Определяне на кръвна група със стандартни серуми - подробна информация. Определяне на кръвна група чрез стандартни серуми Определяне на кръвна група по метода на серуми

Процедурата за определяне на кръвни групи по системата ABO се състои в откриването на антигени А и В в еритроцитите с помощта на стандартни антитела и използването на аглутинини в плазмата или серума на анализираната кръв със стандартни еритроцити. Техниката е разработена в началото на 20-ти век и все още се използва активно в медицината. Определянето на антигени А и В се извършва благодарение на анти-А и анти-В коликлони.

Основни понятия

При донорите винаги се определят не само антигени в еритроцитите, но и аглутинини в серума (плазма), като се използват стандартни еритроцити. Като биоматериал се използва венозна кръв. Преди изследването трябва да се откажете от мазни храни един ден преди анализа и да не пушите половин час преди изследването. Кръвните групи се определят два пъти: първо в медицинския отдел, където се събира материалът, и след това се потвърждават чрез изследване в лабораторията.

Определянето на кръвни групи по системата ABO е основният тест, използван в трансфузиологията. Също така някои животни имат подобна система от кръвни групи, като шимпанзета, горили и бонобо.

История на откритията

В науката има общоприето мнение, че методът за определяне на кръвните групи по системата ABO е идентифициран за първи път от австрийския учен Карл Ландщайнер през 1900 г. Тогава той описва в работата си три вида антигени. За това тридесет години по-късно той получава Нобелова награда за медицина и физиология. Поради факта, че преди това не е имало тесни връзки между учените, по-късно се установява, че чешкият серолог Ян Янски, независимо от изследванията на К. Ландщайнер, за първи път описва четири човешки кръвни групи, но неговите изследвания не са били известни на широка публика публика. Понастоящем в Русия и републиките на бившия СССР се използва класификацията, разработена от Я. Янски. В САЩ W. L. Moss създава своя собствена подобна работа през 1910 г.

Метод за определяне на кръвни групи по системата ABO с помощта на коликлони

Кръвната група трябва да се определя в стая с добро осветление, като се спазва температурният диапазон от 15 до 25 градуса по Целзий, тъй като отклоненията от тази норма могат да повлияят на резултатите от изследването. Инициалите и фамилията на пациента се изписват върху табелата или табелата. Отляво надясно или в кръг се прилагат стандартни обозначения на групи (O (I), A (II), B (III)). Под тях капка по капка се поставя съответният серум с отделни пипети за всеки вид. След това към тях се добавя кръвта на пациента. Материалът за изследване се взема от ушната мида или пръста. Това се изисква от техниката за определяне на кръвната група според системата ABO.

Също така е законно да се използват еритроцити, които са в епруветката след образуването на съсирек. Необходимо е количеството серум да бъде десет пъти повече от количеството добавена кръв. След това капките се смесват със стъклени пръчици (поотделно за всяка). В рамките на пет минути, внимателно разклащайки плочата, следете за появата на реакция на хемаглутинация. Открива се във факта, че се появяват малки червени бучки, които след това се сливат в по-големи. Серумът по това време почти напълно губи цвета си.

За да се елиминира фалшивата хемаглутинация чрез проста аглутинация на еритроцитите, след три минути добавете една капка физиологичен разтвор и проверете дали аглутинацията продължава. Ако да, значи е вярно. Всичко, определянето на кръвните групи по системата ABO е завършено.

Тълкуване на резултатите

В резултат на това могат да се наблюдават четири реакции:

аглутинация не настъпва с нито един от серумите - първата група O (I);
реакцията се проявява със sera I(ab) и III(a) - втора група A(II);
аглутинация настъпва със серуми I(ab) и II(b) - трета група B(III);
ако реакцията протича с три серума, е необходимо да се извърши допълнителна процедура с реактиви от група AB(IV), които са стандартни; ако в такава капка няма аглутинация, можем да приемем, че това е 4-та кръвна група АВ (IV).

Експресен метод за Rh фактор

Методът за определяне на кръвните групи според системата ABO включва едновременно откриване на Rh фактор (Rh).

Повърхността на плочата е предварително навлажнена и върху нея се изписват „контролен серум“ и „антирезус серум“. След това под надписите се поставят една или две капки от необходимите реактиви и към тях се добавя анализираният материал. За целта можете да използвате и кръв от пръст (в същото количество като обема на серума) или еритроцити, останали на дъното на епруветката след появата на съсирек (половината от обема на серума). Изборът на материал не влияе на крайния резултат. След това кръвта и серумът се смесват със суха стъклена пръчка, след което реакцията се очаква да настъпи в продължение на пет минути. За да се елиминират грешните показания, след три до четири минути се добавя изотоничен разтвор на натриев хлорид (само няколко капки). Определянето на кръвната група според системата ABO и Rh се извършва много често.

Ако се появи аглутинация на червени кръвни клетки в капка серум, това показва положителен резус на кръвта. Според статистиката Rh + се среща при 85% от населението на света. Липсата му ни позволява да говорим за Rh-отрицателна принадлежност. Ако се появи аглутинация в контролния серум, значи той е станал неизползваем. За съжаление, алгоритъмът за определяне на кръвната група по системата ABO не винаги работи перфектно.

Какви грешки могат да бъдат направени с тази техника?

Неточностите при определяне на принадлежността на кръвта към определена група зависят от следните причини:

Технически.
Биологични особености на изследваната кръв.
Дефектен характер на стандартни серуми и еритроцити.

Технически грешки

Възможни грешки при определяне на кръвната група на системата ABO по кръстосан начин:

Грешки на биологичната специфичност

Грешките, свързани с биологичните особености на анализираната кръв, се разделят на два вида.

В зависимост от характеристиките на еритроцитите.
Грешки, дължащи се на биологичните характеристики на серума.

Нека разгледаме всеки тип по-подробно.

В зависимост от характеристиките на червените кръвни клетки

Късна аглутинация поради "слаби" форми на еритроцити и антигени. За да се избегнат грешки, е необходимо да се определи кръвната група на донорите и реципиентите с помощта на стандартни еритроцити. Аглутиноген А 2 трябва да се идентифицира чрез многократно изследване с други видове реагенти и други стъклени съдове, като се удължи времето за регистриране на реакцията.
"Панаглутинация" ("автоаглутинация") - способността на кръвта да показва една и съща реакция от неспецифичен характер с всички серуми, включително собствения. След пет минути тежестта на такава аглутинация отслабва, въпреки че трябва да се увеличи. Подобни случаи се наблюдават при пациенти с рак, изгаряния и др. Като контрола е необходимо да се оцени проявата на аглутинация на анализираните еритроцити в стандартния серум от четвърта група и физиологичен разтвор. При "панаглутинация" кръвната група се определя в резултат на трикратно измиване на еритроцитите. Ако не даде желания резултат, струва си да вземете отново кръвна проба в епруветка, затоплена преди процедурата, и да поставите пробата в термоконтейнер, за да поддържате температура от 37 градуса по Целзий и повече. След това трябва да се достави в лабораторията, където се поддържа горепосочената температура и се използват загрят физиологичен разтвор, плака и реактиви.

Понякога еритроцитите на анализираната кръв са подредени като "монетни колони" и могат да бъдат сбъркани с аглутинати. Чрез добавяне на две капки изотоничен физиологичен разтвор и леко разклащане на плаката, червените кръвни клетки са в правилната позиция.
Непълна или смесена аглутинация, възникваща при пациенти от втора, трета и четвърта група в резултат на трансплантация на костен мозък или през първите три месеца след кръвопреливане 0 (I).

Биологично определен серум

Грешки, свързани с използването на дефектни стандартни еритроцити и серуми

Слаби серуми с изтекъл срок на годност или с титър по-малък от 1:32 са способни да генерират слаба и късна аглутинация. Използването на такива реактиви е неприемливо.

Използването на неподходящи стандартни еритроцити или серуми, приготвени при нестерилни условия и недостатъчно консервирани, води до появата на "бактериална" аглутинация, която е с неспецифичен характер.

Има много популярни предположения за кръвните групи на системата АВО, които се появяват веднага след откриването й в различни култури по света. Така например през 30-те години на миналия век в Япония и някои други страни теорията, свързваща кръвната група с един или друг тип личност, придоби популярност. Подобни теории са популярни днес.

Има също мнение, че човек с група А е склонен към тежък махмурлук, О се свързва с добри зъби, а група А2 е свързана с най-високо ниво на IQ. Но подобни твърдения не са научно доказани.

Разгледахме определянето на кръвните групи според системата ABO, използвайки стандартни серуми.

Кръвните групи са нормални наследствени различни имунологични признаци на кръвта. Въз основа на тези характеристики всички хора се разделят на четири групи, независимо от раса, възраст и пол. Кръвната група на човек остава постоянна през целия му живот. Хората от една кръвна група се различават от хората от други кръвни групи по наличието или отсъствието на аглутиногени (А и В), съдържащи се в еритроцитите, и α и β аглутинини, съдържащи се в серума.

Кръвни групи на системата AB0: 0 (I) кръвна група съдържа аглутинини α и β, в нея липсват аглутиногени; А (II) кръвна група - аглутинин α и аглутиноген А; B(III) кръвна група-аглутинин и аглутиноген B; AB(IV) кръвна група - съдържа аглутиногени А и В, аглутинини липсват.

Реципиент е човекът, на когото се прелива кръв, донор е този, който дава кръвта си за преливане. Идеално съвместима за реципиента е кръвта от същата група. Кръвта е абсолютно несъвместима, ако реципиентът има аглутинини към еритроцитите на донора, тъй като в тези случаи аглутиноген А от едната кръв се комбинира с аглутинин А от другата или аглутиноген В с аглутинин β. Развива се така нареченото, т.е. слепване на еритроцитите в малки и големи бучки. Преливането на несъвместима кръв води до сериозни последствия и може да бъде причина за смърт. На реципиент от група 0(I) не може да се прелива кръв от друга група, с изключение на същата. Реципиентът от група AB(IV) няма аглутинини, така че може да му се прелее кръв от всички групи. Получателят от група АВ(IV) е универсален получател. Кръв от група 0(I) може да се прелива на хора от всяка кръвна група. Затова хората с 0(I) група се наричат универсални донори.

В допълнение към аглутиногените А и В понякога в еритроцитите се срещат и други аглутиногени (например и др.). В случаите, когато кръвта е несъвместима с Rh фактор (виж), също е невъзможно да се прелее, за да се избегнат сериозни усложнения, свързани с разрушаването на червените кръвни клетки (хемолиза).

Преди всяко кръвопреливане, извършено по предписание и под наблюдението на лекар, е задължително да се определи кръвната група и да се установи нейната съвместимост.

Ориз. 1-4. Определяне на кръвни групи със стандартни серуми (А, В, 0).
Ориз. 1. Изследвана кръв от група 0(I).
Ориз. 2. Изследвана кръв от група А (II).
Ориз. 3. Изследвана кръв от група В (III).
Ориз. 4. Изследвана кръв от група АВ (IV).

Метод за определяне на кръвни групи. За да определите кръвната група, пригответе чиста чиния, стъклен молив, стандартни серуми от 0 (I), A (II) и B (III) кръвни групи, флакони с изотоничен разтвор на натриев хлорид, алкохол и йод, абсорбиращ памук, стъкло предметно стъкло или стъклени пръчици и три пипети, които трябва да са сухи (водата разрушава).

Плочата е разделена с молив на три сектора, които означават 0 (I), A (I), B (III). Една голяма капка стандартен серум от 0 (I), A (II), B (III) кръвни групи се нанася в съответния сектор с различни пипети. След като капка серум се освободи от пипетата, тя веднага се спуска във флакона, от който е взета. Преди вземане на кръв пръстът се избърсва със спирт. След инжектиране в пулпата на пръста, капка кръв се изстисква с игла. Със стъклена пръчица или ъгъла на чисто предметно стъкло три капки кръв (всяка с размер на глава на карфица) се прехвърлят в чиния до серумите от 0 (I), A (II) и B (III) кръв групи. След като отбележите часа на часовника, всеки път с нови стъклени пръчици смесвайте кръвта последователно със серуми от кръвни групи 0 (I), A (II) и B (III), докато сместа стане равномерно розова. Определянето на кръвната група се извършва в рамките на 5 минути. (следвайте часовника). След това време към всяка капка от сместа се добавя една капка изотоничен разтвор на натриев хлорид. След това плочата с кръв се разклаща леко, накланя се в различни посоки, така че сместа да се смеси добре с изотоничен разтвор на натриев хлорид, но да не се разпространява върху стъклото. При положителна реакция в първите минути от началото на смесването, дори преди добавянето на изотоничен разтвор, в сместа се появяват малки червени зрънца, състоящи се от слепнали червени кръвни клетки. Малките зърна се сливат в по-големи, а понякога и в люспи с различни размери (явлението аглутинация). При отрицателна реакция сместа остава равномерно оцветена в розово. При провеждане на тест с трите изброени по-горе серума за всяка кръвна група може да се окаже определена комбинация от положителни и отрицателни реакции (фиг. 1-4). Ако и трите серума са дали отрицателна реакция, т.е. всички смеси са останали равномерно оцветени в розово, тестваната кръв принадлежи към група 0 (I). Ако само серумът А (I) на кръвната група даде отрицателна реакция, а серумите на кръвните групи 0 (I) и B (III) дадоха положителна реакция, т.е. в тях се появиха зърна, тогава тестваната кръв принадлежи към група А (II). Ако серумът B (III) на кръвна група даде отрицателна реакция, а серумите на 0 (I) и A (II) кръвни групи - положителни, тогава изследваната кръв принадлежи към B (III) група. Ако и трите серума дадоха положителни реакции, т.е. зърнистостта се появи навсякъде, тестваната кръв принадлежи към група AB (IV). Всички други комбинации показват грешка в дефиницията. Причини за грешки при определяне на кръвни групи и мерки за предотвратяването им. 1. Излишък на кръв, ако се вземе твърде голяма капка. Капка кръв трябва да е 10 пъти по-малка от капка серум. 2. Ако серумите са слаби или еритроцитите на субекта не се слепват добре, може да се види аглутинация (виж), тъй като реакцията започва късно или е лека. Необходимо е да се вземат надеждни серуми, чиято активност е проверена и срокът на годност не е изтекъл. 3. При ниски температури на околната среда може да възникне неспецифична студова аглутинация - панаглутинация. Добавянето на изотоничен натриев хлорид, последвано от разклащане на плаката, обикновено елиминира студената аглутинация. За да се избегне това, температурата на околния въздух не трябва да бъде по-ниска от 12 и не по-висока от 25 °. 4. При продължително наблюдение сместа започва да изсъхва от периферията, където понякога се появява зърнистост. При липса на зърнистост в течната част на сместа може да се говори за отрицателна реакция на аглутинация.

След като определи кръвната група, лекарят трябва незабавно да направи запис на предния лист. След приключване на работата, плаката, пипетите и предметните стъкла трябва да се измият добре под чешма с топла вода, да се избършат и да се поставят в шкаф. в ампули или флакони се съхраняват в сухо и топло помещение в заключен шкаф при t ° не по-висока от 20 °.

Определянето на кръвната група чрез стандартни еритроцити (така наречената двойна реакция) се използва само в лаборатории и на станции. В ежедневната си работа те използват реакцията на аглутинация със стандартни серуми по описания по-горе метод.

Материалите се публикуват за преглед и не са рецепта за лечение! Препоръчваме ви да се свържете с хематолог във вашето лечебно заведение!

Кръвната група и Rh факторът са специални протеини, които определят индивидуалния му характер, точно както цвета на очите или косата на човек. Групата и Rh са от голямо значение в медицината при лечението на кръвозагуба, заболявания на кръвта, а също така влияят върху формирането на тялото, функционирането на органите и дори психологическите характеристики на човек.

Концепцията за кръвна група

Дори древните лекари се опитаха да компенсират загубата на кръв чрез преливане на кръв от човек на човек и дори от животни. По правило всички тези опити имаха тъжен резултат. И едва в началото на 20-ти век австрийският учен Карл Ландщайнер открива разликите в кръвните групи при хората, които са специални протеини в еритроцитите - аглутиногени, тоест предизвикващи реакция на аглутинация - залепване на еритроцити. Тя е причината за смъртта на пациенти след кръвопреливане.

Има 2 основни вида аглутиногени, които са условно наречени А и Б. Слепването на еритроцитите, тоест кръвната несъвместимост, възниква, ако аглутиногенът се комбинира с едноименния протеин - аглутинин, съдържащ се съответно в кръвната плазма, и б. Това означава, че в човешката кръв не може да има протеини със същото име, които причиняват аглутинация на еритроцитите, т.е. ако има аглутиноген А, тогава той не може да съдържа аглутинин а.

Установено е също, че и двата аглутиногена, А и В, могат да присъстват в кръвта, но тогава тя не съдържа никакъв вид аглутинини и обратното. Всичко това са признаците, по които се определя кръвната група. Следователно, когато едноименните протеини в еритроцитите и плазмата се комбинират, възниква конфликт за кръвната група.

Видове кръвни групи

Въз основа на това откритие са идентифицирани 4 основни типа кръвни групи при хората:

Първата, която не съдържа аглутиногени, но съдържа както аглутинини а, така и b, е най-често срещаната кръвна група, която се притежава от 45% от населението на света;
2-ро, съдържащо аглутиноген А и аглутинин b, се определя при 35% от хората;
3-то, в което има аглутиноген В и аглутинин а, 13% от хората го имат;
4-та, съдържаща както аглутиногени А, така и В, и несъдържаща аглутинини, тази кръвна група е най-рядката, определя се само при 7% от населението.

В Русия е прието определянето на кръвната група според системата AB0, т.е. според съдържанието на аглутиногени в нея. Съответно таблицата на кръвните групи изглежда така:

Кръвната група се предава по наследство. Може ли кръвната група да се промени - отговорът на този въпрос е недвусмислен: не може. Въпреки че историята на медицината познава единствения случай, свързан с генни мутации. Генът, който определя кръвната група, се намира в 9-та двойка на човешкия хромозомен набор.

важно! Преценката за това коя кръвна група е подходяща за всеки днес е загубила своята релевантност, както и концепцията за универсален донор, тоест собственик на 1-ва (нулева) кръвна група. Открити са много подвидове кръвни групи и се прелива само кръв от една група.

Rh фактор: отрицателен и положителен

Въпреки откритието на Ландщайнер за кръвните групи, трансфузионните реакции все още продължават да се появяват по време на кръвопреливане. Ученият продължава изследванията си и заедно с колегите си Винер и Ливайн успява да открие още един специфичен еритроцитен антигенен протеин - Rh фактор. За първи път е идентифициран при маймуната резус, откъдето е получил името си. Оказа се, че Rh присъства и в кръвта на повечето хора: 85% от населението има този антиген, а 15% го няма, тоест имат отрицателен Rh фактор.

Особеността на Rh антигена е, че когато попадне в кръвния поток на хора, които го нямат, той допринася за производството на анти-Rh антитела. При многократен контакт с Rh фактора, тези антитела дават тежка хемолитична реакция, която се нарича Rh конфликт.

важно! Когато Rh факторът е отрицателен, това означава не само липса на Rh антиген в червените кръвни клетки. В кръвта могат да присъстват анти-резус антитела, които могат да се образуват при контакт с Rh-положителна кръв. Следователно анализът за наличие на Rh антитела е задължителен.

Определяне на кръвна група и Rh фактор

Кръвната група и Rh факторът подлежат на задължително определяне в следните случаи:

за кръвопреливане;
за трансплантация на костен мозък;
преди всяка операция;
по време на бременност;
с кръвни заболявания;
при новородени с хемолитична жълтеница (резус несъвместимост с майката).

Въпреки това, в идеалния случай всеки човек, както възрастен, така и дете, трябва да има информация за груповата и Rh принадлежност. Никога не може да се изключи, че има тежко нараняване или остро заболяване, при което може спешно да е необходима кръв.

Определяне на кръвна група

Определянето на кръвната група се извършва със специално получени моноклонални антитела по системата АВ0, т.е. серумни аглутинини, които дават аглутинация на еритроцитите при контакт с едноименните аглутиногени.

Алгоритъмът за определяне на кръвната група е както следва:

Пригответе коликлони (моноклонални антитела) анти-А - розови ампули и анти-В - сини ампули. Пригответе 2 чисти пипети, стъклени пръчици за смесване и предметни стъкла, спринцовка за еднократна употреба от 5 ml за вземане на кръв, епруветка.
Вземете кръв от вена.
Голяма капка коликлони (0,1 ml) се нанася върху предметно стъкло или специална маркирана плака, малки капки от тестовата кръв (0,01 ml) се смесват с отделни стъклени пръчици.
Наблюдавайте резултата 3-5 минути. Капка смесена кръв може да бъде хомогенна - реакция минус (-), или да изпаднат люспи - реакция плюс или аглутинация (+). Оценката на резултатите трябва да се извърши от лекар. Възможностите за изследване за определяне на кръвната група са представени в таблицата:

Определение на Rh фактора

Определянето на Rh фактора се извършва подобно на определянето на кръвната група, т.е. с помощта на серумно моноклонално антитяло към Rh антигена. Голяма капка от реагента (золиклон) и малка капка прясно взета кръв се нанасят върху специална чиста бяла керамична повърхност в същите пропорции (10:1). Кръвта се смесва внимателно със стъклена пръчка с реактива.

Определянето на Rh фактора с коликлони отнема по-малко време, тъй като реакцията настъпва в рамките на 10-15 секунди. Въпреки това е необходимо да издържите максималното време от 3 минути. Точно както при определянето на кръвната група, епруветка с кръв се изпраща в лабораторията.

В медицинската практика днес широко се използва удобен и бърз експресен метод за определяне на груповата принадлежност и Rh фактора, като се използват сухи соликлони, които се разреждат със стерилна вода за инжектиране непосредствено преди изследването. Методът се нарича "Erythrotest-Groupcard", много е удобен както в клиники, така и в екстремни и полеви условия.

Природата и здравето на човек по кръвна група

Човешката кръв като нейна специфична генетична черта все още не е напълно проучена. През последните години учените откриха варианти на кръвни подгрупи, разработват се нови технологии за определяне на съвместимостта и т.н.

На кръвта се приписва и способността да влияе върху здравето и характера на притежателя си. И въпреки че този въпрос остава спорен, интересни факти са забелязани от многогодишни наблюдения. Например японски изследователи смятат, че е възможно да се определи характерът на човек по кръвна група:

собствениците на 1-ва кръвна група са силни, силни, общителни и емоционални хора;
собствениците на 2-ра група се отличават с търпение, скрупульозност, постоянство, усърдие;
представители на 3-та група са творчески личности, но в същото време са твърде впечатляващи, властни и капризни;
хората с 4-та кръвна група живеят повече с чувства, нерешителни са, понякога неразумно сурови.

Що се отнася до здравето, в зависимост от кръвната група се смята, че то е най-силно в по-голямата част от населението, тоест в 1-ва група. Хората от 2-ра група са предразположени към сърдечни и ракови заболявания, собствениците на 3-та група се характеризират със слаб имунитет, ниска устойчивост на инфекции и стрес, а представителите на 4-та група са предразположени към сърдечно-съдови патологии, ставни заболявания, рак.

Тази статия ще се съсредоточи върху методите за определяне на кръвната група според системата AB0, както и върху експресния метод за определяне на Rh фактора.

Първо, нека да поговорим за целите на определянето на кръвната група, както и за историята на изследването на този въпрос. Интересът към кръвопреливането съществува от дълго време. Дори в древен Египет лекарите се опитвали да го излеят в ранени, болни, умиращи. За донори са използвани предимно млади животни. Смятало се, че те имат специална природна сила и освен това не са подвластни на пороци, като хората. Трансфузията от човек на човек най-често е неуспешна. Причините за това са открити много по-късно от австрийския лекар Карл Ландщайнер. Той установи, че човек има различни антигени и антитела, които образуват специална имунна система.

В момента са изолирани около петстотин различни антигени, но на практика кръвните групи се определят според системата AB0.

По тази система съдържа кръв:

аглутиногени А и В (антигени). Локализация - еритроцити;
аглутинини алфа и бета (антитела). Локализация - серум.

Местоположението им в кръвта:

Антиген А заедно с алфа антитела;
Антиген B заедно с бета антитела;
Само алфа и бета антитела.

В същото време едноименните антигени и антитела не могат да бъдат локализирани, тъй като срещата им води до бърза проява на т.нар. реакции на изохемаглутинация, които ще доведат до хемолиза (разрушаване) на червените кръвни клетки и други патологични реакции.

Техниката за определяне на кръвната група е да се приложат знания за тази функция.

Група 1: без аглутиногени, серумът съдържа аглутинини;
2-ра група: има А и бета;
3-та група: има B и алфа;
4-та група: има А, В, няма аглутинини.

Техника на дефиниране

Техника за определяне на кръвна група по системата АВ0 въз основа на визуално наблюдение на аглутинацията.

Изследването трябва да се направи, когато:

Задайте въпроса си на лекаря по клинична лабораторна диагностика

Анна Поняева. Завършила е Медицинска академия в Нижни Новгород (2007-2014) и ординатура по клинична лабораторна диагностика (2014-2016).

Методът се използва най-често в серологичните лаборатории. Същността на метода е да се определи наличието или отсъствието на групови антигени А и В в тестовата кръв с помощта на стандартни изохемаглутиниращи серуми, както и групови антитела α и β с помощта на стандартни еритроцити. Реакцията със стандартни серуми се провежда, както е описано по-горе.

Реакцията със стандартни еритроцити се провежда по следния начин.

Необходима екипировка

Оборудването за реакция със стандартни еритроцити е различно, тъй като изисква стандартни еритроцити от три кръвни групи: 0 (I), A (II), B (III). Стандартните еритроцити се приготвят от кръвта на донори с известна кръвна група и се съхраняват при 4-8°C. Срок на годност 2-3 дни.

Реакционна процедура

1. Кръвта за изследване се взема от вена в суха епруветка, центрофугира се или се оставя сама за 20-30 минути, за да се получи серум.

2. Върху маркираната пластинка с пипета се нанасят три големи капки (0,1 ml) от изследвания кръвен серум от епруветката, а до тях - една малка капка (0,01 ml) стандартни еритроцитни групи.

3. По-нататъшните мерки се извършват подобно на метода, като се използват стандартни изохемаглутиниращи серуми: съответните капки се смесват със стъклени пръчки, плаката се разклаща, наблюдава се в продължение на 5 минути, към капките се добавя изотоничен разтвор на натриев хлорид с аглутинация, след което резултатът се оценява.

Таблица 6-3. Оценка на резултатите от определяне на кръвната група по кръстосан метод

Тълкуване на резултатите

Оценете данните, получени от двете реакции (със стандартни изохемаглутиниращи серуми и стандартни еритроцити - Таблица 6-3).

Особеността на интерпретацията на резултатите от реакцията със стандартни еритроцити - еритроцитите от група 0 (I) се считат за контролни (те не съдържат антигени, което прави специфична реакция на аглутинация с всеки серум фундаментално невъзможна).

Резултатът от кръстосания метод се счита за надежден само ако при оценка на резултатите от реакцията със стандартни изохемаглутиниращи серуми и стандартни еритроцити отговорите за групата на изследваната кръв съвпадат. Ако това не се случи, и двете реакции трябва да се повторят.

Определяне на кръвни групи с моноклонални антитела

Необходима екипировка

За определяне на кръвната група се използват моноклонални антитела, за производството на които се използва хибридомна биотехнология.

Хибридомът е клетъчен хибрид, образуван от сливането на туморна клетка на костен мозък (миелома) с имунен лимфоцит, синтезиращ специфични моноклонални антитела. Хибридомът придобива свойствата и на двамата "родители": способността за неограничен растеж, която е характерна за туморната клетка, и способността да синтезира антитела, която е присъща на имунния лимфоцит.

Таблица 6-4. Схема за оценка на резултатите от определяне на кръвни групи с помощта на моноклонални антитела (анти-А и анти-В соликлони)

Разработени са стандартни реагенти - моноклонални антитела: анти-А и анти-В коликлони, използвани за определяне на еритроцитните аглутиногени.

Цоликлоните се използват под формата на лиофилизиран прах с червен (анти-А) или син (анти-В) цвят, прахът се разрежда с изотоничен разтвор на натриев хлорид непосредствено преди изследването.

Реакционна техника

Золиклони анти-А и анти-В се нанасят върху бяла таблетка една голяма капка (0,1 ml) под съответните надписи: анти-А и анти-В. До тях се нанася по една малка капка (0,01 ml) от изследваната кръв. След смесване на компонентите реакцията на аглутинация се наблюдава в продължение на 2-3 минути.

Тълкуване на резултатите

Оценката на резултатите е много проста (Таблица 6-4).

Методът за определяне на кръвната група с помощта на цоликлон ви позволява да се откажете от стандартните изохемаглутиниращи серуми, получени от донорска кръв.