4.3.1. שיטות לקביעת הורמונים
נכון לעכשיו, השיטות המשמשות ביותר בפרקטיקה הקלינית לקביעת הורמונים הן:
רדיואימונית,
אימונורדיומטרי,
קולטן רדיו,
שיטות כימיות ואחרות.
עד סוף שנות ה-60, השיטה היחידה לקביעת רמת ההורמונים הייתה בִּיוֹלוֹגִי,העיקרון העיקרי שלו היה שדגימה המכילה כמות לא ידועה של הורמון מוכנסת למערכת ביולוגית (בעל חיים, איבר, רקמה), ורמת ההורמון בה ביחידות פעולה ביולוגיות נקבעת על פי חומרת המחלה. תְגוּבָה. לפיכך, פרולקטין ממריץ באופן תלוי מינון את צמיחת האפיתל של זפק היונים, טסטוסטרון ממריץ את צמיחת בלוטת הערמונית בחולדות לא בוגרות ומסורסות.
בדיקת רדיואימוניה(RIA) קביעת הורמונים מבוססת על קישור תחרותי של הורמונים מסומנים ובלתי מסומנים עם נוגדנים ספציפיים. ההורמון פועל כאנטיגן. היתרונות של RIA הם רגישות גבוהה, ספציפיות גבוהה, דיוק, שחזור וקלות יישום. החיסרון הוא השימוש באיזוטופים רדיואקטיביים, שקובעים את חיי המדף המוגבלים של ערכות הבדיקה.
ניתוח אימונורדיומטרי(IRMA) הוא שינוי של RIA, שבו לא אנטיגן (הורמון), אלא נוגדנים ספציפיים מסומנים בתווית רדיואקטיבית.
ניתוח קולטני רדיו(PRA) - במקום נוגדנים להורמונים משתמשים בקולטנים שלהם.
בנוסף לתווית הרדיואקטיבית, אנזימים יכולים לשמש כסמנים בניתוח הורמונלי ( בדיקת אימונוסורבנט מקושרת) וחומרים זוהרים ( ניתוח זוהר).
על ידי שימוש ב שיטות כימיותלקבוע את המטבוליטים של הורמונים ומבשריהם (לדוגמה, נוראדרנלין ואדרנלין, דופמין, סרוטונין בשתן). קביעת תכולת ההורמונים בדם נותנת תוצאות אמינות ומדויקות יותר.
קביעת ההורמונים המיוצרים בביופסיה או בחומר חתך.
4.3.2. שיטות אינסטרומנטליות
שיטות אינסטרומנטליות משלימות את החיפוש האבחוני אחר מחלות של הבלוטות האנדוקריניות. הנפוץ ביותר: אולטרסאונד (אולטרסאונד), רדיוגרפיה, טומוגרפיה ממוחשבת (CT), הדמיית תהודה מגנטית (MRI). בנוסף, נעשה שימוש בשיטות מיוחדות, כגון אנגיוגרפיה עם דגימה סלקטיבית של דם שזורם מהבלוטה האנדוקרינית לקביעת הורמונים, סינטיגרפיה (מחקר רדיואיזוטופים) של בלוטת התריס, בלוטות יותרת הכליה ודנסיטומטריית עצם.
הליך אולטרסאונדהנפוץ ביותר באנדוקרינולוגיה. העיקרון של השיטה הוא שחיישן עם פיזוקריסטל שולח גלים קוליים לגוף האדם, ואז קולט את הפולסים המוחזרים, וממיר אותם לאותות חשמליים, אשר דרך המגבר נכנסים לצג הווידאו. אולטרסאונד מסייע בקביעת גודל ומבנה ההד של האיבר, כמו גם ביצוע ביופסיית ניקור של איברים.
סריקת סי טימבוססת על השגת "נתח" מהגוף על ידי עיבוד ממוחשב של נתונים על כושר הספיגה של רקמות כאשר קרן רנטגן מרוכזת עוברת דרכן. בטומוגרפיה ממוחשבת, קרן הרנטגן הצרה הנפלטת מהצינור, העוברת דרך השכבה הנחקרת, נקלטת על ידי גלאים ומעובדת. כל בד, בהתאם לצפיפות, סופג קרינה בצורה שונה. הגודל המינימלי של המוקד הפתולוגי, שנקבע באמצעות CT, נע בין 0.2 ל-1 ס"מ.
הדמיה בתהודה מגנטית(MRI) מבוסס על האפשרות לשנות את תהליכי התהודה וההרפיה בפרוטוני מימן בשדה מגנטי סטטי בתגובה להפעלת פולס בתדר רדיו. לאחר הפסקת הדופק, הפרוטונים חוזרים למצבם המקורי, ו"זורקים" את האנרגיה העודפת שנלכדת במכשיר. בניית התמונה מתבצעת על ידי ההבדל באנרגיות מנקודות שונות. סורקי MRI מאפשרים ליצור קטעים בעובי של 0.5 - 1 מ"מ. היתרונות של MRI הם אי-פולשניות, היעדר חשיפה לקרינה, "שקיפות" של רקמת העצם ובידול גבוה של רקמות רכות.
ניתוח גנטי
אבחון ביולוגי מולקולרי הוא שיטה אינפורמטיבית מאוד לאבחון מחלות אנדוקריניות רבות.
כל המחלות התורשתיות מחולקות לשלוש קבוצות עיקריות של כרומוזומליות, גנים ומחלות בעלות נטייה תורשתית.
לאבחון של מחלות אנדוקריניות כרומוזומליות, נעשה שימוש בשיטת קריוטיפ וחקר כרומטין מין (תסמונות דאון, שרשבסקי-טרנר, קלייפלטר). כדי לקבוע מוטציות גנים, נעשה שימוש נרחב בשיטת הידור של אילן יוחסין (עץ משפחה).
התפתחות מחלות עם נטייה תורשתית נקבעת על ידי אינטראקציה של גורמים תורשתיים מסוימים (מוטציות או שילובים של אללים וגורמים סביבתיים). בין המחלות של קבוצה זו, הנחקרות ביותר הן מחלות אוטואימוניות כמו סוכרת, תת-קורטיזם, תת-פעילות של בלוטת התריס.
בנוסף לנטייה למחלה, הגנוטיפ יכול לקבוע את הפרוגנוזה שלו, התפתחות של סיבוכים, כמו גם את הפרוגנוזה של יעילות שיטות הטיפול המשמשות.
המערכת האנדוקרינית, או מערכת ההפרשה הפנימית, מורכבת מבלוטות אנדוקריניות, הנקראות כך משום שהן מפרישות תוצרים ספציפיים של פעילותן - הורמונים - ישירות אל הסביבה הפנימית של הגוף, אל הדם. ישנן שמונה בלוטות אלו בגוף: בלוטת התריס, פאראתירואיד או זפק (תימוס), יותרת המוח, אצטרובל (או אצטרובל), יותרת הכליה (אדרנל), לבלב וגונדות (איור 67).
התפקוד הכללי של המערכת האנדוקרינית מצטמצם ליישום ויסות כימי בגוף, יצירת קשר בין איבריו ומערכותיו ושמירה על תפקודם ברמה מסוימת.
ההורמונים של הבלוטות האנדוקריניות הם חומרים בעלי פעילות ביולוגית גבוהה מאוד, כלומר, הם פועלים במינונים קטנים מאוד. יחד עם אנזימים וויטמינים, הם שייכים למה שנקרא ביו-קטליסטים. בנוסף, להורמונים יש השפעה ספציפית - חלקם משפיעים על איברים מסוימים, אחרים שולטים בתהליכים מסוימים ברקמות הגוף.
הבלוטות האנדוקריניות מעורבות בתהליך הגדילה וההתפתחות של הגוף, בוויסות תהליכים מטבוליים המבטיחים את פעילותו החיונית, בגיוס כוחות הגוף וכן בשיקום משאבי האנרגיה וחידושו. תאים ורקמות. כך, בנוסף לוויסות העצבים של הפעילות החיונית של הגוף (כולל בעת עיסוק בספורט), יש ויסות אנדוקריני וויסות הומורלי, הקשורים זה בזה ומתבצעים על פי מנגנון ה"משוב".
מאחר שתרבות גופנית ובמיוחד ספורט דורשים יותר ויותר ויסות וקורלציה מושלמים של פעילות מערכות ואיברים שונים של אדם בתנאים קשים של לחץ רגשי ופיזי, חקר תפקוד המערכת האנדוקרינית, אם כי עדיין לא נכלל בתפוצה רחבה בפועל, מתחיל בהדרגה לתפוס מקום הולך וגובר במחקר הספורטאים המורכב.
הערכה נכונה של המצב התפקודי של המערכת האנדוקרינית מאפשרת לזהות שינויים פתולוגיים בה במקרה של שימוש לא הגיוני בתרגילים גופניים. תחת השפעת תרבות גופנית וספורט שיטתית רציונלית, מערכת זו עוברת שיפור.
התאמה של המערכת האנדוקרינית לפעילות גופנית מאופיינת לא רק בעלייה בפעילות הבלוטות האנדוקריניות, אלא בעיקר בשינוי ביחסים בין בלוטות בודדות. התפתחות העייפות במהלך עבודה ממושכת מלווה גם בשינויים מתאימים בפעילות הבלוטות האנדוקריניות.
המערכת האנדוקרינית האנושית, המשתפרת בהשפעת אימון רציונלי, תורמת לעלייה ביכולות ההסתגלות של הגוף, מה שמוביל לשיפור בביצועי הספורט, בפרט בפיתוח הסיבולת.
חקר המערכת האנדוקרינית קשה ומתבצע בדרך כלל בבית חולים. אבל ישנן מספר שיטות מחקר פשוטות המאפשרות, במידה מסוימת, להעריך את המצב התפקודי של בלוטות אנדוקריניות בודדות - אנמנזה, בדיקה, מישוש, בדיקות תפקודיות.
אנמנזה. נתונים על תקופת ההתבגרות חשובים. כאשר חוקרים נשים, הם מגלים את זמן ההתחלה, סדירות, משך, ריבוי הווסת, התפתחות מאפיינים מיניים משניים; כשתשאול גברים - זמן הופעת שבירת הקול, שיער פנים וכו' אצל אנשים מבוגרים - זמן תחילת גיל המעבר, כלומר זמן הפסקת הווסת בנשים, מצב התפקוד המיני אצל גברים.
מידע על המצב הרגשי הוא חיוני. לדוגמה, שינויים מהירים במצב הרוח, עצבנות, חרדה, המלווה בדרך כלל בהזעה, טכיקרדיה, ירידה במשקל, חום נמוך, עייפות, עשויים להעיד על עלייה בתפקוד בלוטת התריס. עם ירידה בתפקוד בלוטת התריס, מציינת אפתיה, המלווה באדישות, איטיות, ברדיקרדיה וכו '.
תסמינים של תפקוד מוגבר של בלוטת התריס לפעמים כמעט חופפים לתסמינים המופיעים כאשר ספורטאי מאומן יתר על המידה. יש לייחס לצד זה של ההיסטוריה חשיבות מיוחדת, שכן לספורטאים יש מקרים של תפקוד מוגבר של בלוטת התריס (היפר-תירואידיזם).
בררו נוכחות של תלונות האופייניות לחולי סוכרת - צמא ותיאבון מוגברים וכו'.
בְּדִיקָה. שימו לב לסימנים הבאים: המידתיות של התפתחות חלקים בודדים בגוף אצל אנשים גבוהים (האם יש עלייה לא פרופורציונלית באף, הסנטר, הידיים והרגליים, מה שעלול להצביע על תפקוד יתר של בלוטת יותרת המוח הקדמית - אקרומגליה), עבור נוכחות של עיניים בולטות, בוהק בולט של העיניים (שנצפתה עם פעילות יתר של בלוטת התריס), נפיחות בפנים (מצוין עם תת פעילות של בלוטת התריס), כמו גם סימנים כגון בלוטת התריס מוגדלת, הזעה או עור יבש, נוכחות של שומן (העיקרי). שקיעת שומן בבטן התחתונה, בישבן, בירכיים ובחזה אופיינית להשמנה הקשורה לתפקוד לקוי של יותרת המוח והבלוטות), ירידה חדה במשקל (זה קורה עם תירוטוקסיקוזיס, מחלות של בלוטת יותרת המוח - מחלת סימונדס ובלוטת יותרת הכליה - אדיסון מַחֲלָה).
בנוסף, במהלך הבדיקה נקבע קו השיער בגוף, שכן צמיחת השיער תלויה במידה רבה בהשפעות ההורמונליות של בלוטות המין, בלוטת התריס, בלוטת יותרת הכליה ובלוטת יותרת המוח. נוכחות שיער אצל גברים, האופיינית לנשים, עשויה להעיד על חוסר תפקוד של בלוטות המין. הסוג הגברי של קו השיער אצל נשים יכול להיות ביטוי של הרמפרודיטיס - נוכחות אצל אדם אחד של סימנים האופייניים לשני המינים (אנשים כאלה אינם מורשים לשחק ספורט).
צמיחת שיער מוגזמת בגוף ובגפיים, ואצל נשים ובפנים (שפם וזקן) מאפשרת לחשוד בגידול של קליפת יותרת הכליה, יתר פעילות בלוטת התריס וכו'.
מישוש. מבין כל הבלוטות האנדוקריניות, ניתן למשש ישירות את בלוטת התריס ואת הגונדות הגבריות (כמו גם לבחון); בדיקה גינקולוגית - בלוטות מין נשיות (שחלות).
בדיקות תפקודיות. במחקר של תפקוד הבלוטות האנדוקריניות, נעשה שימוש בבדיקות רבות כאלה. החשובים ביותר ברפואת ספורט הם בדיקות תפקודיות המשמשות בחקר בלוטת התריס ובלוטות יותרת הכליה.
בדיקות תפקודיות בחקר תפקוד בלוטת התריס מבוססות על חקר תהליכים מטבוליים המווסתים על ידי בלוטה זו. הורמון בלוטת התריס - תירוקסין ממריץ תהליכי חמצון, משתתף בוויסות סוגים שונים של חילוף חומרים (פחמימות, שומן, חילוף חומרים של יוד וכו'). לכן, השיטה העיקרית לחקר המצב התפקודי של בלוטת התריס היא קביעת חילוף החומרים הבסיסי (כמות האנרגיה בקילוקלוריות שצורך אדם במצב של מנוחה מוחלטת), אשר תלויה ישירות בתפקוד בלוטת התריס. וכמות התירוקסין המופרשת ממנו.
ערכו של חילוף החומרים הבסיסי בקילוקלוריות מושווה לערכים הנכונים המחושבים על פי טבלאות האריס-בנדיקט או נומוגרמות, והוא מבוטא כאחוז מהערך התקין. אם חילוף החומרים העיקרי של הספורטאי הנבדק עולה על התשלום ביותר מ- 10%, הדבר מרמז על תפקוד יתר של בלוטת התריס, אם פחות מ-10% - תת-פונקציה שלה. ככל שאחוז העודף גבוה יותר, כך תפקוד יתר בולט יותר של בלוטת התריס. עם היפר-תירואידיזם משמעותי, קצב חילוף החומרים הבסיסי עשוי להיות גדול מ-+100%. ירידה בקצב חילוף החומרים הבסיסי ביותר מ-10% בהשוואה לזה המתאים עשויה להצביע על תת-תפקוד של בלוטת התריס.
ניתן לבחון את תפקוד בלוטת התריס גם בעזרת יוד רדיואקטיבי. זה קובע את היכולת של בלוטת התריס לספוג אותה. אם יותר מ-25% מהיוד הניתן נשאר בבלוטת התריס לאחר 24 שעות, הדבר מצביע על עלייה בתפקוד שלו.
בדיקות תפקודיות בחקר תפקוד האדרנל מספקות נתונים חשובים. לבלוטות יותרת הכליה יש מגוון השפעות על הגוף. מדליית האדרנל, משחררת הורמונים - קטכולאמינים (אדרנלין ונוראפינפרין), מתקשרת בין הבלוטות האנדוקריניות למערכת העצבים, משתתפת בוויסות חילוף החומרים של הפחמימות, שומרת על טונוס כלי הדם ושרירי הלב. קליפת יותרת הכליה מפרישה אלדוסטרון, קורטיקוסטרואידים, הורמונים אנדרוגנים, הממלאים תפקיד חשוב בחיי הגוף בכללותו. כל ההורמונים הללו מעורבים במטבוליזם של מינרלים, פחמימות, חלבונים ובוויסות של מספר תהליכים בגוף.
עבודה שרירית אינטנסיבית משפרת את תפקוד מדוללת האדרנל. לפי מידת העלייה הזו, ניתן לשפוט את השפעת העומס על גופו של הספורטאי.
לקביעת המצב התפקודי של בלוטות האדרנל, ההרכב הכימי והמורפולוגי של הדם (כמות האשלגן והנתרן בסרום הדם, מספר האאוזינופילים בדם) והשתן (קביעת 17-קטוסטרואידים וכו'). נבדקת.
אצל ספורטאים מאומנים, לאחר עומס התואם לרמת המוכנות שלהם, יש עליה מתונה בתפקוד האדרנל. אם העומס עולה על היכולות התפקודיות של הספורטאי, התפקוד ההורמונלי של בלוטות האדרנל מדוכא. זה נקבע על ידי מחקר ביוכימי מיוחד של דם ושתן. עם חוסר תפקוד של יותרת הכליה, חילוף החומרים של מינרלים ומים משתנה: רמת הנתרן בסרום הדם יורדת וכמות האשלגן עולה.
ללא תפקוד מושלם ומתואם של כל הבלוטות האנדוקריניות, אי אפשר להגיע לביצועי ספורט גבוהים. ככל הנראה, ענפי ספורט שונים קשורים לעלייה דומיננטית בתפקוד של בלוטות אנדוקריניות שונות, מכיוון שלהורמונים של כל אחת מהבלוטות יש השפעה ספציפית.
בפיתוח איכות הסיבולת, התפקיד העיקרי הוא של הורמונים המווסתים את כל סוגי חילוף החומרים העיקריים, בפיתוח איכויות המהירות והכוח חשובה לעלייה ברמת האדרנלין בדם.
משימה דחופה של רפואת הספורט המודרנית היא לחקור את המצב התפקודי של המערכת האנדוקרינית של הספורטאי על מנת להבהיר את תפקידו בשיפור ביצועיו ומניעת התפתחות של שינויים פתולוגיים הן במערכת האנדוקרינית עצמה והן במערכות ואיברים אחרים (מאז תפקוד לקוי של המערכת האנדוקרינית משפיע על הגוף בכללותו).
שיטת לימוד המערכת האנדוקרינית מורכבת מנטילת אנמנזה, בדיקת המטופל, מישוש, אוסקולציה, שיטות מחקר מעבדתיות ואינסטרומנטליות, כלליות ומיוחדות.
לבדיקה קלינית, תנאי חשוב הוא שמירה על רצף הבדיקה של האיברים האנדוקריניים: בלוטת יותרת המוח, בלוטת התריס, בלוטות הפארא-תירואיד, לבלב, בלוטות יותרת הכליה, בלוטות המין.
בעת איסוף אנמנזה ובדיקה, תשומת הלב מוקדשת לנוכחות או היעדר תלונות ותסמינים אצל המטופל, האופייניים לפתולוגיה של בלוטה אנדוקרינית מסוימת. תלונות ותסמינים המצביעים על פגיעה בבלוטות האנדוקריניות מגוונות מאוד, שכן להורמונים יש השפעה רבה על חילוף החומרים, ההתפתחות הגופנית והנפשית של הילד, המצב התפקודי של איברים ומערכות שונות בגופו של הילד.
חולים עם פתולוגיה של הבלוטות האנדוקריניות עלולים להתלונן על התרגשות מוגברת, עצבנות, שינה חסרת מנוחה, הזעה, שינוי צבע של העור, פגיעה בצמיחת שיער וציפורניים, צמא וכו'.
חולים עם תפקוד יתר של תאים אאוזינופיליים של בלוטת יותרת המוח הקדמית עשויים להתלונן על גדילה ענקית (מעל 190-200 ס"מ) (גיגנטיות), גפיים, אצבעות ואצבעות רגליים ארוכות באופן לא פרופורציונלי (אקרומגליה). ניתן גם להבחין בתווי פנים גסים, פרוגנאטיזם, רווחים רחבים בין השיניים, קיפוזיס מוגזם של עמוד השדרה הסטרנאלי עקב צמיחה אינטנסיבית של החוליות. יש גם עלייה בקשתות העל, שרירים מוגדרים היטב, אבל חולשת שרירים אופיינית.
עם תפקוד יתר של התאים הבזופיליים של בלוטת יותרת המוח, ההורים עשויים להתלונן על עלייה משמעותית במשקל הגוף, שיער פנים אצל בנות (הירסוטיזם), פיגור בגדילה, אשר נקבע לבסוף לאחר בדיקת המטופל.
עבור אי ספיקת יותרת המוח, תלונות ותסמינים אופייניים הם ירידה בגובה (במעלה מ-25% בהשוואה לנורמה), שינוי בהבעות הפנים ותווי פנים "ילדותיים", התפתחות שרירים לקויה, התבגרות מאוחרת או נעדרת, איברי מין קטנים, שיוש של העור, גפיים קרות. השילוב של תסמינים אלו עם הפרעות שומן-מיניות (פלג גוף תחתון) אפשרי עם נגע הרסני של אזור ההיפותלמוס-יותרת המוח.
עם פעילות יתר של בלוטת התריס ייתכנו תלונות על ירידה במשקל, עצבנות, התרגשות וניידות יתר, חוסר יציבות רגשית, דפיקות לב, לחות מוגברת בכפות הידיים והזעה כללית, גירוד בעור, תחושת חום (חום), כאבים באזור הלב. , דמעות, תחושת כאב בעיניים. בבדיקה ניתן לזהות רעד באצבעות, נפיחות בעפעפיים, רעד בעפעפיים סגורים (סימפטום של רוזנבך), מצמוץ עפעפיים (סימפטום של סטלווג), אקסופטלמוס חד או דו צדדי, פגיעה בהתכנסות העיניים עקב paresis של שריר הישר הפנימי של העין (סימפטום של מוביוס), פס לבן של סקלרה מעל הקשתית כאשר מסתכלים למטה (תסמין של גרפה), כאשר מסתכלים למעלה
(תסמין של קוצ'ר), סקלרה לבנה מסביב לקשתית העין עם עיניים פקוחות (תסמין של Delrymple), מבט "מבוהל", מקובע של עיניים מבריקות.
כאשר בודקים את הצוואר בילדים בריאים, במיוחד בגיל ההתבגרות, ניתן לראות את האיסטמוס של בלוטת התריס. אם יש אסימטריה במיקום של בלוטת התריס, אז זה מצביע על נוכחות של צמתים. בילד עם יתר פעילות בלוטת התריס ניתן להבחין בעלייה בדרגת בלוטת התריס I - עלייה באיסטמוס המורגשת בבליעה; תואר II - הגדלת איסתמוס
וחלקיקים; תואר III - "צוואר עבה" (איור 44); תואר IV - עלייה בולטת (זפק, משנה באופן דרמטי את תצורת הצוואר) (איור 45); דרגת V - זפק בגודל עצום.
יש לציין שבניגוד לתצורות אחרות על הצוואר, בלוטת התריס מעורבבת עם קנה הנשימה בעת הבליעה.
למטופלים עם תת פעילות בלוטת התריס עלול להיות פיגור מוקדם בהתפתחות הגופנית והנפשית, בקיעת שיניים מאוחרת ושגויה, ריור, קול מחוספס וצרוד, נחירות בנשימה, ירידה בעניין בסביבה, עייפות.
בבדיקת ילד חולה, ניתן להבחין בפיגור בהתפתחות עצמות הפנים, אף אוכף, מקרוגלוסיה, עור אפור, פנים נפוחות, עיניים קטנות, שפתיים עבות, ציפורניים שבירות, שיער דליל בראש, צוואר קצר, גפיים, אצבעות (צמיחת העצם באורך מוגבלת, ללא רוחב).
תפקוד יתר של בלוטות התריס מוביל לירידה בתיאבון או אפילו אנורקסיה, בחילות, הקאות, עצירות, כאבי עצמות, חולשת שרירים, שברים בעצמות, צמא, פולידיפסיה, פוליאוריה, דיכאון, פגיעה בזיכרון.
באנמנזה של חולים עם היפופאראתירואידיזם, מציינים משקל גוף גדול בלידה, נפילה איטית של שאריות חבל הטבור, שלשול כרוני, אשר משתנה לעיתים קרובות לעצירות, עיכוב התפתחותי, פוטופוביה, עוויתות, עוררות יתר, עווית גרון. בבדיקה עלולים להופיע תסמינים אופציונליים: עווית עפעפיים, דלקת הלחמית, עדשת עין עכורה, עששת, ציפורניים דקות, הפרעות בפיגמנטציה של השיער.
אם יש חשד לסוכרת, יש לברר אם לילד יש תיאבון מוגבר (פוליפגיה), צמא (פולידיפסיה) והשתן מוגבר (פוליאוריה). במקביל, ניתן להבחין בתסמינים קלים כביכול של סוכרת - neurodermatitis, מחלת חניכיים, furunculosis, גירוד באזור איברי המין. בשלבים המאוחרים יותר, עקב חמצת קטו, התיאבון יורד, ילדים מתעייפים מהר, לומדים גרועים יותר, עייפות וחולשה מתגברים. יש הרטבת לילה ויום, שתן קל, שלאחריו נשארים כתמי עמילן על פשתן, פרסטזיה של הרגליים, חדות הראייה יורדת, קסנתומות עשויות להופיע על כפות הידיים.
אצל תינוקות יש לשים לב למשקל לידה נמוך, ירידה במשקל (היפוטרופיה), פיודרמה, עירוי תכוף.
תסמונת אדרנוגניטל היא ביטוי של היפרפלזיה מולדת ויריליזית של קליפת יותרת הכליה. באנמנזה ובבדיקת החולה נקבע פסאודו-הרמפרודיטיזם (עלייה בדגדגן, השפתיים הגדולות, חריגה בהתפתחות השופכה, בדומה להיפוספדיאס). בעתיד, יש סוג גוף גברי, hirsutism, קול נמוך, אקנה. בנים עלולים לסבול מאקרוגניטוסומיה (בגיל 2-3), התפתחות מינית מוקדמת לא טבעית. אצל ילדים משני המינים ניתן להבחין בצמיחה גבוהה, כוח השרירים מוגבר, הבשלה מואצת של השלד. במקרים חמורים יותר, ישנם סימנים לתסמונת אדרנוגניטלית עם אובדן מלחים (תסמונת Debre-Fibiger). הביטויים לעיל של המחלה מלווים בירידה במשקל, עלייה איטית במשקל הגוף ואקסיקוזיס. לעתים רחוקות, היפרתרמיה ויתר לחץ דם נצפים.
בחולים עם היפרפלזיה מאומתת של יותרת המוח של קליפת יותרת הכליה, מאובחנת מחלת Itsenko-Cushing. בתסמונת Itsenko-Cushing, בלוטות יותרת הכליה מייצרות יתר על המידה קורטיזול (אלדוסטרון ואנדרוגנים במידה פחותה). חולים כאלה מתלוננים, ובבדיקה יש פיגור בגדילה, זרועות "רזות", שינוי בהבעות פנים ופנים בצורת ירח, עורו סגול-אדום. עור הגזע והגפיים יבש עם סימני מתיחה סגולים-ציאנוטיים רבים ממקור אטרופי. אתה יכול לראות hypertrichosis, אקנה, pyoderma, mycosis. אצל בנות, מאפיינים מיניים משניים מקבלים התפתחות הפוכה, האופי המחזורי של הווסת מופרע. בשלבים מאוחרים יותר עשויות להופיע תלונות על תת תזונה או ניוון שרירים, תת התפתחות של איברי המין ולחץ דם גבוה.
עם תפקוד לא מספיק של יותרת הכליה עם מהלך כרוני (ירידה בייצור של קורטיזול, אלדוסטרון, אנדרוגנים), לחולים יש שלישיה קלאסית של סימנים האופייניים למחלת אדיסון - אדינמיה, פיגמנטציה, תת לחץ דם. חולים מתלוננים על חולשה, עייפות, ירידה בניידות, ירידה בתיאבון. חסימת מעיים אופיינית. מתפתחים ירידה במשקל, נמנום, חולשת שרירים. בחלק מהחולים, הביטוי הראשון של המחלה הוא פיגמנטציה חומה של העור והריריות של חלל הפה (באמצעות ייצור מוגזם של הורמון מגרה מלנוציטים על ידי בלוטת יותרת המוח). הפיגמנטציה משתרעת על הצוואר, מפרקי המרפק, הקו הלבן של הבטן, איברי המין, החך הקשה, פני השטח הפנימיים של הלחיים. בנגעים חריפים של בלוטות יותרת הכליה, חולים מתלוננים על חולשה חמורה, כאבים בחלל הבטן, הקאות, שלשולים.
מרכיב חשוב מאוד בבדיקה הוא הערכת ההתפתחות המינית של הילד. לשם כך, בנות בוחנות בקפידה את בלוטות החלב ואת צמיחת שיער הערווה, אצל בנים - את התפתחות הפין והאשכים, כמו גם את מידת צמיחת שיער הערווה. מאפיינים מיניים משניים מזוהים והתפתחותם צריכים להיקבע על פי הסיווג שהציע JMTanner ב-1962. גם לבנות וגם לבנים.
בילדים עם התפתחות מינית מוקדמת (עד 8 שנים בבנות ועד 10 שנים בבנים), תסביך הסימפטומים כולל האצה משמעותית של גדילה, הופעה מוקדמת של מוקדי התאבנות בעצמות, סינוסטוזיס מוקדמת, כתוצאה מכך הגוף אינו מגיע להתפתחות מלאה. היכולות השכליות מתאימות לדרישות הגיל. ספרמטוגנזה מופיעה מוקדם אצל בנים ומחזור אצל בנות, הגדלה ושעירות של איברי המין. על רקע אדישות ותרדמה כללית, ניתן להבחין בריגוש מיני. ניסטגמוס, פטוזיס, הליכה לא תקינה אינם מציינים לעתים קרובות.
באנמנזה ובדיקה של היפוגונדיזם של המטופל (איחור בהתפתחות המינית במשך שנתיים או יותר), גניקומסטיה אמיתית, מבנה גוף דמוי סריס (חזה צר, ללא שיער, רגליים ארוכות באופן לא פרופורציונלי, מעט מאוד שיער פנים, גניקומסטיה, פטמות הפוכות, לא מספיק פיתוח מאפיינים מגדריים משניים). ילדים כאלה גדלים לגובה, יש להם קול גבוה, התפתחות לא מספקת של הגרון, השרירים, איברי המין, מאפיינים מיניים משניים.
מישוש חשוב לאבחון נגעים בבלוטות האנדוקריניות. עם זאת, לא כל הבלוטות זמינות למישוש.
המישוש מתבצע על פי כללים ידועים (ידיים חמות ונקיות, המיקום הנכון של הרופא והמטופל, ללא זרים; מבלי לגרום למטופל סבל מיותר, הם בודקים תחילה באופן שטחי, ולאחר מכן עמוק יותר).
מישוש של האיסטמוס של בלוטת התריס מתבצע על ידי תנועות החלקה של האגודל, האצבע והאצבע האמצעית של יד ימין כלפי מעלה מהידית של עצם החזה.
עבור מישוש של האונה הימנית והשמאלית של בלוטת התריס, יש צורך להביא את האצבעות הכפופות II-V של שתי הידיים על הקצוות האחוריים, ואת האגודל - על הקצוות הקדמיים של השריר הסטרנוקלידומאסטואיד. לאחר מכן, הילד מתבקש ללגום, במהלכה בלוטת התריס תנוע יחד עם הגרון. במקביל נקבעים פני השטח, העקביות, הניידות, הגודל והכאב של האיבר.
האונות הימנית והשמאלית של בלוטת התריס מומשות ללא כאב בצורה של תצורות רכות ורכות עם משטח חלק.
בעזרת מישוש מתבררים המאפיינים של הפרעות מיניות, במיוחד במהלך מישוש של איברי המין החיצוניים, גודלם, מידת הירידה (עלייה), מספר האשכים בשק האשכים, צפיפותם ולוקליזציה של האשך ב-cryptorchidism נקבעים. מוערכים עובי שכבת השומן התת עורית, טמפרטורת העור בגפיים, הטונוס והחוזק של השרירים ועקביותם. לעתים קרובות, בחולים עם פתולוגיה של הבלוטות האנדוקריניות, כבד מוגדל מומש, הכאב שלו נקבע.
כלי הקשה בילדים עם מחלות של המערכת האנדוקרינית יכולים לקבוע כאבי עצמות עם היפרפאראתירואידיזם, ירידה בגודל הקהות היחסית של הלב עם היפוגונדיזם, כבד מוגדל עם סוכרת, וממוקם זפק thymic, אשר נקבע מעל ידית עצם החזה.
ניתן לשמוע רעש וסקולרי בחולים עם תירוטוקסיקוזיס על פני הבלוטה; קולות לב מוחלשים ורשרוש סיסטולי בקודקוד שלו עם אי ספיקת יותרת הכליה.
כדי לאבחן מחלות של המערכת האנדוקרינית, יש צורך להשתמש במחקרי מעבדה מיוחדים, כלומר, קביעת תכולת ההורמונים בנוזלים ביולוגיים שונים.
בהתבסס על קביעת רמת ההורמונים הללו, ניתן להסיק מסקנה לגבי אופי התפקוד לקוי של הבלוטות האנדוקריניות המתאימות.
מחלות אנדוקריניות הן כל מיני הפרעות הורמונליות המתרחשות לרוב כתוצאה מתפקוד לקוי של בלוטת התריס והלבלב, וכן כתוצאה ממחלות מערכתיות. מחלות אנדוקריניות הן שכוללות סוכרת מסוג 2, שמספר המקרים שלהן גדל בהתמדה בשנים האחרונות והופך למאיים באמת. כל המחלות של המערכת האנדוקרינית גורמות להפרעות מורכבות בגוף המפחיתות את איכות החיים והורסות את בריאות האדם.
בדיקות מתוזמנות של המערכת האנדוקרינית:
מאחר והסבירות לפתח סוכרת עולה עם השנים, התדירות והנחיצות של בדיקות הבקרה תלויות בגיל.
עד גיל 45 נעשית בדיקת דם לגלוקוז אם יש חשד להפרעות הורמונליות (לפי הנחיות רופא).
לאחר גיל 45, יש לבצע בדיקת גלוקוז בדם לפחות כל שלוש שנים.
בכל גיל, אם אתה בסיכון לסוכרת, אתה צריך לעשות זאת באופן קבוע.
עוד על מחלות וגורמי סיכון של המערכת האנדוקרינית -.
בדיקת גלוקוז בדם
יַעַד. רמת הגלוקוז (סוכר) בדם מראה עד כמה חילוף החומרים של פחמימות מתרחש בצורה נכונה בגוף בהשתתפות הורמון האינסולין. עודף של רמות גלוקוז תקינות מעיד על היפרגליקמיה (אחד המדדים לסוכרת מסוג 2), ירידה מתחת לנורמה מעידה על היפוגליקמיה (עדות לחוסר אנרגיה).
דֶרֶך. במקרה הקלאסי, דם לגלוקוז נלקח על בטן ריקה: יש לחלוף לפחות 8-10 שעות בין הארוחה האחרונה (ערב) לבין דגימת הדם. גם בתקופה זו אתה לא יכול לשתות משקאות מתוקים, אלכוהול, אתה יכול רק לשתות מים ותה חלש לא ממותק. כמו כן, על פי מרשם הרופא לוקחים דם לגלוקוז בעומס: במקרה זה, תחילה לוקחים דגימת דם בקרה על קיבה ריקה, לאחר מכן האדם שותה תמיסה מתוקה, ושוב לוקחים ממנו דם - כמה פעמים תוך שעתיים. זה מאפשר לך לעקוב אחר הדינמיקה של עלייה וויסות רמות הסוכר בדם.
מסקנות. רמת הסוכר התקינה בדם היא 3.3 - 5.5 mmol/L. ככל שהניקוד שלך קרוב יותר לגבול העליון, כך התוצאה מדאיגה יותר. רמת גלוקוז גבוהה בדם מסמנת לא רק את האפשרות לפתח סוכרת, אלא גם על מספר הפרעות אחרות, למשל, דלקת לבלב, סיסטיק פיברוזיס והפרעות בתפקוד הלבלב. אפילו מתח חמור עלול לגרום לעלייה ברמות הגלוקוז בדם.
בדיקת דם לאיתור הורמונים
יַעַד. תכונה אופיינית של הורמונים המיוצרים על ידי בלוטת התריס, הלבלב, מערכת הרבייה, בלוטות יותרת הכליה, בלוטת יותרת המוח היא ההשפעה הכוללת על הגוף. לכן, אם מתרחש חוסר איזון הורמונלי, ההשלכות יכולות להיות מגוונות מאוד - מהתפתחות סוכרת ועד לבעיות בתפקוד הרבייה, בעור וכו'. ניתוח הורמונים מאפשר לקבוע את רמת ההורמונים השונים בדם, להשוות אותה לנורמה ולהסיק את המסקנות המתאימות.
דֶרֶך. דם להורמונים נלקח על בטן ריקה מוריד: 10 שעות לפני דגימת דם אין לאכול או לשתות, יש להימנע גם מפעילות גופנית ומפעילות נמרצת בעבודה. אם אתה נוטל תרופות כלשהן, במיוחד הורמונליות, התייעץ עם הרופא שלך וקבע את אופן הגמילה הזמנית מהן כדי לא להזיק לעצמך ולקבל תוצאות בדיקות אמינות.
מסקנות. התוצאה של בדיקת דם להורמונים היא רשימה של הורמונים (טסטוסטרון, אסטרוגן, פרוגסטרון, פרולקטין, הורמון luteinizing, הורמוני בלוטת התריס וכו') ורמותיהם בדם. אם אחד הערכים לא מתאים לנורמה, נוכל לדבר על הפרה. אבל רק רופא יכול להסיק מסקנות, כי לא רק ערכים בודדים חשובים, אלא גם השילוב שלהם.
אולטרסאונד של בלוטת התריס ובלוטת יותרת הכליה
יַעַד. אולטרסאונד של הבלוטות האנדוקריניות - בלוטת התריס ובלוטת יותרת הכליה - מאפשר לזהות הפרות בבריאות האיברים עצמם, שהובילו לחוסר איזון הורמונלי. אולטרסאונד מתבצע בעת קביעת הגורמים להפרעות הורמונליות, וכן במקרים בהם יש חשד לשינויים בבלוטות (גבשושיות בבלוטת התריס).
דֶרֶך. אולטרסאונד מבוצע באמצעות מכשיר אולטרסאונד: מומחה מציב חיישן באזור בלוטת התריס או בלוטת יותרת הכליה ובקבלת תמונה על המוניטור, יכול להעריך חזותית את מצב האיבר ואת אופי ההפרות . הצורה, גודל הבלוטות, נוכחות של סטיות ועיוותים, כמו גם ניאופלזמות מוערכים. גם בלוטות הלימפה ומערכת הדם נחשבות.
מסקנות. תוצאת הניתוח היא תמונת אולטרסאונד ופרשנותה החזותית ביחס לנורמה. ככלל, אולטרסאונד של הבלוטות האנדוקריניות מאפשר לזהות ברמה גבוהה של דיוק נוכחות של ניאופלזמות באיברים ושינויים גלויים במבנה שלהם. ניתוח תמונה מתבצע אך ורק על ידי רופא.
הסוכנות הפדרלית לחינוך של הפדרציה הרוסית
GOU VPO אוניברסיטת Bashkir State University
המחלקה לביולוגיה
המחלקה לביוכימיה
עבודה בקורס
שיטות לחקר המערכת האנדוקרינית במצבים נורמליים ופתולוגיים
הושלם:
סטודנט שנה 5 של OZO
קבוצה א
Usachev S.A.
אופא 2010
תוֹכֶן
מבוא …………………………………………………………………………………………………4
1. סקירת שיטות לחקר המערכת האנדוקרינית
בנורמה ובפתולוגיה………………………………………………………………… …6
1.1. מתווה היסטורי קצר ………………………………………………………… 6
1.2. סקירת שיטות מודרניות לחקר המערכת האנדוקרינית..12
1.3. שיטות מודרניות לחקר המערכת האנדוקרינית על
דוגמה למחקר של בלוטת התריס………………………………………28
2. בעיות וסיכויים של שיטות ללימוד האנדוקרינית
מערכות………………………………………………………………………………………45
מסקנה………………………………………………………………………………..58
רשימה של ספרות משומשת………………………………………………………59
רשימת קיצורים שאומצו בעבודה
AOK - תאים יוצרי נוגדנים
AG - אנטיגן
ACTH - הורמון אדרנוקורטיקוטרופי
HPLC - High Speed Chromatography נוזלי
GI - היפראינסולינמיה מפצה
DNA - חומצה דאוקסיריבונוקלאית
LC - כרומטוגרפיה נוזלית
ELISA - אנזים immunoassay
IR - עמידות לאינסולין
CT - טומוגרפיה ממוחשבת
LH - הורמון luteinizing
טרשת נפוצה - תסמונת מטבולית
MRI - הדמיית תהודה מגנטית
PCR - תגובת שרשרת פולימראז
RIA - בדיקת רדיואימונו
DHRT - תגובה מושהית של רגישות יתר
DM 2 - סוכרת מסוג 2
TSH - הורמון מגרה בלוטת התריס
T4 - תירוקסין
T3 - triiodothyronine
TBG - בדיקת גלובולין קושרת תירוקסין
אולטרסאונד - אולטרסאונד
FIA - בדיקת חיסון פלואורסצנטי
CFD - מיפוי דופלר צבעוני
CNS - מערכת העצבים המרכזית
בלוטת התריס - בלוטת התריס
מבוא
במהלך השנים האחרונות, כתוצאה מפיתוחן של שיטות עדינות, רגישות וספציפיות יותר לקביעת הורמונים ושיטות אחרות לחקר המערכת האנדוקרינית בבריאות ומחלות, האנדוקרינולוגיה הקלינית והביוכימיה הפכו במידה רבה מצורת אמנות לענף. של כימיה יישומית, פיזיולוגיה, פיזיקה וגנטיקה. התקדמות זו התאפשרה הודות להכנסת הלכה למעשה של מספר רב מהשיטות העדכניות וההיי-טקיות לחקר המערכת האנדוקרינית, הבידוד והאפיון הביולוגי והביוכימי שלאחר מכן של הורמוני פוליפפטיד שונים מטוהרים במיוחד, סטרואידים, ויטמינים, נגזרות של פוליפפטידים וחומצות אמינו קטנות, המסווגים כהורמונים, וכן ייצור אטומים מסומנים רדיואקטיביים של הורמונים בעלי פעילות ספציפית גבוהה.
הרלוונטיות של הנושא:
כיום, על סף הבנת התופעות הנסתרות והמסתוריות ביותר של אורגניזם חי, המשימה החשובה ביותר היא למצוא את שיטות המחקר האמינות, הנגישות וההיי-טקיות ביותר. העידן החדש של ננו-טכנולוגיות ותגליות מיוחדות מאוד מתחיל לתרום את תרומתו לכימיה ביולוגית, שכבר מזמן משתמשת בשיטות לא רק של ניתוח כימי, אלא בטכנולוגיות המודרניות ביותר מכל ענפי הפיזיקה, מדעי המחשב, המתמטיקה ומדעים אחרים. הזמן מכתיב את תנאיו לאנושות - לדעת לעומק, לדעת ביסודיות, למצוא את הסיבה לתהליכים המתרחשים באורגניזם חי בתנאים נורמליים ופתולוגיים. החיפוש אחר שיטות מחקר חדשות לא עוצר, ולמדען פשוט אין זמן להכליל, לסדר את תחום הידע הזה, כדי להדגיש את מה שהוא צריך כרגע. בנוסף, כאשר חקרתי את בעיית המחקר של המערכת האנדוקרינית, לא מצאתי מדריך שלם מספיק והכליל בנושא זה. חוקרים רבים, במיוחד ביוכימאים, מתמודדים עם בעיה כמו חיפוש ושיטתיות של שיטות מודרניות לחקר המערכת האנדוקרינית במצבים נורמליים ופתולוגיים. זה נובע בעיקר מהעובדה שמקורות ספרות חדשים, שיטות מחקר חדשות מופיעות מדי יום, אבל אין מדריך אחד לשיטות מחקר שיעשה שיטתיות של נתונים על שיטות. מסיבות אלו הרלוונטיות של הנושא שבחרתי היא גבוהה מאוד.
מַטָרָה:
לשיטת נתונים על מצב השיטות לחקר המערכת האנדוקרינית במצבים נורמליים ופתולוגיים בעולם המודרני.
משימות:
- ערכו סקירה היסטורית של הנושא.
לשקף ידע מודרני על שיטות לימוד המערכת האנדוקרינית, ללא תיאור מפורט של השיטות והטכניקות של המחקר.
תאר שיטות מחקר על הדוגמה של בלוטה אנדוקרינית אחת.
להדגיש את הבעיות והסיכויים של שיטות מודרניות לחקר המערכת האנדוקרינית במצבים נורמליים ופתולוגיים.
1. סקירת שיטות לחקר המערכת האנדוקרינית במצבים נורמליים ופתולוגיים
1.1. מתאר היסטורי קצר
חקר המערכת האנדוקרינית והאנדוקרינולוגיה עצמה הן תופעות חדשות יחסית בתולדות המדע. המערכת האנדוקרינית הייתה חלק בלתי נגיש בגוף האדם עד תחילת המאה ה-20. לפני כן, החוקרים לא הצליחו לפענח את סודות התצורות האנדוקריניות בשל העובדה שלא יכלו לבודד ולחקור את הנוזלים שהם מפרישים ("מיץ" או "סודות"). מדענים לא מצאו שום "מיץ" או צינורות הפרשה מיוחדים, שדרכם בדרך כלל זורם הנוזל המופק החוצה. לכן, השיטה היחידה לחקר הפונקציות של הבלוטה האנדוקרינית הייתה שיטת הכריתה של חלק או כל האיבר.
מדענים - היסטוריונים טענו כי איברי המערכת האנדוקרינית במזרח היו ידועים אפילו בימי קדם וכינו אותם בכבוד "בלוטות הגורל". לפי המרפאים המזרחיים, בלוטות אלו היו קולטות ושנאים של אנרגיה קוסמית שזורמת לערוצים בלתי נראים (צ'אקרות) ותומכות בחיוניות האנושית. האמינו שהעבודה המתואמת היטב של "בלוטות הגורל" עלולה להיות מוטרדת על ידי אסונות המתרחשים בהוראת הגורל הרשע.
אזכור המחלה, ככל הנראה סוכרת, מצוי בפפירוס המצרי של 1500 לפני הספירה. הזפק והשפעות הסירוס בבעלי חיים ובבני אדם שייכים לתיאורים הקליניים הראשונים של מחלות, שטבען האנדוקריני הוכח לאחר מכן. תיאורים קליניים ישנים של מחלות אנדוקריניות נעשו לא רק במערב, אלא גם בסין ובהודו העתיקה.
אם נסדר תגליות משמעותיות בתחומים רבים של האנדוקרינולוגיה בזמן, אז התמונה שתתקבל תשקף בזעיר אנפין את ההיסטוריה של כל הביולוגיה והרפואה. לאחר תצפיות קליניות מקוטעות שנעשו בעת העתיקה ובימי הביניים, המדעים הללו התקדמו לאט ביותר. במחצית השנייה של המאה ה-19 חלה זינוק מהיר בהתפתחותם של תחומי רפואה רבים, הן מבחינת איכות המחקר הקליני והן מבחינת הבנת מנגנוני המחלה. תהליך זה נבע ממורכבות הקשר בין סיבות היסטוריות.
ראשית, המהפכה התעשייתית הובילה לצבירת הון, ששימש לפיתוח מדעים רבים, בעיקר כימיה וביולוגיה.
מהפכה נוספת שהתרחשה במחצית השנייה של המאה ה-19 והייתה בעלת חשיבות מהותית לפיתוח לא רק האנדוקרינולוגיה, אלא גם הרפואה והביולוגיה, הייתה הופעת מודלים ניסיוניים של בעלי חיים. קלוד ברנרד ואוסקר מינקובסקי הדגימו אפשרות לערוך ניסויים מבוקרים וניתנים לשחזור במעבדה. במילים אחרות, נוצרה האפשרות ל"חקירה נגדית" של הטבע. ללא עבודתם של חלוצים אלו, נמנע מאיתנו רוב הידע המודרני בתחום האנדוקרינולוגיה. המחקר של כל אותם חומרים שנקראים הורמונים החל בניסויים בבעלי חיים שלמים (ולעתים קרובות קדמו להם תצפיות על אנשים חולים). חומרים אלו נקראו חומר "X" או פקטור "?". ההנחות של "קוך" לאנדוקרינולוגיה סיפקו את סדר העבודה הבא:
1. הסרת הבלוטה לכאורה.לאחר הסרת כל בלוטה אנדוקרינית, נוצר קומפלקס של הפרעות עקב אובדן ההשפעות הרגולטוריות של אותם הורמונים המיוצרים בבלוטה זו. בשל פולשניות הניתוח, במקום הסרה כירורגית של הבלוטה האנדוקרינית, ניתן להשתמש בהחדרה של כימיקלים המשבשים את תפקודם ההורמונלי. לדוגמה, מתן אלוקסן לבעלי חיים משבש את תפקודם של תאי β של הלבלב, מה שמוביל להתפתחות סוכרת, שביטוייה כמעט זהים להפרעות שנצפו לאחר הוצאת הלבלב. אחד
2. תיאור ההשפעות הביולוגיות של הפעולה.לדוגמה, ההנחה שללבלב יש פונקציות אנדוקריניות אוששה בניסויים של I. Mering and O. Minkowski (1889), שהראו כי הסרתו ב-כלבים מוביל להיפרגליקמיה חמורה וגלוקוזוריה; בעלי חיים מתו תוך 2-3 שבועות. לאחר ניתוח על רקע תסמינים של סוכרת חמורה. לאחר מכן, נמצא כי שינויים אלו מתרחשים עקב מחסור באינסולין, הורמון המיוצר במנגנון האי של הלבלב.
3. הכנסת תמצית בלוטות.
4. עדות לכך שמתן התמצית מבטל את הסימפטומים של היעדר הבלוטה.
5. בידוד, טיהור וזיהוי העיקרון הפעיל.
במהלך מלחמת העולם השנייה, נצברו כמות גדולה של נתונים בתחום האנדוקרינולוגיה, שרבים מהם היו בעלי חשיבות בסיסית להתפתחות המדע לאחר מכן. לאחר המלחמה, בקשר עם הופעתן של שיטות חדשות רבות, חלה האצה חסרת תקדים בקצב המחקר. וכעת, כתוצאה מזרם חד של כוחות טכניים ויצירתיים, מספר הפרסומים, הן באנדוקרינולוגיה והן בכל שאר ההיבטים של הידע הביו-רפואי, גדל בקצב מרשים. משמעות הדבר היא זרימה מתמדת של נתונים חדשים, אשר דורשת עדכון תקופתי של רעיונות ישנים לאורם. 2
המאה ה-20 הייתה בסימן לידתו של מדע ההורמונים, או האנדוקרינולוגיה. המילה "הורמון" עצמה הוצגה בשנת 1905 על ידי הפיזיאולוג הבריטי, פרופסור ארנסט סטרלינג בהרצאה בקולג' המלכותי לרופאים בלונדון. הוא נוצר על ידי שני פרופסורים באוניברסיטת קיימברידג' מהמילה היוונית הורמאו, שפירושה "להתחיל במהירות", "להרים" או "להתרגש". זרזיר השתמש בו כדי לתאר את "הנשאים הכימיים" המשתחררים לדם על ידי הבלוטות האנדוקריניות, או בלוטות אנדוקריניות (אנדון - פנימי + קרינו - לייצור), למשל, האשכים, בלוטות יותרת הכליה ובלוטת התריס, כמו גם מבלוטות חיצוניות. , בלוטות אקסוקריניות (אקסו - חיצוניות) כגון בלוטות הרוק והדמעות. המדע החדש הזה התפתח במהירות רבה, מרגש את מוחותיהם לא רק של רופאים, אלא גם של החברה.
ככלל, ההיסטוריה של המחקר של כל הורמון עובר ארבעה שלבים.
ראשית, ישנה השפעה שסוד המופרש מהבלוטה מייצר על הגוף.
שנית, מפתחים שיטות לקביעת ההפרשה הפנימית ומידת השפעתה על הגוף. ראשית, הדבר נעשה באמצעות בדיקות ביולוגיות לקביעת השפעת ההורמון על אורגניזם שבו הוא חסר. מאוחר יותר נקבעות שיטות כימיות למדידה כזו.
שלישית, ההורמון מבודד מהבלוטה ומבודד.
ולבסוף, רביעית, המבנה שלו נקבע על ידי כימאים, והוא מסונתז. 3
כיום, לחוקרים שמתחילים בתצפיות ברמת האורגניזם כולו יש יותר ויותר שאלות ככל שהעבודה שלהם מתקדמת עד שהם מנסים לפתור את הבעיה המקורית ברמה המולקולרית. כאן משתלטים על המחקר האנדוקרינולוגי הכימיה הביולוגית והענף שלה, ביולוגיה מולקולרית (אנדוקרינולוגיה).
ברגע שמופיעות שיטות חדשות מורפולוגיות, כימיות, אלקטרופיזיולוגיות, אימונולוגיות ואחרות, הן מוצאות יישום מהיר מאוד באנדוקרינולוגיה. לדוגמה, בשנות ה-30 וה-40, נעשה שימוש בשיטות מורכבות מאוד לחקר סטרואידים. זה הוביל להתקדמות גדולה בהבנת המבנה והביוסינתזה של הורמונים סטרואידים. האפשרות להשתמש באיזוטופים רדיואקטיביים, שהופיעו בסוף שנות ה-40 וה-50, הרחיבה את הידע שלנו על היבטים רבים של מחזור היוד, מטבוליזם ביניים, הובלת יונים וכו'. לחקור את הפעילות התפקודית של הבלוטה האנדוקרינית, את יכולתה ללכוד מתוך הדם ולצבור תרכובת מסוימת. ידוע, למשל, שבלוטת התריס סופגת באופן פעיל יוד, המשמש לאחר מכן לסינתזה של תירוקסין וטריודוטירונין. עם תפקוד יתר של בלוטת התריס, הצטברות של יוד עולה, עם תת-פונקציה, ההשפעה ההפוכה נצפית. ניתן לקבוע את עוצמת הצטברות היוד על ידי החדרת האיזוטופ הרדיואקטיבי 131I לגוף, ולאחר מכן הערכה של הרדיואקטיביות של בלוטת התריס. ניתן להכניס גם תרכובות המשמשות לסינתזה של הורמונים אנדוגניים ונכללות במבנה שלהן כתווית רדיואקטיבית. בהמשך, ניתן לקבוע את הרדיואקטיביות של איברים ורקמות שונות וכך להעריך את התפלגות ההורמון בגוף, וכן למצוא את איברי המטרה שלו.
מאוחר יותר, נעשה שימוש יצירתי בשילוב של אלקטרופורזה של ג'ל פוליאקרילאמיד עם אוטורדיוגרפיה כדי לחקור חלבונים רבים, כולל קולטני הורמונים. בד בבד עם ההתקדמות המרשימה בכימיה, השימוש בשיטות היסטוכימיות, אימונוהיסטוכימיות ומיקרוסקופיות אלקטרונים התברר כמורה אף יותר.
כל גרסאות הכרומטוגרפיה - עמודה, שכבה דקה, נייר, רב-ממדית, גז-נוזל (עם או בלי ספקטרומטריית מסה), נוזל בעל ביצועים גבוהים - שימשו אנדוקרינולוגים מיד לאחר הופעתם. הם אפשרו לקבל מידע חשוב לא רק על רצף חומצות האמינו של פפטידים וחלבונים, אלא גם על שומנים (בעיקר פרוסטגלנדינים וחומרים נלווים), פחמימות ואמינים.
עם התפתחותן של שיטות מחקר ביולוגיות מולקולריות, אנדוקרינולוגים מיישמים אותן במהירות כדי לחקור את מנגנוני הפעולה של הורמונים. נכון לעכשיו, שיטת ה-DNA הרקומביננטי משמשת לא רק למטרה זו, אלא גם לייצור הורמוני חלבון. אכן, קשה לנקוב בשיטה ביוכימית או פיזיולוגית שלא יאומץ על ידי אנדוקרינולוגים. ארבע
1.2. סקירה כללית של שיטות מודרניות לחקר המערכת האנדוקרינית
בעת בחינת חולים עם חשד לפתולוגיה אנדוקרינית, בנוסף לאיסוף אנמנזה של המחלה, בדיקה והתלוננות של החולה, נעשה שימוש בשיטות האבחון הבאות: שיטות מעבדה כלליות (קליניות וביוכימיות), מחקר הורמונלי, שיטות אינסטרומנטליות, שיטות גנטיות מולקולריות.
ברוב המקרים מחקר הורמונליאין מפתח, אלא ערך אימות לאבחון. לאבחון של מספר מחלות אנדוקריניות, לא נעשה שימוש כלל במחקר הורמונלי (סוכרת אינסיפידוס וסוכרת); במקרים מסוימים, מחקר הורמונלי הוא בעל ערך אבחנתי רק בשילוב עם פרמטרים ביוכימיים (רמת סידן בהיפרתירואידיזם).
מחקר הורמונלי יכול לגלות ירידה בייצור הורמון מסוים, עלייה ורמתו התקינה (טבלה 1). השיטות הנפוצות ביותר לקביעת הורמונים בפרקטיקה הקלינית הן שינויים שונים. שיטה רדיואימונית
. שיטות אלו מבוססות על העובדה שההורמון המסומן בתווית רדיואקטיבית וההורמון הכלול בחומר הבדיקה מתחרים זה בזה על הקישור לנוגדנים ספציפיים: ככל שהורמון זה כלול יותר בחומר הביולוגי, כך מולקולות ההורמון המסומנות פחות נקשרים, שכן מספר אתרי הקישור ההורמונים בדגימה באופן קבוע. לפני יותר מ-20 שנה הציעו ברסון ויאלו שיטת בדיקת רדיואימונית לקביעת אינסולין.
שיטה זו התבססה על תצפיתם כי בדם ההיקפי של חולי סוכרת המטופלים באינסולין, קיים חלבון (מאוחר יותר הוכח שהוא גלובולין) הקושר אינסולין מסומן 131I. המשמעות של ממצאים אלה והפיתוח שלאחר מכן של בדיקת רדיואימונית לזיהוי אינסולין מודגשת על ידי הענקת פרס נובל לילו וברסון.
זמן קצר לאחר הדיווחים הראשונים של חוקרים אלה, מעבדות אחרות פיתחו ותיארו שיטות מתאימות לקביעת הורמונים אחרים. שיטות אלו משתמשות בנוגדנים או בחלבוני סרום הקושרים הורמון או ליגנד ספציפיים ונושאים מתהורמון רדיואקטיבי המתחרה עם ההורמון הסטנדרטי או ההורמון הקיים בדגימה הביולוגית.
עִקָרוֹן שיטת קולטני רדיו
זהה בעצם לבדיקת רדיואימוניה, רק ההורמון, במקום להיקשר לנוגדנים, נקשר לקולטן הורמון ספציפי על קרום הפלזמה או הציטוזול. קולטנים ספציפיים לרוב ההורמונים הפוליפפטידיים ממוקמים על פני השטח החיצוניים של קרום הפלזמה של התאים, בעוד שקולטנים לסטרואידים פעילים ביולוגית, כמו גם תירוקסין וטריודוטירונין, ממוקמים בציטוזול ובגרעינים. הרגישות של בדיקת קולטני רדיו נמוכה מזו של בדיקת רדיואימונית ורוב השיטות הביולוגיות במערכות במבחנה. על מנת ליצור אינטראקציה עם הקולטן שלו, ההורמון חייב להיות בעל מבנה מתאים, כלומר להיות פעיל ביולוגית. יתכן מצב בו ההורמון מאבד את יכולתו להיקשר לקולטן שלו, אך ממשיך לקיים אינטראקציה עם נוגדנים במערכת לצורך בדיקת רדיואימונית. אי התאמה זו משקפת את העובדה שנוגדנים וקולטנים "מזהים" חלקים שונים של מולקולת ההורמון.
הוצעו מספר שיטות קולטני רדיו לניתוח הורמונלי. בדרך כלל מתקבלת רקמה של איבר ספציפי להורמון נתון ומבודדים ממנה קולטנים בטכניקות סטנדרטיות. קולטני ממברנת הפלזמה המבודדים במשקעים יציבים יחסית כאשר הם מאוחסנים בטמפרטורות מתחת ל-20 מעלות צלזיוס. עם זאת, קולטנים ממוססים לפוליפפטיד והורמונים סטרואידים המבודדים ממברנות פלזמה או מהציטוזול ואינם קשורים לליגנדים מתגלים כלא יציבים, המתבטאת בירידה ביכולתם לקשור הורמונים ספציפיים, גם אם הם אוחסנו בהקפאה למשך תקופה. זמן קצר יחסית.
לאחרונה, שיטות לא רדיואקטיביות הפכו לנפוצות ביותר. כשיטה סטנדרטית לקביעת תרכובות שונות בכימיה קלינית, בדיקה חיסונית
, מאופיין ברגישות טובה, ספציפיות והיקף רחב. בפרט, בדיקת אימונו משמשת לקביעת הורמונים. שיטות אלו כוללות:
- 1) בדיקת אימונוסורבנט מקושרת אנזים (ELISA), ELISA מסוג ELISA מסוג ELISA או EMIT הומוגנית מסוג ELISA.
- 2) בדיקת חיסון פלואורסצנטי (FIA), המבוססת על מדידת הגברה, כיבוי או קיטוב של הקרינה או על חקר הקרינה ברזולוציית זמן.
- 3) בדיקת חיסונית ביולוגית או כימילומינסנטית.
1) ישים הן עבור ניתוח אימונומטרי דו-אתרי של חלבונים והן עבור מבחני תחרות ישירים של הפטנטים המבוססים על עקרון הקישור.
2) יש את הרגישות, הדיוק וטווח הפעולה המתאימים של ריכוזים שנקבעו עם פיזור מינימלי של תוצאות על כל הטווח.
3) קל לשפר על מנת להגביר עוד יותר את הרגישות ולפשט את הניתוח.
באופן פוטנציאלי, המתודולוגיה אמורה להיות ניתנת לשיפור וליישם על ניתוחים של חומרים אחרים, ניתוחים מחוץ למעבדה וללא אבחנה, ולקביעה בו-זמנית של מספר חומרים (מה שנקרא ריבוי אימונואסאי). השיטות האידיאליות של בדיקת אימונו, במידה הרבה ביותר, מתאימות לשיטות זוהר או פוטו-פליטה, שבהן זיהוי התווית מתבצע על ידי רישום פליטת אור.
זוהר היא פליטת אור על ידי חומר במצב נרגש אלקטרוני. ישנם מספר סוגים של זוהר, הנבדלים רק במקורות האנרגיה המעבירה אלקטרונים למצב נרגש, כלומר. לרמת אנרגיה גבוהה יותר, כלומר:
1) רדיו-אורגניזציה, שבו העירור של הפלואורופור המתאים מושג על ידי ספיגת האנרגיה המשתחררת בתהליך של ריקבון רדיואקטיבי בלתי הפיך. פלואורופור נרגש פולט אור וחוזר למצב היסוד שלו.
2) כימילומינסנציה, בהם עירור מושגת כתוצאה מתגובה כימית (בדרך כלל תגובת חמצון בלתי הפיכה). אם מבוצעת תגובה כימית במערכות ביולוגיות תחת פעולת אנזימים, אז בדרך כלל משתמשים במונח ביו-לומינסנציה במקרה זה. אם תגובה כימית מתחילה על ידי עלייה בטמפרטורה של המגיבים, אזי סוג זה של זוהר נקרא תרמוכימילומינסנציה, אך אם התגובה מתחילה על ידי פוטנציאל חשמלי, אז התופעה המקבילה נקראת אלקטרוכימילומינסנציה.
3) פוטוluminescence, בהם עירור נגרמת על ידי פוטונים של אור אינפרא אדום, גלוי או אולטרה סגול. ניתן לחלק עוד יותר את פוטו-לומינסצנטיות לפלורסנטיות, כאשר מולקולה נרגשת חוזרת במהירות למצבה המקורי באמצעות מצב סינגל, וזרחנית, כאשר מולקולה נרגשת חוזרת למצבה המקורי דרך מצב טריפלט. פליטת זרחן מתפוררת הרבה יותר לאט. לקוונטות האור הנפלטות יש אורך גל גדול. פוטו-לומינסנציה שונה מרדיו-ו-כימי-לומינצנציית בכך שהיא לרוב הפיכה, ולכן ניתן להשרות אותה שוב ושוב במערכת זו (שכן היווצרות של תוצר ביניים נרגש והשבתתו לאחר מכן על-ידי פליטת אור אינם מובילים לטרנספורמציות כימיות).
בנוסף לשיטות אלו, שיטות כימיות לקביעת מספר חומרים (בדרך כלל מטבוליטים של הורמונים ומבשריהם) לא איבדו לחלוטין את משמעותם. כדי לטהר שברי חלבון ולחקור הורמונים, הוא משמש לעתים קרובות כרומטוגרפיה . כרומטוגרפיית נוזלים נמצאת בשימוש נרחב כשיטה אנליטית מהירה וסלקטיבית להפרדה וזיהוי של חומרים שונים. כרומטוגרפיה נוזלית (LC) בגרסתה הקלאסית (בלחץ אטמוספרי) ובמהירות גבוהה, או HPLC בלחץ מוגבר היא השיטה האופטימלית לניתוח מולקולות לא יציבות כימית ותרמית, חומרים מולקולריים גבוהים עם נדיפות מופחתת, אשר מוסברת על ידי התפקיד המיוחד של השלב הנייד: בניגוד למפלט הגזי ב-LC מבצע לא רק פונקציה הובלה. האופי והמבנה של מרכיבי הפאזה הניידת שולטים בהתנהגות הכרומטוגרפית של החומרים להפרדה. בין האובייקטים האופייניים ביותר לכרומטוגרפיה נוזלית הם חלבונים, חומצות גרעין, חומצות אמינו, צבעים, פוליסכרידים, חומרי נפץ, תרופות, מטבוליטים של צמחים ובעלי חיים. כרומטוגרפיית נוזלים, בתורה, מחולקת לספיחת נוזלים (הפרדת תרכובות מתרחשת בשל יכולתן השונה לספוח ולספוג מפני השטח של הסופח), נוזל-נוזל או פיזור (ההפרדה מתבצעת עקב מסיסות שונה ב הפאזה הניידת - הפאזה הנפוחה והנייחת, נספג פיזית או מושתלת כימית על פני השטח של סופח מוצק), כרומטוגרפיה של חילופי יונים, כאשר ההפרדה מושגת עקב האינטראקציה ההפיכה של החומרים המייננים המנותחים עם הקבוצות היוניות של הסורבנט - מחליף יונים. מקום מיוחד בשימוש בשיטות כרומטוגרפיה נוזליות ברפואה תופס על ידי אי הכללת גודל, או כרומטוגרפיה ג'ל, וזיקה, או ביוספציפית. גרסה זו של LC מבוססת על העיקרון של הפרדת תערובת של חומרים לפי המשקל המולקולרי שלהם. בכרומטוגרפיה של אי הכללת גודל (מהדרה האנגלית - חריג; השם המיושן הוא sieve), מולקולות החומרים מופרדות לפי גודל בשל יכולתן השונה לחדור לתוך נקבוביות הסורבנט. הפאזה הניידת היא נוזל, והפאזה הנייחת היא אותו נוזל שמילא את נקבוביות הסורבנט (ג'ל). אם הנקבוביות הללו אינן זמינות למולקולות האנליט, אזי התרכובת המתאימה תעזוב את העמודה מוקדם יותר מזו עם גדלים מולקולריים קטנים יותר. מולקולות או יונים שגודלם בין קוטר נקבוביות הג'ל המרבי למינימום מחולקים לאזורים נפרדים. כרומטוגרפיה של אי-הכללת גודל זכתה להתפתחות אינטנסיבית במיוחד בשני העשורים האחרונים, אשר התאפשרה על ידי הכנסת Sephadex, ג'לי דקסטרן מקושרים עם אפיכלורוהידרין, לתרגול כימי וביוכימי. ניתן להשתמש בסוגים שונים של Sephadex לחלוקה של כימיקלים בעלי משקל מולקולרי שונה, כך שהם נמצאים בשימוש נרחב לבידוד וטיהור של ביופולימרים, פפטידים, אוליגו ופוליסכרידים, חומצות גרעין ואפילו תאים (לימפוציטים, אריתרוציטים), בייצור התעשייתי. של תכשירי חלבון שונים, בפרט אנזימים והורמונים. 5 כרומטוגרפיה זיקה מאופיינת בסלקטיביות הגבוהה ביותר הגלומה באינטראקציות ביולוגיות. לעתים קרובות, הליך כרומטוגרפי אחד יכול לטהר את החלבון הרצוי אלפי פעמים. זה מצדיק את המאמץ המושקע בהכנת חומר סופח זיקה, שזו לא תמיד משימה קלה בשל הסכנה של מולקולות ביולוגיות לאבד את יכולתן לקיים אינטראקציה ספציפית במהלך ההתקשרות הקוולנטית שלהן למטריצה. 6
כאשר חוקרים את המצב התפקודי של הבלוטות האנדוקריניות, נעשה שימוש בגישות המתודולוגיות הבאות:
1. קביעת הרמה הראשונית של הורמון מסוים.
2. קביעת רמת ההורמון בדינמיקה תוך התחשבות בקצב ההפרשה הצירקדי.
3. קביעת רמת ההורמון בתנאים של בדיקה תפקודית.
4. קביעת רמת מטבוליט ההורמון.
טבלה 1. פתוגנזה של מחלות אנדוקריניות 7
לרוב, בפרקטיקה הקלינית, נעשה שימוש בקביעת הרמה הבסיסית של הורמון מסוים. בדרך כלל דם נלקח על קיבה ריקה בבוקר, אם כי צריכת מזון אינה משפיעה על ייצור הורמונים רבים. כדי להעריך את הפעילות של בלוטות אנדוקריניות רבות (בלוטת התריס, פאראתירואיד), די בהערכה של רמת ההורמונים הבסיסית. בעת קביעת הרמה הבסיסית של ההורמון, עלולים להיווצר קשיים מסוימים עקב מחזור הדם של מספר צורות מולקולריות של אותו הורמון. קודם כל, זה נוגע להורמון פארתירואיד.
רוב ההורמונים מסתובבים בדם הקשורים לחלבונים נשאים. ככלל, רמת ההורמון הפנוי והפעיל ביולוגית בדם נמוכה בעשרות או מאות מונים מהרמה הכוללת של ההורמון.
לרמות של רוב ההורמונים יש דינמיקה יומיומית אופיינית (קצב הפרשת יממה), ולעתים קרובות הדינמיקה הזו מקבלת משמעות קלינית. החשוב והממחיש ביותר בהקשר זה הוא הדינמיקה של ייצור קורטיזול (איור 1.1). שמונה
דוגמאות נוספות בהקשר זה הן פרולקטין והורמון גדילה, שקצב הפרשתם נקבע גם על פי מחזור שינה-ערות. הפתוגנזה של מספר מחלות אנדוקריניות מבוססת על הפרה של הקצב היומי של ייצור ההורמונים.
בנוסף לקצב הצירקדי, רוב הפרמטרים הביולוגיים יכולים לבוא לידי ביטוי ברמת ההורמונים בדם. עבור הורמונים רבים, אינדיקטורים התייחסות תלויים במידה רבה בגיל (איור 1.2) 9, מין, שלב של המחזור החודשי.
רמתם של מספר הורמונים יכולה להיות מושפעת לא רק ממחלות סומטיות נלוות ומתרופות שנוטלות עבורן, אלא גם מגורמים כמו לחץ (קורטיזול, אדרנלין), מאפיינים סביבתיים (רמות תירוקסין באזורים עם צריכת יוד שונה), ההרכב. של מזון שנלקח יום קודם (C-peptide) ועוד רבים אחרים.
העיקרון הבסיסי להערכת פעילותם של תלויי יותרת המוח (בלוטת התריס, קליפת יותרת הכליה, בלוטות המין) ושל מספר בלוטות אנדוקריניות אחרות הוא קביעת מה שנקרא זוגות אבחון של הורמונים. ברוב המקרים, ייצור ההורמונים מוסדר על ידי מנגנון משוב שלילי. משוב יכול להתרחש בין הורמונים השייכים לאותה מערכת (קורטיזול ו-ACTH), או בין הורמונים לגורם הביולוגי שלו (הורמון פארתירואיד וסידן). בנוסף, בין ההורמונים המרכיבים זוג, לא בהכרח צריכה להיות אינטראקציה ישירה. לפעמים זה מתווך על ידי גורמים הומוראליים אחרים, אלקטרוליטים ופרמטרים פיזיולוגיים (זרימת דם כלייתית, רמות אשלגן ואנגיוטנסין עבור צמד הרנין-אלדוסטרון). הערכה מבודדת של האינדיקטורים המרכיבים זוג יכולה להוביל למסקנה שגויה.
למרות השיפור בשיטות הניתוח ההורמונלי, לבדיקות תפקודיות יש עדיין ערך אבחוני רב באבחון של אנדוקרינופתיה. בדיקות תפקודיות מתחלקות לגירוי ומדכא (מדכא). העיקרון הכללי של עריכת בדיקות הוא שבדיקות גירוי נקבעות אם יש חשד לאי ספיקת בלוטות אנדוקריניות, ובדיקות מדכאות נקבעות אם יש חשד לתפקוד יתר שלה.
לצד הערכת רמת ההורמונים בדם, במקרים מסוימים, לקביעת הפרשתם בשתן עשוי להיות ערך אבחנתי מסוים. הערך האבחוני של מחקרים אלו, כגון קביעת הפרשת קורטיזול חופשי, נמוך משמעותית מזה של בדיקות תפקודיות מודרניות. באופן דומה, השימוש בבדיקות הפרשת מטבוליטים של הורמונים נעלם כעת כמעט לחלוטין, כאשר היוצא מן הכלל היחיד הוא קביעת מטבוליטים של קטכולמין לאבחון של פיאוכרומוציטומה.
בשנים האחרונות נפוצו שיטות אוטומטיות לחלוטין של מחקר הורמונלי, מה שמאפשר להפחית את מספר הטעויות כמו דגימת דם שגויה, אחסון, מסירה ו"גורמים אנושיים" נוספים.
מ שיטות אינסטרומנטליותהמחקרים הנפוצים ביותר משתמשים באולטרסאונד (אולטרסאונד), רדיוגרפיה, טומוגרפיה ממוחשבת (CT) והדמיית תהודה מגנטית (MRI). בנוסף, נעשה שימוש בשיטות מיוחדות באנדוקרינולוגיה: אנגיוגרפיה עם דגימה סלקטיבית של דם הזורם מהבלוטה האנדוקרינית, בדיקת רדיואיזוטופים (סינטיגרפיה של בלוטת התריס), דנסיטומטריית עצם. השיטות האינסטרומנטליות העיקריות המשמשות לחקר הבלוטות האנדוקריניות מוצגות בטבלה 2.
שיטות מחקר גנטי מולקולרי.
ההתפתחות המהירה של המדע בעשורים האחרונים והמחקר בתחום הביולוגיה המולקולרית, הגנטיקה הרפואית, הביוכימיה, הביופיזיקה, השזורים זה בזה עם מיקרוביולוגיה, אימונולוגיה, אונקולוגיה, אפידמיולוגיה וכו', הובילו ליצירה והחדרה פעילה הלכה למעשה. של מעבדות אבחון לשיטות ביולוגיות מולקולריות לחקר הגנום האנושי, בעלי חיים, צמחים, חיידקים ווירוסים. שיטות אלו מכונות לרוב כמחקרי DNA.
שיטות מחקר DNA מאפשרות אבחון מוקדם ומלא יותר של מחלות שונות, אבחנה מבדלת בזמן ומעקב אחר יעילות הטיפול. הפיתוח הפעיל של שיטות אבחון DNA והכנסתן הלכה למעשה מצביעים על כך שהרגע שבו שיטות אלו יצמצמו משמעותית את מגוון המשימות של מחקרי אבחון מסורתיים יותר, כמו ציטוגנטיקה, ואף עלולות לעקור אותן מהרפואה המעשית אל תוך הרפואה המעשית. תחום מדעי.
טבלה 2. שיטות אינסטרומנטליות עיקריות
מחקרים על בלוטות אנדוקריניות 10
נכון לעכשיו, ישנם שני כיוונים של אבחון DNA: ניתוח הכלאה של חומצות גרעין ואבחון באמצעות תגובת שרשרת פולימראז.
PCR הופעל מיד, מה שאיפשר להעלות את האבחון הרפואי לרמה חדשה מבחינה איכותית. השיטה הפכה לפופולרית עד כדי כך שכיום קשה לדמיין עבודה בתחום הביולוגיה המולקולרית ללא שימוש בה. שיטת PCR זכתה להתפתחות מהירה במיוחד הודות לתכנית הבינלאומית "הגנום האנושי". נוצרו טכנולוגיות רצף מודרניות (פענוח רצפי נוקלאוטידים של DNA). אם בעבר האחרון לקח שבוע לפענח DNA של 250 זוגות בסיסים (bp), רצפי רצף אוטומטיים מודרניים יכולים לקבוע עד 5000 bp. ליום. זה, בתורו, תורם לצמיחה משמעותית של מסדי נתונים המכילים מידע על רצפי נוקלאוטידים ב-DNA. נכון להיום, הוצעו שינויים שונים של PCR, תוארו עשרות יישומים שונים של השיטה, כולל "PCR ארוך", המאפשר העתקה של רצפי DNA ארוכים במיוחד. על גילוי ה-PCR, זכה K.V. Mullis בפרס נובל בכימיה בשנת 1993.
ניתן לחלק את כל הגישות לאבחון גנים למספר קבוצות עיקריות:
1. שיטות לזיהוי מקטעי DNA מסוימים.
2. שיטות לקביעת רצף הנוקלאוטידים הראשוני ב-DNA.
3. שיטות לקביעת תכולת ה-DNA וניתוח מחזור התא. אחד עשר
PCR מאפשר למצוא בחומר הבדיקה קטע קטן של מידע גנטי הכלול ברצף ספציפי של נוקלאוטידים DNA של כל אורגניזם בין מספר עצום של קטעי DNA אחרים ולהכפיל אותו פעמים רבות. PCR הוא אנלוג "במבחנה" של התגובה הביוכימית של סינתזת DNA בתא.
PCR הוא תהליך מחזורי, שבכל מחזור שלו מתרחש דנטורציה תרמית של הגדיל הכפול של ה-DNA היעד, ולאחריו הוספת פריימרים של אוליגונוקלאוטידים קצרים והארכתם באמצעות DNA פולימראז על ידי הוספת נוקלאוטידים. כתוצאה מכך, מצטבר מספר רב של עותקים של ה-DNA המקורי של המטרה, הניתנים לזיהוי בקלות.
גילוי ה-PCR הביא לשימוש מעשי מיידי בשיטה. בשנת 1985 פורסם מאמר שתיאר מערכת בדיקות לאבחון אנמיה חרמשית המבוססת על PCR. מאז 1986, יותר מ-10,000 פרסומים מדעיים הוקדשו ל-PCR. הסיכויים לשימוש ב-PCR נראים יותר ממרשימים. 12
שיטות מחקר ציטוכימיות.
שיטות אלה הן וריאנטים של מבחני ביולוגי במבחנה שתוארו. הם בדרך כלל רגישים יותר משיטות בדיקת רדיואימוניות, אך הן הרבה יותר מסורבלות ויקר לכל קביעה. תוצאות מחקרים ביולוגיים ציטוכימיים מכומתות על חתכים היסטולוגיים באמצעות מכשיר מיוחד - מיקרודנסיומטר.
קטעים היסטולוגיים מוכנים מרקמות מטרה או תאים ספציפיים להורמון נתון, שנחשפו בעבר לריכוזים שונים של ההורמון הסטנדרטי והנבדק. באמצעות דנסימטר, אזור בקוטר של 250 - 300 ננומטר נסרק כדי לכמת את תגובת הצבע הנגרמת משינוי במצב החיזור של האובייקט בהשפעת גירוי הורמונלי. לניתוח כמותי, משתמשים בצבעים היסטולוגיים הרגישים לשינויים אלה.
מערכת הבדיקה הביולוגית הציטוכימית הראשונה פותחה עבור ACTH, וקליפת האדרנל שימשה כרקמת המטרה במערכת זו. שיטות אחרות לקביעה ביולוגית של ACTH אינן רגישות מדי או דורשות נפחי פלזמה גדולים. לפיכך, הקביעה הציטוכימית של מצב החיזור של הרקמה היא כלי רב ערך לניתוח התפקוד התקין והמשתנה של מערכת ההיפותלמוס-יותרת המוח-אדרנל במונחים של רמות ACTH.
פותחה שיטה ציטוכימית לקביעת LH, אך נתקלו בקשיים משמעותיים עקב תנודות משמעותיות בתוצאות של קביעות שונות והרגישות המשתנה של האובייקט, אשר משקפת אולי פערים ביולוגיים ידועים בבעלי חיים שונים. שיטות ציטוכימיות ספציפיות רגישות הוצעו לקביעת הורמון פארתירואיד, ADH ותירוטרופין.
עם סיבוך נוסף של הציוד, אשר יגדיל את מספר המחקרים בהגדרה אחת, ניתן להשתמש בשיטה זו באופן נרחב יותר. הוא אטרקטיבי במיוחד מכיוון שאינו מצריך שימוש בתרכובות רדיואקטיביות. שיטות ציטוכימיות אינן בשימוש נרחב במרפאה והן משמשות בעיקר כשיטה רגישה במחקר מדעי. 13
1.3. שיטות מודרניות לחקר המערכת האנדוקרינית על הדוגמה של המחקר של בלוטת התריס
בעבודתי, מוגבלת בהיקפה, שיטות מודרניות לחקר המערכת האנדוקרינית במצבים נורמליים ופתולוגיים, אשקול את הדוגמה של חקר הבלוטה האנדוקרינית, הרלוונטית בשל השכיחות הגבוהה של מחלות בלוטת התריס ברפובליקה של בשקורטוסטן. .
1. בדיקת אולטרסאונד.
אולטרסאונד מאפשר לאמת נתונים סובייקטיביים למדי של מישוש. אופטימליים למחקר הם חיישנים עם תדר של 7.5 מגה-הרץ ו-10 מגה-הרץ. נכון לעכשיו, הדמיית דופלר צבעונית משמשת כדי להמחיש כלי דם קטנים בבלוטת התריס ולספק מידע על הכיוון ומהירות הזרימה הממוצעת. יכולות השיטה תלויות בניסיון ובכישוריו של המומחה העורך את המחקר. עיקרון השיטה הוא שאולטרסאונד, הנשלח בפולסים תכופים, חודר לאיברים אנושיים, משתקף בממשק בין מדיה עם התנגדות קולית שונה, נתפס על ידי המכשיר ומשוחזר על המסך ועל נייר אולטרה סגול. השיטה אינה מזיקה ואין לה התוויות נגד (איור 1.3).
איור.1.3. אולטרסאונד של בלוטת התריס.
כעת, נעשה שימוש נרחב גם באולטרסאונד מורכב מיפוי דופלר צבעוני (CDC), (איור 1.4). 14
אורז. 1.4. AIT עם נודולציה של בלוטת התריס במצב CDI.
2. ביופסיית ניקור מחט עדינה של בלוטת התריס.
ביופסיית ניקור מחט עדינה של בלוטת התריס היא השיטה הטרום-ניתוחית היחידה להערכה ישירה של שינויים מבניים ולקביעת פרמטרים ציטולוגיים של תצורות בבלוטת התריס. היעילות של השגת חומר ציטולוגי הולם עם ביופסיית ניקור מחט עדינה גדלה באופן משמעותי אם הליך האבחון המצוין מתבצע תחת בקרת אולטרסאונד, המאפשר לזהות את האזורים המשתנים ביותר בבלוטת התריס, כמו גם לבחור את כיוון ועומק ניקוב מיטביים. חֲמֵשׁ עֶשׂרֵה
3. בדיקה ציטולוגית.
אבחון ציטולוגי של תצורות בבלוטת התריס מבוסס על שילוב של מאפיינים מסוימים, כגון כמות החומר המתקבלת, הרכבו התאי, תכונות מורפולוגיות של תאים וקבוצות המבנה שלהם, איכות המריחה וכו'.
4. מחקר רדיואיזוטופים (סריקה), סינטיגרפיה.
סריקת רדיואיזוטופים (סריקה) היא שיטה לקבלת תמונה דו-ממדית המשקפת את התפלגות התרופה הרדיו-פרמצבטית באיברים שונים באמצעות מכשיר סורק.
איור.1.6. התוצאה של סריקת רדיואיזוטופים
בלוטת התריס
הסריקה מאפשרת לקבוע את גודל בלוטת התריס, עוצמת ההצטברות בה ובחלקים הבודדים שלה של יוד רדיואקטיבי, מה שמאפשר להעריך את המצב התפקודי של כל הבלוטה ושל תצורות מוקד (איור 1.6).
סינטיגרפיה- שיטת הדמיה תפקודית, המורכבת מהחדרה לגוףאיזוטופ רדיואקטיביוקבלת תמונה על ידי קביעת הנפלטים על ידםקְרִינָה . החולה מוזרקמחוון רדיו - תכשיר המורכב ממולקולה וקטורית וסמן רדיואקטיבי. המולקולה הווקטורית נספגת במבנה גוף מסוים (איבר, נוזל). התווית הרדיואקטיבית משמשת כ"משדר": היא פולטת קרני גמא, המתועדות במצלמת גמא. כמות הרדיו-פרמצבטיקה הניתנת היא כזו שהקרינה הנפלטת ממנו נקלטת בקלות, אך אין לה השפעה רעילה על הגוף.
עבור סינטיגרפיה של בלוטת התריס, האיזוטופ הנפוץ ביותר של טכנציום הוא 99m Tc-pertechnetate. השימוש ביוד 131 מוגבל לזיהוי גרורות מתפקדות בסרטן בלוטת התריס. לאבחון של זפק retrosternal וחריגה, כמו גם במקרים מסוימים עם תת פעילות בלוטת התריס (אתירוזה, דיסטופיה, פגם בארגון), 123 יוד משמש. 16
5. קביעת רמת ה-TSH והורמוני בלוטת התריס.
מחקר של רמת ה-TSH והורמוני בלוטת התריס (תירוקסין חופשי וטריאודוטירונין) מיועד לכל מי שיש לו חשד לפתולוגיה של בלוטת התריס. נכון להיום, כדאי יותר לבצע מחקר של חלקים חופשיים של הורמוני בלוטת התריס בשילוב עם קביעת רמת ה-TSH.
6. קביעת רמת התירוגלובולין בדם.
תכולה מוגברת של תירוגלובולין בדם אופיינית למחלות רבות של בלוטת התריס, היא מתגלה גם תוך 2-3 שבועות לאחר ביופסיית ניקור, וגם תוך 1-2 חודשים לאחר ניתוח בבלוטת התריס.
7. קביעת רמת הקלציטונין בדם.
בחולים עם היסטוריה משפחתית עמוסה של סרטן בלוטת התריס המדולרי (תסמונת של ניאופלזיה אנדוקרינית מרובה מהסוג השני והשלישי), חובה לקבוע את רמת הקלציטונין בדם. בכל שאר המקרים, קביעת קלציטונין אינה מסומנת.
התכולה התקינה של קלציטונין בדם אינה עולה על 10 pg/ml. רמת הסמן הזה היא יותר מ-200 pg/ml, שהוא הקריטריון האבחוני החשוב ביותר לסרטן מדולרי בלוטת התריס.
8. בדיקת תפקוד בלוטת התריס.
בדיקות תפקוד בלוטת התריס הן בדיקות דם המשמשות כדי להעריך עד כמה בלוטת התריס פועלת. בדיקות אלו כוללות הורמון מגרה בלוטת התריס (TSH), תירוקסין (T4), טרייודותירונין (T3), גלובולין קושר תירוקסין (TBG), זפת טריודוטירונין (T3RU) ובדיקת ממריץ בלוטת התריס לטווח ארוך (LATS).
בדיקות תפקוד בלוטת התריס משמשות ל:
- עזרה באבחון תת פעילות של בלוטת התריס (היפותירואידיזם), ופעילות יתר של בלוטת התריס (היפרתירואידיזם)
הערכת פעילות בלוטת התריס
ניטור תגובה לטיפול בבלוטת התריס
TSH "אומר" לבלוטת התריס להפריש את ההורמונים תירוקסין (T4) וטריודוטירונין (T3). לפני השימוש בבדיקות TSH, נעשה שימוש בבדיקות דם סטנדרטיות למדידת רמות T4 ו-T3 כדי לקבוע אם בלוטת התריס פועלת כראוי. בדיקת Triiodothyronine (T3) מודדת את כמות ההורמון הזה בדם. T3 קיים בדרך כלל בכמויות קטנות מאוד אך יש לו השפעה משמעותית על חילוף החומרים. זהו מרכיב פעיל של הורמוני בלוטת התריס.
בדיקת גלובולין קושר תירוקסין (TSG).בודק את רמות החומר הזה בדם, המיוצרות בכבד. GTD נקשר ל-T3 ו-T4, מונע מהורמונים להישטף מהדם על ידי הכליות, ומשחרר אותם מתי והיכן שהם נחוצים כדי לווסת את תפקודי הגוף.
מבחן ספיגת שרף טרייודותירונין (T3RU)מודד רמות T4 בדם. ניתוח המעבדה של בדיקה זו נמשך מספר ימים, והיא משמשת פחות מבדיקות שתוצאותיהן זמינות מהר יותר.
בדיקת ממריץ בלוטת התריס לטווח ארוך (LATS)מציין אם הדם מכיל ממריץ לבלוטת התריס ארוכת טווח. אם קיים בדם אינו תקין, LATS גורם לבלוטת התריס לייצר ולשחרר כמויות גדולות באופן חריג של הורמונים.
9. הדמיית תהודה מגנטית ממוחשבת, טומוגרפיה אופטית שידור.
CT ו-MRI הן שיטות אינפורמטיביות מאוד, לא פולשניות, שבאמצעותן מדמיינים את בלוטת התריס. עם זאת, מחקרים אלו מבוצעים כיום באופן די נדיר בשל העלות הגבוהה וחוסר הנגישות של הציוד הרלוונטי. יחד עם הערכת הלוקליזציה של בלוטת התריס, קווי המתאר שלה, צורתה, גודלה, המבנה, הקשר עם הרקמות הסמוכות, הגודל והמבנה של בלוטות הלימפה האזוריות, CT מאפשר לך לקבוע את הצפיפות הדנסיטומטרית של תצורות בבלוטת התריס. גם CT וגם MRI הן שיטות הבחירה באבחון של זפק רטרוסטרנלי. טומוגרפיה ממוחשבת (CT) היא שיטת בדיקת רנטגן המבוססת על ספיגה לא שווה של קרינת רנטגן על ידי רקמות שונות בגוף, המשמשת בעיקר לאבחון פתולוגיה של בלוטת התריס, אזור הבטן (כבד, כיס מרה, לבלב, כליות, בלוטות יותרת הכליה וכו')
טומוגרפיה ממוחשבת מאפשרת לך לקבל מידע על התצורה, הגודל, המיקום והשכיחות של כל תצורה, שכן שיטה זו מבדילה רקמות קשות ורכות לפי צפיפות.
הדמיית תהודה מגנטית (MRI) היא שיטת אבחון אינסטרומנטלית המשמשת באנדוקרינולוגיה להערכת מצב מערכת ההיפותלמוס-יותרת המוח-אדרנל, השלד, איברי הבטן והאגן הקטן.
MRI מספק מידע על תצורת העצמות, הגודל, המיקום והשכיחות של כל היווצרות, שכן שיטה זו מבדילה רקמות קשות ורכות לפי צפיפות.
MRI, בשנים האחרונות, מקבל חשיבות רבה יותר באבחון הפתולוגיה של אזור ההיפותלמוס-יותרת המוח והוא הופך לשיטת הבחירה בעת בחינת חולים עם חשד לנגעים באזור מסוים זה (איור 1.7).
איור.1.7. הכנה לבדיקת MRI.
במהלך הדמיית תהודה מגנטית, שולחן נע עם מטופל נע ב"מנהרה" היוצרת שדה אלקטרומגנטי אשר בתורו יוצר קרינה המאפשרת לקבל תמונה תלת מימדית של המבנה הפנימי של הגוף.
מחלות שאובחנו על ידי MRI:
- ? גידולי יותרת המוח (למשל.פרולקטינומה
, מחלת Itsenko-Cushing)
- ? תצורות של יותרת הכליה (למשל, תסמונת קושינג, אלדוסטרומה, פיאוכרומוציטומה)
- ? אוסטאופורוזיס
- ? וכו.
- ? מאפשר לך לקבל פרוסות בעובי של 2-3 מ"מ בכל מישור
- ? היכולת לשפוט לפי אופי האות לא רק את נוכחות החינוך, אלא גם את המבנה הפנימי שלו (שטפי דם, ציסטות וכו')
- ? ללא חשיפה של המטופל לקרינה מייננת וחוסר מזיק כמעט מוחלט, דבר שחשוב בעת בדיקת ילדים, וכן, במידת הצורך, מחקרים חוזרים ונשנים מרובים.
אורז. 1.8. מערכת CTLM היא אחת הטומוגרפיות האופטיות הטוריות הראשונות בעולם.
10. מחקר אימונוהיסטוכימי של רקמת גידול בלוטת התריס.
הם מבוצעים ברקמת גידולי בלוטת התריס המתקבלים כתוצאה מניתוח. המטרה העיקרית של מחקר זה היא פרוגנוסטית. ברקמת בלוטת התריס נקבעת נוכחותם של חומרים כגון p53 (מדכא גידול גידול), CD44, Met (פרוטאוגליקנים האחראים לגרורות), PTC, ראס-אונקוגנים (אונקוגנים המווסתים את התקדמות הגידול) ואחרים. החשוב ביותר בפרקטיקה הקלינית הוא זיהוי של אימונראקטיביות p53, Metו-RTS ברקמת סרטן בלוטת התריס. הימצאות סמנים אלו ברקמת הגידול היא סימן להתפתחות מהירה (בתוך 2-5 חודשים) של מחלה גרורתית בחולה המנותח. המחקר יקר ודורש ציוד מעבדה מיוחד. כיום, קביעת סמני הגידול מתבצעת בעיקר במרפאות אונקולוגיות מיוחדות עבור התוויות מסוימות, כלומר, אם למטופל יש סימנים פרוגנוסטיים אחרים של הישנות הגידול או התפתחות של מחלה גרורתית (סרטן בלוטת התריס המובחן בצורה גרועה, גיל החולה הוא מעל 55 שנים , פלישה לרקמות הסובבות על ידי הגידול וכו'). שמונה עשרה
11. שיטות אימונולוגיות.
שיטות אימונולוגיות כוללות בעיקר אנזים immunoassay (ELISA). ELISA היא שיטה לזיהוי אנטיגנים או נוגדנים, המבוססת על קביעת קומפלקס אנטיגן-נוגדנים עקב:
- קיבוע ראשוני של האנטיגן או הנוגדן על המצע;
הוספת דגימת בדיקה וקשירת האנטיגן או הנוגדן הקבועים לאנטיגן המטרה או נוגדן המטרה;
הוספה לאחר מכן של אנטיגן או נוגדן המסומן בתווית אנזימטית עם זיהויו באמצעות מצע מתאים המשנה את צבעו בפעולת האנזים. שינוי בצבע תערובת התגובה מעיד על נוכחות של מולקולת מטרה בדגימה. קביעת תוצרי התגובות האנזימטיות בחקר דגימות הבדיקה מתבצעת בהשוואה לדגימות הביקורת.
חקירת רמות נוגדנים נגד בלוטת התריס - שיטה אימונוכימילומינסצנטית. נחקרה השכיחות של נוגדנים לאנטיגנים של רקמת בלוטת התריס: תירוגלובולין, פרוקסידאז של בלוטת התריס וקולטן TSH בחולים עם זפק רעיל מפושט ואופטלמופתיה אנדוקרינית. בדיקה של חולים כאלה מראה רמה גבוהה של נוגדנים לקולטן TSH, אשר פוחתת במהלך טיפול בלוטת התריס. 20 הוכח כי קביעת נוגדנים לקולטן TSH ותירוגלובולין צריכה לשמש קריטריון אבחוני נוסף במהלך הבדיקה. 21
שיטות לקביעת נוגדנים לקולטן TSH:
1. הגדרה של TBII
1.1. שיטת קולטני רדיו
1.1.1. שימוש ב-rTTG חזירי (TRAK)
1.1.2. שימוש ב-rTSH אנושי המובע על ידי תאי CHO (CHO-R)
1.1.3. שימוש ב-rTTH המובע על ידי תאי לוקמיה (K562)
1.2. FACS
1.3. משקעים אימוניים
2. שיטות ביולוגיות לאיתור נוגדנים ממריצים (TSAB) וחוסמים (TBAb)
2.1. הערכה של ייצור cAMP (נקבע על ידי RIA)
2.1.1. בתאי FRTL-5
וכו.................