התגובה עם סרה סטנדרטית של isohemagglutinating ועם אריתרוציטים סטנדרטיים, התשובות לגבי קבוצת הדם הנחקר חופפות. אם זה לא קורה, יש לבצע את שתי התגובות מחדש.

קביעת קבוצות דם עם נוגדנים חד שבטיים

ציוד נדרש

כדי לקבוע את סוג הדם, משתמשים בנוגדנים חד שבטיים, שייצורם משמשת ביוטכנולוגיה היברידית.

היברידומה היא היברידית תא הנוצרת על ידי איחוי של תא גידול במח עצם (מיאלומה) עם לימפוציט חיסוני המסנתז נוגדנים חד שבטיים ספציפיים. ההיברידומה רוכשת את התכונות של שני ה"הורים": יכולת גדילה בלתי מוגבלת, האופיינית לתא גידול, ויכולת סינתזה של נוגדנים, הטבועה בלימפוציט חיסוני.

טבלה 6-4. תכנית להערכת התוצאות של קביעת קבוצות דם באמצעות נוגדנים חד שבטיים (סוליקלונים אנטי-A ואנטי-B)

פותחו ריאגנטים סטנדרטיים - נוגדנים חד שבטיים: אנטי-A ואנטי-B קוליקונים המשמשים לקביעת אגלוטינוגנים של אריתרוציטים.

Tsoliklons משמשים בצורה של אבקה ליופיליזית בצבע אדום (אנטי-A) או כחול (אנטי-B), האבקה מדוללת בתמיסת נתרן כלוריד איזוטונית מיד לפני המחקר.

טכניקת תגובה

Zoliclones anti-A ו-anti-B מורחים על טבליה לבנה טיפה אחת גדולה (0.1 מ"ל) תחת הכתובות המתאימות: anti-A ו-anti-B. לידם מורחים טיפה אחת קטנה (0.01 מ"ל) מהדם הנבדק. לאחר ערבוב הרכיבים, תגובת הצבירה נצפית במשך 2-3 דקות.

פרשנות של תוצאות

הערכת התוצאות פשוטה מאוד (טבלה 6-4).

שיטת קביעת קבוצת הדם באמצעות tsoliklon מאפשרת לך לנטוש את הסרה הסטנדרטית האיזומאגלוטינרית המתקבלת מדם התורם.