לקיחת חומר ומחקר על טרפונמה חיוורת. אבחון מיקרוסקופי של עגבת. מורפולוגיה של Treponema pallidum

ספר הלימוד מורכב משבעה חלקים. חלק ראשון - "מיקרוביולוגיה כללית" - מכיל מידע על המורפולוגיה והפיזיולוגיה של חיידקים. חלק שני מוקדש לגנטיקה של חיידקים. החלק השלישי - "מיקרופלורה של הביוספרה" - מתייחס למיקרופלורה של הסביבה, תפקידה במחזור החומרים בטבע, כמו גם את המיקרופלורה האנושית ומשמעותה. חלק רביעי - "תורת ההדבקה" - מוקדש לתכונות הפתוגניות של מיקרואורגניזמים, תפקידם בתהליך הזיהומי, וכן מכיל מידע על אנטיביוטיקה ומנגנוני פעולתם. חלק חמישי - "תורת החסינות" - מכיל רעיונות מודרניים לגבי חסינות. החלק השישי - "וירוסים והמחלות שהם גורמים" - מספק מידע על התכונות הביולוגיות העיקריות של הנגיפים ועל המחלות שהם גורמים. חלק שביעי - "מיקרוביולוגיה רפואית פרטית" - מכיל מידע על המורפולוגיה, הפיזיולוגיה, התכונות הפתוגניות של פתוגנים של מחלות זיהומיות רבות, כמו גם שיטות מודרניות לאבחון שלהם, מניעה וטיפול ספציפיים.

ספר הלימוד מיועד לסטודנטים, סטודנטים לתארים מתקדמים ומורים של מוסדות חינוך גבוהים לרפואה, אוניברסיטאות, מיקרוביולוגים מכל המומחיות והעוסקים.

מהדורה 5, מתוקנת ומוגדלת

סֵפֶר:

<<< Назад
קדימה >>>

טרפונמה חיוורת - הגורם הסיבתי של עגבת

עגבת היא מחלת מין המועברת באופן מחזורי בבני אדם הנגרמת על ידי spirochete pallidum; שלב א' בא לידי ביטוי בצ'אנקר קשה (fr. צ'נקר- כיב), שלב II - פגיעה בדפנות כלי הדם ופריחות שונות, III - חניכיים באיברים שונים עם פגיעה במערכת העצבים. גומה (לט. . gummi- מסטיק) - הסתננות כרונית בצורת צומת, נוטה לריקבון וכיב. גומה עגבת ( syn.: גרנולומה עגבת, עגבת גומי, עגבת שלישונית) הוא מסטיק חצי כדורי ללא כאבים המהווה ביטוי של עגבת פעילה שלישונית. פתוגן - Treponema pallidum- התגלה בשנת 1905 על ידי פ' שאודין וא' הופמן.

T. pallidum- מיקרואורגניזם בצורת ספירלה, בגדלים 0.09 - 0.18? 6 - 20 מיקרומטר. מספר התלתלים של הספירלה הוא מ-8 עד 12, התלתלים אחידים, ממוקמים באותו מרחק זה מזה כ-1 מיקרומטר, הגובה יורד לקראת הקצוות. במיקרוסקופ אלקטרוני, זה נראה כמו נחש או תולעת אדמה. בשני הקצוות של הטרפונמה יש בלפרופלסטים עם דגלים מחוברים אליהם, שמספרם משתנה בין שניים לכמה, הם יוצרים חוט צירי מעוות סביב הגליל הפרוטופלסמי של הספירושטה. בתנאים לא נוחים, זה יכול ליצור ציסטות. בבעלי חיים, עשויה להופיע נדן דמוי קפסולה בעל טבע מוקופוליסכריד.

Treponema מכתים בצורה גרועה עם צבעי אנילין, וזו הסיבה שהגורם הסיבתי של עגבת נקרא spirochete חיוור. מפחית חנקתי כסף לכסף מתכתי, המופקד על פני החיידק והופך אותו לנראה ברקמות: כאשר צובעים לפי מורוזוב, הטרפונמות נראות חומות או כמעט שחורות. כשהם מוכתמים לפי רומנובסקי - גימסה, הם מקבלים צבע ורוד חיוור.

טרפונמה מתרבה בדרך כלל על ידי חלוקה רוחבית, בעוד התאים המחולקים יכולים להצמיד זה לזה למשך זמן מה. זמן החלוקה הוא כ-30 שעות.

טרפונמות חיות הן מאוד ניידות, הן מבצעות תנועות סביב ציר האורך שלהן, כמו גם תנועות כפיפה, דמויות גל ותזוזות.

נכון להיום, אין שיטה כזו שתוכל להשיג באופן עקבי תרבויות טרפונמה. Treponema pallidum, פתוגני לבני אדם, מעולם לא טופחה על חומרי הזנה מלאכותיים, בעוברי עוף או בתרביות תאים. אותם זנים של הזנים שלהם שגדלים בתנאים אנאירוביים הם כנראה ספרופיטטים, קרובים לגורם הסיבתי של עגבת. הפיזיולוגיה שלהם עדיין נחקרה מעט. Treponemas הם כימו-אורגנוטרופים, אין להם קטלאז ואוקסידאז, והם יכולים לתסוס פחמימות. הם גדלים על מדיה עשירה מאוד המכילה עד 11 חומצות אמינו, ויטמינים, מלחים ואלבומין בסרום. הדרך הטובה ביותר לגדל ספירוצ'טים פתוגניים היא להדביק ארנב באשך (אורכיטיס ניסיוני). הוצע שקיים T. pallidumמחזור החיים, כולל, בנוסף לצורת הספירלה, השלב הגרגירי והשלב של גופים כדוריים דמויי ציסטה. הצורות הגרגיריות של המיקרואורגניזמים הללו מסוגלות לעבור דרך מסנני חיידקים.

אנטיגנים של טרפונמה אינם מובנים היטב. הוכח כי טרפונמה מכילה קומפלקסים של חלבון, פוליסכריד ושומנים. ההרכב האנטיגני של טרפונמות תרבותיות ורקמות כל כך קרוב שניתן להשתמש באנטיגנים שהוכנו מטרפונמות תרבותיות עבור CSC באבחון של עגבת. בגוף האדם, טרפונמות מעוררות ייצור של נוגדנים הגורמים לקיבוע ומוות של טרפונמות ניידות חיות, קושרות משלים בנוכחות תרחיף T. pallidumאו ספירושטים קשורים, ומתגלים גם ב-RIF העקיף.

הגורם הסיבתי של עגבת אינו יוצר אקזוטוקסינים. טרפונמות חיוורות אינן יציבות יחסית להשפעות חיצוניות. הם מתים במהירות כשהם מתייבשים ובטמפרטורות גבוהות (ב-55 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות). בתמיסת 0.3 - 0.5% HCl, הם מאבדים באופן מיידי את הניידות שלהם; הם גם מאבדים אותו במהירות ומתים בנוכחות תכשירי ארסן, ביסמוט וכספית. בדם מלא או בסרום ב-4 מעלות צלזיוס, הם נשארים קיימא למשך 24 שעות, מה שיש לקחת בחשבון בעת ​​עירוי דם.

אֶפִּידֶמִיוֹלוֹגִיָה.עגבת היא מחלה טיפוסית המועברת במגע מיני. מקור הזיהום הוא אדם חולה, בדרך כלל מדבק במשך 3 עד 5 שנים; חולים עם צורות מאוחרות של עגבת אינם מדבקים. זיהום ברוב המוחלט של המקרים מתרחש באמצעות סוגים שונים של מגע מיני וביתי, לעיתים רחוקות מעבר שליה מאם חולה לילד (עגבת מולדת) או כזיהום תעסוקתי על ידי מגע עם צוות רפואי. בתנאים טבעיים, רק אדם סובל מעגבת, בניסוי ניתן להדביק קופים, אוגרים וארנבות. בקופים מתפתח צ'אנקר קשה באתר ההזרקה של טרפונם; בארנבות ואוגרים הזיהום הוא א-סימפטומטי.

פתוגנזה ומרפאה.תקופת הדגירה של עגבת נרכשת נעה בין 2 ל-10 שבועות, בדרך כלל בין 20 ל-28 ימים. שערי הכניסה של זיהום הם לרוב הקרום הרירי של איברי המין, לעתים רחוקות יותר - חלל הפה, כמו גם עור פגום. באתר ההחדרה, הפתוגן מתרבה, נוצרת סיפילומה ראשונית (צ'אנקר קשה) - שחיקה או כיב עם בסיס דחוס. יתר על כן, הפתוגן חודר למערכת הלימפה, לימפנגיטיס ולמפדניטיס אזורית מתפתחים. זוהי מרפאה טיפוסית של עגבת ראשונית, שנמשכת 1.5 - 2 חודשים. ואז הסימנים האלה נעלמים. התקופה המשנית של עגבת קשורה להכללה של התהליך, כאשר בלוטות לימפה רבות גדלות, ופריחה מופיעה על העור והריריות; ניתן להבחין בנזק לאיברים פנימיים ולמערכת העצבים. יש עגבת טרייה משנית ועגבת חוזרת משנית. עם כל הישנות שלאחר מכן, עוצמת הפריחה הופכת פחות בולטת, והתקופות בין ההתקפים גדלות. מרכיבי הפריחה מכילים מספר רב של טרפונמה חיה, בתקופה זו החולה מדבק ביותר. משך העגבת המשנית הוא עד 4 שנים או יותר. יתר על כן, המחלה נכנסת לתקופה אסימפטומטית ארוכה, שלאחריה, לאחר מספר שנים, מתפתחת עגבת שלישונית. במקביל, נצפים נגעים אורגניים גסים של איברים פנימיים, מערכת הלב וכלי הדם, מערכת העצבים המרכזית, עצמות, נוצרות גומאות, מלווים בפירוק רקמות ושינויים ניווניים. תכונה קלינית אופיינית של עגבת היא היעדר תלונות סובייקטיביות מהמטופל (כאב, גירוד, צריבה וכו').

חֲסִינוּת.נגד עגבת, לא מתעוררת חסינות טבעית ולא מלאכותית; יש רק חסינות זיהומית, ובזמן שהיא קיימת, אדם כמעט אינו רגיש לזיהום חדש. חסינות זיהומית מתפתחת 10-11 ימים לאחר הופעת צ'אנקר קשה (חסינות צ'אנקר), במהלך תקופה זו, הדבקה חוזרת לא נצפה, או שצ'נקר חדש שנוצר ממשיך בצורה הפסולה (זיהום-על). בעתיד, עם זיהום-על, אופי הנגעים שנוצרו מתאים לשלב המחלה בזמן ההדבקה מחדש. זיהום-על מוסבר על ידי היחלשות או "התמוטטות" זמנית של חסינות זיהומית. בין זיהום-על, יש צורך להבחין בזיהום מחדש, כלומר, זיהום חדש, מחדש של אדם שלקה בעבר עגבת (נרפא), ולכן איבד חסינות זיהומית. מתוארים מקרים של אפילו פי שלושה מהמחלה עם עגבת. תקופת הדגירה בחולים כאלה קצרה יותר, צ'אנרים כיבים מרובים עם לימפדניטיס מתפתחים לעתים קרובות יותר, תגובות סרולוגיות הופכות חיוביות מוקדם יותר. בתקופה המשנית, פפולות על העור נשחקות לעתים קרובות. זה מוסבר על ידי העובדה שעם עגבת מתפתחת תגובה מושהית של רגישות יתר, לאחר הטיפול, לימפוציטים רגישים נשארים בגוף במשך זמן רב. חסינות זיהומית אינה סטרילית במהותה והיא נובעת מגורמים הומוראליים: אימונוגלובולינים מדרגות G, A ו-M נמצאים בסרום החולה.

אבחון מעבדה.לאבחון של עגבת, גישה משולבת היא אופטימלית, הכוללת שימוש בו-זמני בכמה שיטות. הם מחולקים באופן מסורתי לאלו ישירים, המאפשרים להוכיח נוכחות של פתוגן בחומר הבדיקה (הדבקה של בעלי חיים, סוגים שונים של מיקרוסקופיה ושיטות גנטיות מולקולריות לגילוי DNA). T. pallidum- בדיקת PCR ו-DNA), ובדיקות עקיפות - סרולוגיות לאיתור נוגדנים. בתורם, בדיקות סרולוגיות מיוצגות על ידי non-treponemal ו-treponemal.

חומר הבדיקה לגילוי טרפונמה בשיטות ישירות הוא פריקה של צ'אנקר קשה או נקודתי שלו, נקודתיים של בלוטת הלימפה, גרידה של רוזולה, נוזל מוחי. הפתוגן מתגלה בצורה הטובה ביותר בחומר מקורי על ידי מיקרוסקופיה של שדה כהה (ראה איור 111.4) או ניגודיות פאזה, המאפשרת לצפות בסוגי תנועה שונים של פתוגן חי. אם כבר החל טיפול אנטיביוטי, לא ניתן לזהות את הפתוגן בחומר הפתולוגי. במידת הצורך, מתבצע RIF ישיר (או עקיף) או התכשיר מוכתם לפי רומנובסקי-גימסה. שיטות אלה משמשות רק לאבחון מוקדם של עגבת.

ניתן להשתמש בבדיקות סרולוגיות בשלבים שונים של המחלה, למעט עגבת ראשונית סרונגטטיבית. בדרך כלל משתמשים במכלול של תגובות סרולוגיות. ל לא טרפונמלבדיקות עם קביעה ויזואלית של התוצאות כוללות: תגובת קיבוע המשלים (תגובת ווסרמן \u003d RSKk \u003d RW) עם אנטיגן הקרדיוליפין של שריר הלב של השור (אנטיגן צולב), תגובת מיקרו-משקעים (MR, או RMP) - microreaction עם פלזמה וסרום מומת; RPR - בדיקת plasma reagin מהירה, ותגובות אחרות. מומחים מאמינים כי עדיף להשתמש בשתי בדיקות לסקר המונית: RPR ו-RPHA או ELISA, שכן RPR רגיש יותר בעגבת ראשונית, RPHA בשלבים מאוחרים יותר של המחלה ו-ELISA בכל השלבים. בדיקות לא-טרפונמל הניתנות לקריאה מיקרוסקופית כוללות את מבחן VDRL ואת מבחן USR. בדיקות לא טרפונמאליות משמשות כבדיקות סקר, שכן הן יכולות לתת תוצאות חיוביות שגויות. בְּ treponemalבדיקות משתמשות באנטיגנים ממקור טרפונמלי. הם משמשים לאישור תוצאות של בדיקות שאינן טרפונמליות (חיובי כוזב?) עם חשד קליני, אפידמיולוגי ואנמנסטי לעגבת, לאבחון של צורות סמויות ומאוחרות, לאבחון רטרוספקטיבי. בדיקות טרפונמל כוללות: RSKt (RSK עם אנטיגן טרפונמל), RIBT (או RIT) - התגובה של אימוביליזציה של טרפונמה חיוורת, RIF (אחת התגובות הטובות ביותר), RPHA, ELISA, immunoblotting.

מניעה וטיפול ספציפיים.לא פותחה טיפול מונע ספציפי. מניעה לא ספציפית כוללת הימנעות מקיום יחסי מין מזדמנים, גילוי מוקדם של חולים, במיוחד עם צורה סמויה של המחלה, וטיפול בזמן ויעיל. אנטיביוטיקה משמשת לטיפול בעגבת: פניצילין ונגזרותיו (צורות מסיסות במים ודורסיות), לפעמים אריתרומיצין. נעשה שימוש גם בתכשירי ביסמוט, ארסן וכספית.

<<< Назад
קדימה >>>

חיפוש אחר טרפונמות חיוורות מתבצע במרכיבים הפעילים של עגבת (שחיקה, כיבים, פפולות שחוקים, קונדילומות רחבות) או על ידי ניקור של בלוטות הלימפה.

ההתנסויות בצביעה של טרפונמה חיוורת איבדו את משמעותן המעשית בשל העובדה שטרפונמה חיוורת אינה תופסת היטב צבעי אנילין (מכאן שמו של הפתוגן - טרפונמה "חיוורת"). בנוסף, בעת צביעה, אובדת תכונה דיפרנציאלית חשובה מאוד של טרפונמות חיוורות, המאפשרת להפריד בינן לבין טרפונמות וולגריות - אלו סוגי תנועה (תרגום, סיבובי, גלי, מטוטלת, צורת V). חשובה גם אחידות גודל התלתל, מהירות התנועה וסוגי התנועות הנ"ל. לכן, כל המעבדות עורכות מחקרים על טרפונמה חיוורת במצב חי, באמצעות מיקרוסקופ אור קונבנציונלי עם מעבה שדה כהה. בהיעדר מעבה כזה, ההכהה מתבצעת עם עיגול נייר שחור (קוטר 1.5 ס"מ), אשר מוחדר לעדשה התחתונה של המעבה הלא מוברג, כך שנשארת שפה חופשית בין קצוות העדשה לנייר (פינוי). 1.5-2 מ"מ). לאחר מעבר מכשיר זה (מעבה), קרן האור לוקחת כיוון אלכסוני בזווית חדה במקום טיפת הסרום הנחקר, אינה נופלת לתוך העדשה, מה שמשיג מחקר בתחום חשוך.

המחקר מתבצע תחת מעבה שדה כהה (אובייקט x40, עינית x10-15). מורחים טיפת שמן וזלין או טיפת מים על פני הקבל. התכשיר מונח על גבי טבלת החפצים ונבדק. על רקע כהה, ניתן לראות מספר רב של אלמנטים תאיים שונים, וביניהם - טרפונמה חיוורת, הנראית כמו חוטי חולץ פקקים בהירים. הוא שונה מטרפונמות אחרות בסוגי התנועה האופייניים לו, באחידות התלתל. שיטה זו פשוטה מאוד ואמינה. רק כשהם רואים את התכונות האופייניות

הַרצָאָהנ19. Spirochetes (treponema, borrelia, leptospira).

ספירוצ'טים הם חיידקים דקים, מפותלים ספירלית באורך של כמה עד כמה מאות מיקרומטרים, ניידים, גרם שליליים, כימו-אורגנוטרופים. ישנם שלושה סוגים עיקריים של תנועות - סיבוב מהיר סביב ציר האורך, כפיפה, חולץ פקקים (סליל). לנציגים של הזנים Treponema, Borrelia, Leptospira ו-Spirillum יש חשיבות רפואית.

סוּג טרפונמה .

הסוג מיוצג על ידי חיידקים מעוותים בצורת ספירלה באורך 5-20 מיקרומטר. המין המוכר ביותר הפתוגני לבני אדם הוא T. pallidum (treponema pallid), תת-המין T. pallidum pallidum הוא הגורם הסיבתי עַגֶבֶת.

טרפונמות פתוגניות מובדלות על ידי פתוגניות לסוגים שונים של חיות מעבדה, היכולת לתסיס מניטול, לנצל לקטט וליצור מטבוליטים ספציפיים.

"Lues Venerae" - "מגפת אהבה" - אחד השמות של עגבת (לוה).

מוֹרפוֹלוֹגִיָה.

לסוכן הסיבתי של עגבת יש צורה ספירלית עם תלתלים באותו גובה (יותר מ-10). אופי הניידות הוא תנועות סליל וכיפוף חלקות (Treponema - מלטינית - חוט כיפוף). לדברי רומנובסקי - Giemsa צבועים בצבע ורוד חיוור (pallidum - מ lat. - חיוור). מזוהה בקלות על ידי מיקרוסקופיה בשדה כהה ולאחר הספגה בכסף.

טרפונמה חיוורת מאוד קפדנית לתנאי טיפוח ואינה מסוגלת לגדול במשך זמן רב על חומרי תזונה. יש לו קצב רבייה איטי מאוד. בתנאי מעבדה, ניתן לטפח אותו על ארנבות, להדביק אותם תוך אשכים (אורכיטיס עם הצטברות של treponema). תכונות ביוכימיות נחקרות בצורה גרועה עקב בעיות טיפוח ואינן משמשות למעשה לאפיון T.pallidum.

מאפיינים אנטיגנים.

לטרפונמות יש אנטיגנים צולבים עם ספירוצ'טים אחרים (בורליה, לפטוספירה). בשל נוכחותם של פוספוליפידים (קרדיוליפין וכו') בדפנות התא של טרפונמות חיוורות, בדומה לתאי יונקים, בתגובה לאנטיגנים הללו, הגוף מייצר לא רק ספציפי לגורם הגורם לעגבת, אלא גם תגובתית ל קרדיוליפין ופוספוליפידים אחרים של רקמות אנושיות ומה שנקרא חיות וסרמןנוגדנים. הם מתגלים ב-CSC עם אנטיגן קרדיוליפין (מלבות בעלי חיים). נוגדנים ספציפיים לגורם הסיבתי של עגבת מתגלים ב-RNIF וב-immunoblot.

אנטיגן וסרמן הוא פוספוליפיד המהווה חלק מהקרומים המיטוכונדריים (קרדיוליפין). הוא מתקבל משריר הלב של בקר, רקמה עשירה במיטוכונדריה. בשל המשותף האנטיגני עם פוספוליפידים של רקמות, נוגדנים לקרדיוליפין טרפונם מגיבים עם קרדיוליפין רקמה (מיטוכונדריה). נוגדנים עצמיים אמיתיים נגד קרדיוליפין רקמות נוצרים בתסמונת "אנטימיטוכונדריאלי (אנטיפוספוליפיד), וגורמים לתגובות וסרמן חיוביות (חיוביות שגויות - ביחס לגורם הסיבתי של עגבת) בקולגנוזות (זאבת אריתמטית מערכתית, דלקת מפרקים שגרונית), צרעת ושאר חמורות אחרות. קשור לנזק לרקמות, עם אנמיה המוליטית, התמכרות לסמים.

תכונות פתוגניות.

התפתחות העגבת נקבעת על ידי שני מנגנונים עיקריים - נטייה להכללה (פולשנות גבוהה) והפעלה תקופתית של פתוגן הנמשך זמן רב בגוף ("יציאה ממארב").

עקב חוסר היציבות של הפתוגן בסביבה החיצונית, ההדבקה מתרחשת באמצעות מגע ישיר (ברוב המוחלט של המקרים, מינית). חודר דרך הממברנות הריריות והנגעים הקלים בעור, הפתוגן חודר במהירות לרקמות, מתפשט באופן לימפוגני ולאחר מכן המטוגני (הכללה).

הסימנים הראשונים של המחלה ( עגבת ראשונית)מתרחשת לאחר תקופת דגירה (בממוצע 3 עד 4 שבועות). באתר ההחדרה (פלישה ראשונית), הפתוגן מתרבה ומתרחש צ'נקר- גוש צפוף, לא כואב, אדמדם שהופך לכיב. במקביל, כתוצאה מחדירת טרפונמה לבלוטות הלימפה, היא מתפתחת לימפדניטיס אזוריועוד - polyadenitis.הכללה של הזיהום מתרחשת עוד לפני הופעת הצ'נקר והלימפדניטיס, כלומר. עגבת היא מחלה מערכתית מההתחלה.

לאחר שהמרפאה של עגבת ראשונית שוככת, לאחר זמן מה (ממספר שבועות עד מספר חודשים), מתרחשת הישנות של הזיהום הקשורה לשכפול איברים מרובים של טרפונמה ( עגבת משנית).ישנם נגעים של העור והריריות (עגבת משנית, המכילה מספר רב של טרפונמה), נגעים של איברים פנימיים, בלוטות לימפה, עצמות, מפרקים ועוד רבים אחרים. בהתחשב במגוון הנגעים, עגבת משנית מכונה "המתיחה הגדולה".

לאחר עגבת משנית, חלק מהחולים מפתחים שוב עגבת סמויה (הפתוגן יורד למחתרת במשך שנים), שבמחצית מהנשאים יכולה להפוך ל עגבת שלישונית. זה מאופיין על ידי היווצרות של מוקדים של דלקת גרנולומטית - מסטיקמכיל מעט טרפונמה (כמעט לא מדבק). ריקבון החניכיים מוביל להרס העצמות והרקמות הרכות ולפגיעה באיברים חיוניים. שלא כמו עגבת ראשונית ומשנית, עגבת שלישונית היא תהליך כרוני שלעולם אינו מסתיים מעצמו.

מעט ידוע על גורמי הפתוגניות של T. pallidum והמנגנונים המאפשרים לו לחמוק ממעקב אימונולוגי לאורך זמן. זה מעודד שפתוגן זה שומר על רגישות גבוהה לאנטיביוטיקה. עגבת מודרנית עדיין מגיבה היטב לטיפול אם התהליך אינו מגיע לנגעים אורגניים בלתי הפיכים.

אבחון מעבדה.

בעגבת ראשונית ומשנית ניתן לזהות את הפתוגן בנגעים במיקרוסקופיה. אופטימלי יותר לזיהוי טרפונמה חיוורת מיקרוסקופיה של שדה כהה ואימונולומינצנטי. בשיטה הראשונה, יש צורך להוציא ממצאים אפשריים (חוטי פיברין, למשל), נוכחות של treponemas saprophytic. ט. refringensמיישב את איברי המין החיצוניים, מאופיין בניידות גבוהה והיעדר תנועות כפיפה. ט. דנטיקולהמיישב את חלל הפה, תלתליו קצרים יותר ומכוונים לזווית חדה יותר. נמצא גם בחלל הפה האנושי ט. vincentii, אשר בשיתוף עם מיקרואורגניזמים אחרים יכול לגרום אנגינה נמקית כיבית.

בנוסף לגורם הסיבתי של עגבת, יש טרפונמות של תת-מינים אחרים של T. pallidum, הדומים מאוד מבחינה גנטית ואנטיגני, הגורמים לנגעים אנושיים במדינות עם אקלים חם ( פיהוק, ברגל, ליטר).

כאשר צובעים לפי Romanovsky - Giemsa, T.pallidum מוכתם בוורוד, טרפונמות לא פתוגניות כחולות או סגולות, T.refringens מוכתם באדום עם פוקסין. אבחון פלורסנט נמצא בשימוש נרחב לאיתור טרפונמה בחומרים קליניים שונים. בין השיטות לאיתור הפתוגן, ל-PCR יש את הרגישות הגבוהה ביותר וסגוליות מספקת.

שיטות אבחון בסיסיות - סרולוגי, כלומר איתור נוגדנים בסרום. יש למרוח RSK עם קרדיוליפין ואנטיגן טרפונמל, בדיקות פקקולציה (בדיקת מיקרו-אגלוטינציה לנוגדנים לקרדיוליפינים), RNGA. בדיקות ספציפיות ורגישות יותר הן בדיקות המבוססות על אימונופלואורסצנטי עקיף (RIF), ריאקציית אימוביליזציה של טרפונמה חיוורת, ELISA המבוססת על חלבוני טרפונמה רקומביננטיים.

ב-serodiagnosis של עגבת, יש צורך לקחת בחשבון את הסרונגטיביות של עגבת ראשונית בשבועות הראשונים של המחלה. יש צורך בשילוב של שיטות המבוססות על זיהוי נוגדנים כנגד קרדיוליפין ואנטיגנים טרפונמאליים. בדיקות קרדיוליפין הופכות במהירות לסרונגטיביות לאחר חיסול הפתוגן (לאחר מספר חודשים), נוגדנים אנטי-טרפונמאליים נמשכים זמן רב יותר. חיונית לקביעת פעילות התהליך היא ההגדרה antitreponemalIgM- נוגדנים(כאשר מתגלה עגבת מולדת, במיוחד מאחר ונוגדני IgM אינם חוצים את השליה מאם לעובר; בחקר נוזל מוחי - לאבחון נוירוסיפיליס וכו').

יַחַס.

לעתים קרובות יותר, פניצילינים מופקדים עם פעולה ממושכת משמשים, עם אי סבילות - מקרולידים, טטרציקלינים, צפלוספורינים.

אין מניעה ספציפית.

מורפולוגיה וסיווג.

ספירלה, בעלת עד 10 תלתלים גדולים בעלי צורה לא סדירה, חיידקים גרם שליליים בעלי אופי סיבובי-תרגום של תנועות. אנאירובים, לעתים קרובות דורשים מדיה תרבותית מורכבת.

Borrelia הפתוגני לבני אדם הם פתוגנים חום חוזר (חום חוזר) או בורליוזיס. ב. הישנות מועבר לבני אדם על ידי כינים, גורם למגיפה או חום חוזר ומחורבן. שאר הבורליוזיס האנושיים מחולקים לשתי קבוצות עצמאיות - ARGA Tick-borne Borreliosis (AKB), הנגרמת על ידי יותר מ-12 מינים של בורליוזיס, ו-ixodid tick-borne borreliosis (IBD), הנגרמת על ידי B.burgdorferi sensu stricto, B.garinii , B.afzelii ועוד כמה.

AKB קשורות לקרדית ארגאס מהסוג Ornithodorus, החיות באזורים טרופיים וסובטרופיים של אפריקה, אסיה ואמריקה, ומאופיינות בהתקפי חום חוזרים (כמו במלריה). ITB נגרמת על ידי קרציות מהסוג Ixodes (קבוצת I.ricinus / I.persulcatus), המופצת בעיקר באזור היער באירואסיה ובאמריקה.

נכסי תרבות.

נציגים של סוג זה מקפידים על תנאי הטיפוח, במיוחד Borrelia מקבוצת IKB. הם דורשים תנאים אנאירוביים פקולטטיביים, טמפרטורה פלוס 33 מעלות צלזיוס, מדיה מיוחדת (BSK-2) המכילה מדיום 199, גלוקוז, אלבומין, ציסטאין, סרום ארנב, ג'לטין ורכיבים נוספים.

תכונות אנטיגניות.

יש להם אנטיגנים צולבים עם ספירושטים אחרים, אנטיגנים ספציפיים למין ולמין. הקצאת אנטיגנים מסוג H- (מונפים) פלגלין (בעלי סגוליות נמוכה) ואנטיגנים חלבוניים על פני השטח (OspA, OspC, ספציפיים יותר, משמשים לזיהוי בין-ספציפי ותוך-ספציפי).

הפתוגנזה של נגעים.

לאחר מציצת הקרצייה, Borrelia עם רוק נכנסים למקרואורגניזם, מתרבים בשער הכניסה של הזיהום, ומשפיעים על העור (אריתמה) ועל בלוטות הלימפה הקרובות ביותר (שלב הסתגלות ראשונית). לאחר שהתגברה על מחסומי העור והלימפה, בורליה נכנסת לזרם הדם, וגורמת לספירוכטמיה, המתבטאת בתסמונת רעילה כללית (שלב הפצה ראשונית). ככל שהתהליך מתקדם, בורליה חודרת את מחסומי רקמות ההמטו (כולל דרך מחסום הדם-מוח) וגורמת פגיעה באיברים ובמערכות שונות. במקרים מסוימים הזיהום הופך לכרוני וגורם לפגיעה במערכות העצבים והלב וכלי הדם, מערכת השרירים והשלד, נגעי עור משניים וכו', ביטויים נוירולוגיים למשל).

אֶפִּידֶמִיוֹלוֹגִיָה.

ITB הוא זיהום מוקד טבעי מועבר חובה, המופץ בעיקר באזור האקלים הממוזג של חצי הכדור הצפוני, באזור נוף היער ומזוהה עם יניקה של קרציות מהסוג Ixodes. מוקדי ITB קשורים לעתים קרובות למוקדי דלקת המוח הנישאת קרציות, מכיוון שיש להם אותם וקטורים באירואסיה - קרציות I. reticulatus (קרצית טייגה) ו-I. ricinus (קרצית יער אירופאית).

אבחון מעבדה.

ניתן לבודד את בורליה באמצעות המדיום BSK2 בחולים ממוקדי נגעים בעור, מדם ונוזל מוחי (בצורות קרום המוח), במחקר של נשאים (כולל אלה שנלקחו מבני אדם) ומארחים בעלי דם חם (שיעור החיסון הגבוה ביותר הוא משלפוחית ​​השתן) במוקדים טבעיים.

ניתן לזהות את בורליה בקרציות ixodid באמצעות מיקרוסקופ אור (כתם רומנובסקי-גימסה), מיקרוסקופיה של שדה כהה ופלורסנט ו-PCR.

השיטה העיקרית לאבחון סרולוגי היא תגובה של אימונופלואורסצנטי עקיף (RNIF) עם האנטיגן הגופי של B.afzelii, המאפשר לזהות נוגדנים ל-Borrelia מקבוצת IKB.

יַחַס.

החל טיפול מונע (עם תוצאות חיוביות של מחקר הקרצייה המוצצת) וטיפול בחולים עם ITB עם טטרציקלינים, פניצילינים וצפלוספורינים. לא פותחו אמצעי מניעה ספציפיים.

סוּג לפטוספירה

מוֹרפוֹלוֹגִיָה.

תכונות תרבותיות וביוכימיות.

כימו-אורגנוטרופים, אירוביים. לפטוספירה הם הידרופילים אופייניים, הם נמשכים לאורך זמן במצעים לחים, מים ואדמה לחה. הטמפרטורה האופטימלית היא בין פלוס 28 ל-30 מעלות צלזיוס, pH 7.2 - 7.4. תורבת בעיקר על חומרי נוזלים בתוספת סרום דם ארנב (מדיום טרסקי).

תכונות אנטיגניות.

לפטוספירה פתוגנית על בסיס תכונות אנטיגניות מחולקות ל-serogroups ו-serovars.

מאפיינים אקולוגיים - אפידמיולוגיים.

המאגרים העיקריים של זיהום הם חיות בר, בעיקר מכרסמים ואוכלי חרקים (מוקדים טבעיים, הקשורים לעתים קרובות לבתי גידול קרובים למים), וכן חיות משק וחיות בית(חזירים, בקר, כלבים). בבעלי חיים, הלפטוספירה נמשכת בכליות לאורך זמן ומופרשת לסביבה החיצונית עם שתן לאורך זמן. אדם נדבק במוקדים טבעיים (לעתים קרובות יותר במהלך עבודה חקלאית) ובמוקדים ביתיים (לעתים קרובות יותר התפרצויות רחצה או מקרים מקצועיים של לפטוספירוזיס). חולדות וכלבים אפורים ממלאים תפקיד משמעותי בזיהום. ישנם קשרים בין הלפטוספירים הסרובריים מסוימים לבין מיני בעלי חיים מסוימים (לדוגמה, L.canicola - כלבים).

הפתוגנזה של נגעים.

לפטוספירה נכנסת לגוף דרך ממברנות ריריות או נזק (מיקרוטראומה) של העור. לפטוספירה פתוגנית, עקב ניידות פעילה, מתגברת על מחסומי הגנה, חודרת לדם (לפטוספירמיה) וחודרת לאיברים שונים, בעיקר לכליות ולכבד. יש חשיבות מיוחדת נגעים אנדותל נימייםעם שטפי דם בדרגות חומרה שונות עד לתסמונת דימומית, פגיעה בכבדעם התפתחות צהבת הקשורה לנזק להפטוציטים ולהמוליזה של תאי דם אדומים, נזק לכליות,בעיקר האפיתל של צינוריות הכליה, חומר קורטיקלי ותת-קורטיקלי עם התפתחות של אי ספיקת כליות (אנוריה, אורמיה), ביטויי קרום המוח.

אבחון מעבדה.

השיטה העיקרית לאבחון מיקרוסקופי היא מיקרוסקופיה בשדה כהה.

בידוד הפתוגן מתבצע על ידי יבולים על מדיום טרסקי, ביולוגי על אוגרים זהובים. בדוק שתן, דם, נוזל מוחי, שכבת קליפת המוח של הכליה.

השיטה העיקרית לאבחון סרולוגי היא תגובת האגלוטינציה-ליזה (RAL) עם קבוצה של תרביות לפטוספירה של קבוצות הסרוגרות העיקריות. השיטה היא ספציפית, אך גוזלת זמן, מכיוון שיש צורך לשמור על מערך אבחון של לפטוספירים, להצמיד את הסרום הנחקר עם לפטופפירים מכל הקבוצות העיקריות, ולאחר מכן לבצע מיקרוסקופיה בשדה כהה. עם תוצאה חיובית, leptospira נדבק בצורה של עכבישים או כדורים הוא ציין, ואחריו תמוגה. נכון לעכשיו, ELISA משמש גם עבור serodiagnosis.

יַחַס.

משתמשים באנטיביוטיקה (פניצילינים, טטרציקלינים).

כדי לאשר את האבחנה של "עגבת", יש צורך להתמקד לא רק בנתונים קליניים - תסמינים אובייקטיביים של המחלה - נוכחות של צ'אנקר אופייני בתקופה הראשונית, פריחות נקודתיות בפריחה משנית או גומי ושחפת בעגבת מאוחרת. . לשם כך, נעשה שימוש בשיטות לאבחון מעבדתי של עגבת, שהנפוץ שבהם הוא מיקרוסקופיה, בדיקה תרבותית של חומר מהמטופל, בדיקות סרולוגיות ובדיקה היסטולוגית של דגימות רקמה ביולוגית. מאמר זה ישקול את האבחנה המיקרוסקופית של עגבת.

מיקרואורגניזמים - ספירוצ'טים - בגופו של אדם חולה ממוקמים בחלל הבין-סטיציאלי, בין סיבי רקמת חיבור, מקיפים את תעלות הלימפה וכלי הדם. כדי לקבוע במדויק את נוכחותו של הגורם הסיבתי של עגבת, יש צורך לקחת את החומר למחקר משם. כמובן, הגיוני לקחת את החומר רק ממרכיבי הפריחה (במיוחד משחיקות וכיבים), מפני השטח של הצ'אנרים ומהריריות של איברי המין, חלל הפה והרקטום. בנוסף, ישנן שיטות חלופיות, למשל, ניקור של בלוטות הלימפה.

איך אוספים חומר למחקר?

על מנת שמריחה של עגבת תצליח, לפני נטילת חומר אבחנתי מפני השטח של כיב או שחיקה, יש להסיר את כל הזיהום העודף בעזרת ספוגית גזה ספוגה בתמיסת מלח. לאחר ייבוש פני היסוד, נוזל מתחיל לחלחל אל פני השטח שלו, המכיל כמות גדולה של הפתוגן. ניתן לזרז את התהליך על ידי לחיצה עדינה על האלמנט (כמובן עם כפפות גומי). לאחר מכן, באמצעות שקופית זכוכית, מייצרים מריחה לעגבת, אשר לאחר העיבוד עוברת מיקרוסקופ. כדי להשיג חומר מנגעים שאינם שוחקים, משתמשים בשיטה של ​​גירודם עם אזמל או סכין גילוח סטרילי.

מיקרוסקופ שדה אפל

מיקרוסקופ שדה כהה של טרפונמה היא אחת השיטות המבטיחות והזולות ביותר לאבחון עגבת. במקרה זה, התרופה אינה מיובשת, המחקר מתבצע בטיפה של תמיסת מלח איזוטונית רגילה. אלומה צרה של אור בהיר מופנית אל שקופית זכוכית (היא מתקבלת באמצעות מכשיר מיוחד - קבל). במקרה זה, האור נופל על התכשיר כמעט מהצד, בעוד ששדה כהה נראה בעדשה. עם זאת, הגופים המיקרוביאליים בתכשיר נשברים ומחזירים אור - כתוצאה מכך נוצר אפקט אופטי מעניין ביותר (המבוסס על תופעת Tyndall) - טרפונמות מתחילות להיראות כמו ספירלות ניידות זוהרות עם מספר תלתלים.

מחקר לפי שיטת רומנובסקי-גימסה

שיטה זו (בניגוד לכתם גראם) מאפשרת לך לקבל תמונה ברורה להבחנה של הגוף החיידקי במיקרוסקופיה - זוהי אחת השיטות האמינות ביותר לאבחון עגבת. המחקר מתבצע כדלקמן: המריחה המתקבלת עבור עגבת קבועה בריאגנט של Nikiforov (תערובת של חלקים שווים של אלכוהול אתילי ואתר), ואז נצבעת בפיגמנט רומנובסקי-גימסה למשך 2-5 שעות. לאחר צביעה של המריחה, מיובשים אותו בטמפרטורה של 25-28 מעלות ונבדקים במיקרוסקופ בתווך טבילה (שמן טבילה מיוחד שכמעט אינו שובר קרני אור). כתוצאה מהכתמה על פי רומנובסקי-גימסה, הגורם הסיבתי של עגבת מקבל גוון ורוד, בעוד שאר הספירוצ'טים מוכתמים בגוונים כחולים וסגולים.

השיטה של ​​מורוזוב (הספגת טרפונם בכסף)

אולי אחת השיטות המהירות ביותר לאבחון מיקרוסקופי של עגבת. לצורך יישומו, הוא דורש מספר ריאגנטים:

  • הראשון הוא חומצה אצטית (מצונן), פורמלין 40% ו-100 מ"ל מים סטריליים;
  • השני - טאנין, מאה מ"ל חומצה קרבולית ואותה כמות מים מזוקקים;
  • השלישי הוא מאה מ"ל של תמיסה של חנקתי כסף במים.

הספגה של טרפונמים בכסף (הכספה על פי מורוזוב) מתבצעת באופן הבא: המריחה מיובשת, ממלאת את המגיב הראשון למשך דקה אחת, ולאחר מכן שקופית הזכוכית נשטפת במים. ואז מגיע תורו של המגיב השני - הזכוכית מחוממת במשך דקה אחת בלהבה של מנורת אלכוהול (באופן מתון). לאחר הכביסה, הכוס מחוממת שוב עד שהמריחה משחימה. לאחר מכן שוב כביסה יסודית, ייבוש ובדיקה במדיום טבילה. טרפונמות חיוורות לאחר הכספה לפי מורוזוב נראות כמו גופים מיקרוביאליים חסרי תנועה שחורים או חום כהה. כל התכונות המורפולוגיות שלהם נשמרות במידה מספקת לזיהוי אמין.

בחולים עם חשד לעגבת, כל הפריחה, במיוחד השחיקה והכיבית על העור והריריות של חלל הפה, איברי המין ופי הטבעת, כפופות לבדיקה לאיתור טרפונמה חיוורת. אם המחקר של אלמנטים מתפרצים הוא בלתי אפשרי או קשה, אז הם פונים לנקב של בלוטות הלימפה.

טרפונמה חיוורת ממוקמת בנקיקי רקמה, בין סיבי רקמת חיבור, סביב כלי הלימפה וכלי הדם, בדפנות ואפילו לומן של נימים לימפתיים. החומר הדרוש לבדיקה בקטריולוגית לטרפונמה חיוורת הוא נוזל רקמות (סרום). ישנן מספר שיטות להשיג נוזל רקמה מהיסודות המתפרצים של עגבת.

לפני נטילת חומר לבדיקה, פני השטח של אלמנטים שוחקים או כיבים מנוקים בקפידה בעזרת צמר גפן או צמר גזה טבול בתמיסת נתרן כלוריד איזוטונית, ולאחר מכן מייבשים, תוך הימנעות מפציעה על מנת למנוע דימום.

לאחר זמן מה, נוזל רקמה שופע למדי מתחיל לבלוט על פני היסוד הנחקר. אם זה לא קורה, אז אתה יכול ללטף בזהירות את פני השחיקה או הכיב עם לולאה בקטריולוגית או מרית מתכת. ניתן להשיג נוזל רקמות למחקר גם ע"י סחיטת (עיסוי) אצבעות בכפפת גומי של שחיקה או כיבים חשודים, וכן ביצירת ואקום יחסי באמצעות צנצנת בירוב. בהיעדר שחיקה או כיב של פריחות, ניתן להשיג חומר למחקר על ידי צלקת פני השטח שלהם עם אזמל. אם בוצע טיפול מקומי או טרפונמה לא נמצאה, יש לרשום למטופל חבישות ייבוש רטוב מתמיסת נתרן כלוריד איזוטונית למשך מספר ימים ולאחר מכן לבדוק שוב.

הדקירה של בלוטת הלימפה מתבצעת במטופל במצב שכיבה בהתאם לכל כללי האספסיס. לניקוב משתמשים במחט חדה עם קצה קהה ומזרק עם בוכנה טחונה היטב. המחט והמזרק חייבים להיות יבשים. בלוטת הלימפה הנבדקת מקובעת באצבעות I ו-II של יד שמאל, וביד ימין, עם מזרק ומחט, מבצעים ניקור שכבה אחר שכבה של העור ובלוטת הלימפה. מבצעים ניקוב לאורך הציר הארוך של הקשר, המחט מקדימה עד לקצה הקשר, מעסה אותו קלות. ואז המחט נמשכת לאט לאחור, תוך מציצת בו-זמנית את התוכן של בלוטת הלימפה עם מזרק. עם מה שנקרא "ניקור העשרה", מומלץ להזריק 0.1-0.2 מ"ל מתמיסת נתרן כלוריד איזוטונית סטרילית לתוך השכבה הקורטיקלית של בלוטת הלימפה, לעסות את הצומת בתנועת בוכנת המזרק ולאחר מכן למצוץ החוצה את הצומת. תוכן. הנקודה של בלוטת הלימפה משמשת לחקר טרפונמה חיוורת על פי השיטה המקובלת, ולפני המחקר רצוי לא לערבב אותו על משטח זכוכית עם תמיסת נתרן כלוריד איזוטונית.

השיטה הטובה ביותר לאיתור treponema pallidum לאבחון עגבת היא בדיקה מיקרוסקופית של תכשירים מקומיים (טבעיים, רטובים) בשדה חשוך. מחקר בשדה חשוך מבוסס על תופעת Tyndall: אם אור השמש מועבר לחדר חשוך דרך חריץ צר, אז חלקיקי אבק קטנים מתחילים לזרוח בבהירות, בלתי נראים בתאורה רגילה. זאת בשל העובדה שחלקיקי אבק באוויר מחזירים את קרני השמש לכיוונים שונים וחלק מהקרניים הללו חודרות לעין שלנו. בבדיקה מיקרוסקופית בשדה חשוך נעשה שימוש במעבה מיוחד, המכוון את קרני האור מהמאיר בזווית קטנה מאוד למישור שלב המיקרוסקופ, וכתוצאה מכך האור אינו חודר לעינית המיקרוסקופ, וכן שדה הראייה חשוך. האובייקט הנחקר מחזיר אור ונראה בבירור על רקע כהה. מחקר בתחום האפל של מיקרוסקופ מאפשר לחקור טרפונמה חיוורת בצורה חיה, כמו גם להבדיל בינה לבין טרפונמות אחרות הן על ידי תכונות מורפולוגיות והן על ידי תכונות אופייניות של תנועה.

כדי להשיג שדה ראייה כהה בהיעדר מעבה מיוחד, אתה יכול להשתמש בשיטה של ​​MP Arkhangelsky. לשם כך, בין שתי העדשות של הקבל של Abbe, מניחים עיגול של נייר שחור עבה על העדשה התחתונה באופן שנשאר מרווח של 2-3 מ"מ לאורך קצה העדשה. על מנת למנוע מהעיגול לזוז, נותרו ארבע בליטות באורך כזה לאורך הקצה שלו בעת החיתוך כך שייצמדו למסגרת המתכת של העדשה.

הכנת התרופה למחקר בשדה ראייה חשוך היא כדלקמן. טיפה של אקסודאט סרוסי המתקבל מפני השטח של אלמנט הבדיקה ממוקמת במרכז שקף זכוכית דק, שהוסר קודם לכן עם תערובת של חלקים שווים של אלכוהול ואתר. למחקר בתחום האפל, שקופיות זכוכית לא צריכות להיות עבות יותר מ

1.1-1.2 מ"מ, ללא שריטות, נקי לחלוטין. הירידה עם חומר הבדיקה לא צריכה לחרוג מהכיסוי. ליד טיפה של exudate serous, טיפה שווה של תמיסת נתרן כלוריד איזוטונית מוחל; מערבבים במהירות את שתי הטיפות, מכסים אותן עם כיסוי.

במעבדות מסוימות, לעומת זאת, רק אקסודט סרוזי נבדק בהצלחה מיקרוסקופית ללא תוספת של מי מלח איזוטוני. טיפת שמן טבילה או מים מזוקקים נמרחת על העדשה העליונה של מעבה השדה הכהה, אליה נלחץ התכשיר המוכן. מיקרוסקופיה מתבצעת עם אובייקטיבי 40 ועינית 10 או 5.

מקור האור מוגדר כך שקרן האור נופלת על המראה של המיקרוסקופ.

לאחר הנחת התכשיר על במת המיקרוסקופ והתקנת מקור האור, מורידים בזהירות את צינור המיקרוסקופ עם המטרה בשליטה של ​​העין כמעט עד לכיסוי. לאחר מכן, על ידי סיבוב המראה, מושגת ההארה הבהירה ביותר של שדה הראייה ולאחריה, מבלי להסיר את העיניים מהעינית, מרומם בזהירות רבה את צינור המיקרוסקופ עד שמופיע שדה כהה ובו זוהרים חלקיקים מוצקים, שהם בתנועה בראונית. ביניהם, נויטרופילים בודדים, לימפוציטים, תאי אפיתל ניתן לזהות. אם התכשיר מזוהם מאוד באלמנטים אלו, עדיף להכין תכשיר חדש. טרפונמה חיוורת בשדה הראייה האפל מופיעה כספירלה עדינה או דקירה עדינה. הוא שובר קלות אור ויש לו גוון כסוף. חשוב להעריך את התנועות האופייניות לטרפונמה חיוורת. במיקרוסקופיה, אסור לערבב גדילי פיברין עם טרפונמה - ארוך

(עם תלתלים גדולים) תצורות שנותנות רושם של תנועה עקב זרימת הנוזל. לרוב הם דקים מאוד ולא אחידים בעובי.

יש להבדיל בין טרפונמה חיוורת לבין טרפונמות אחרות, הנמצאות בעיקר באיברי המין ובחלל הפה. באיברי המין יש לשקול T. refringens. הוא עבה הרבה יותר מטרפונמה חיוורת, שובר אור חזק יותר, אין לו תלתלים לא אחידים, מחוספסים, רחבים, משופעים יותר ופחות עמוקים. הקצוות שלו מחודדים, התנועות חדות, לא קבועות. יש להבחין בין T. balanitidis, בדומה ל-T. refringens, גם לבין טרפונמה חיוורת, השונה באורך ניכר, בעובי ובעל 6-10 סיבובים.

כאשר בוחנים חומר שנלקח מחלל הפה, יש צורך לקחת בחשבון את הנוכחות של הטרפונמות הבאות כאן:

1) T. microdentium (T. denticola) - הוא קצר יותר ובדרך כלל עבה יותר מטרפונמה חיוורת, תלתליו מחודדים במקצת, זוויתיים, הוא שובר אור חזק יותר, נראה בהיר יותר, נע לאט יותר, תנועות כפיפה נדירות. ;

2) ל-T. buccalis יש 3-10 תלתלים רחבים, שטוחים, לא אחידים, שובר חזק את האור, נע במהירות, קצוותיו קהים;

3) T. vincenti (מ-fusospirillous symbiosis) היא טרפונמה דקה ועדינה בעלת תלתלים שטוחים ולא סדירים, לעיתים בעלת 2-3 תלתלים שטוחים; תנועותיה פעילות, אך לא סדירות, היא זוהרת יותר מטרפונמה חיוורת.

טרפונמות חיוורות צובעות בצורה גרועה עם צבעי אנילין, אך מפחיתות את חנקתי הכסף לכסף מתכתי, המופקד על פני השטח של הטרפונמות והופך אותן לנראות במיקרוסקופיה. זיהוי של טרפונמות חיוורות ברקמות מבוסס על תופעה זו.

שיטת הלבדיטי והמנואליאנית. חתיכות עור או איברים אחרים, בעובי 1-2 מ"מ, מקובעים בפורמלין 10% למשך 24-48 שעות, נשטפים עם 96% אתנול במשך 12-16 שעות, ואז נשטפים במים מזוקקים עד שהחתיכות נטמעות בתחתית הכלי. לאחר מכן, הספגה מתבצעת עם תמיסה 1% של חנקתי כסף עם

תמיסת פירידין 10%. החתיכות נשמרות בתערובת זו (בצנצנת כהה עם פקק טחון) 2-3 שעות בטמפרטורת החדר, ולאחר מכן 4-6 שעות בטמפרטורה

50 מעלות צלזיוס בתרמוסטט. לאחר מכן התכשירים נשטפים במהירות בתמיסת פירידין של 10%, ולאחר מכן מופחת הכסף עם חומצה פירוגלית של 4% למשך מספר שעות בתוספת של 10% אצטון מטוהר ו

תמיסה של 15% פירידין.

השיטה של ​​מורוזוב היא אחת השיטות המהירות ביותר לכסף טרפונמות חיוורות, מה שנותן תוצאות משביעות רצון [Ovchinnikov N.M. וכו.,

1987]. לצביעה על פי שיטת מורוזוב, יש צורך בריאגנטים הבאים:

מגיב מס' 1 - 1 מ"ל חומצה אצטית קרחונית, 2 מ"ל תמיסת פורמלין 40% ו-100 מ"ל מים מזוקקים;

מגיב מס' 2 - 5 גרם טאנין, 100 מ"ל חומצה קרבולית נוזלית ו-100 מ"ל מים מזוקקים;

מגיב מס' 3 - תמיסה של חנקתי כסף (5 גרם חנקתי כסף גבישי מומסים ב-100 מ"ל מים מזוקקים; 20 מ"ל מכמות זו מוזגים לכלי נפרד; לשארית מוסיפים תמיסה מימית חזקה של אמוניה טיפה. 80 מ"ל של תמיסה של חנקתי כסף, עד שהמשקע הצהוב והחום-שחור שנוצר לא יתמוסס ויישאר רק אטימות קלה; אם הוספת האמוניה לא נפסקת בזמן, מוסיפים את התמיסה הזו טיפה מהתמיסה. הנותרים 20 מ"ל של תמיסת חנקתי כסף עד להופעת אטימות קלה), לצביעה, מגיב מדולל במים מזוקקים 1:10.

הַספָּגָה. תכשיר דק מיובש באוויר, אבל עדיף בתרמוסטט. מגיב מוזג על התכשיר למשך דקה אחת.

מס' 1, ואז הנוזל מרוקן, התכשיר נשטף במים. תחרוט עם מגיב מס' 2 תוך כדי חימום עד להופעת אדים (דקה). שטפו היטב במים, יוצקים מגיב מס' 3, מחממים מעט במשך 1-2 דקות עד שהמגיב הופך לחום כהה. התכשיר נשטף שוב היטב במים ומייבש. מיקרוסקופית עם מערכת טמעה.

בשיטה זו של הספגה, טרפונמות חומות או כמעט שחורות, והתכונות המורפולוגיות שלהן נשמרות.

ההכנות אינן כפופות לאחסון לטווח ארוך.

צביעה לפי רומנובסקי - גימסה. המריחה מקובעת בתערובת של Nikiforov (אתנול ואתר בנפחים שווים). לאחר אידוי ממריחה של נוזל המקבע, התכשיר מוכתם בצבע רומנובסקי-גימסה, מדולל בשיעור של 2 טיפות צבע לכל 1 מ"ל מים מזוקקים. לשם כך יוצקים 10-15 מ"ל מהצבע המדולל לצלחת פטרי, מורידים שקף זכוכית על שני מוטות זכוכית ומשאירים את התכשיר לצביעה למשך 2-5 שעות, תלוי בעוצמת יכולת הצביעה של הפתרון. לאחר השלמת הצביעה, השקופית עם המריחה נשטפת בזהירות בזרם צדדי של מים. יבש את התכשיר בטמפרטורת החדר. בדיקה מיקרוסקופית מתבצעת במערכת טבילה. כאשר צובעים תכשירים לפי שיטת רומנובסקי-גימסה, טרפונמה חיוורת מקבלת צבע ורוד או סגול ורדרד, בעוד טרפונמות אחרות מוכתמות בגוונים כחלחלים עזים.