בידוד וירוסים בעוברי עוף. גידול נגיפים בעוברי עוף מתפתחים מבנה עובר עוף

עובר עוף עובר עוף

(CE) - עובר עוף בשלבי התפתחות עובריים שונים. במיקרוביול. תרגול משמש לבידוד, טיפוח וזיהוי של וירוסים, ריקטסיה ולפעמים חיידקים. למטרות מעבדה, נבחרים קונכיות EC טריות, מופרות, עם קונכיות EC שקופות היטב וללא סדקים. הדגירה מתבצעת בקנים של חצובה כשהקצה הקהה של הביצה למעלה באינקובטורים או תרמוסטטים מאווררים היטב בטמפרטורה של 37-37.5 מעלות צלזיוס, לחות יחסית 63-65%. לזיהום נבחרים עוברים בני 4-13 ימים עם כלי דם בולטים, שק חלמון וצל נע. לפני ההדבקה, קליפות הביצים מטופלות באלכוהול, נשרפות, ובאזור ההזרקה (לעיתים קרובות מעל תא האוויר) מורחים אותן בתמיסת יוד 2%. חומר או מחקר. to-ru מוכנס, פותח או לא פותח את הקליפה, לתוך שק החלמון (ריקטסיה), לתוך חללי האלנטואי או השפיר (רוב הנגיפים), מוחל על הקרום הכוריון-אלנטואי. פחות שכיח, טו-רו מוזרק לגוף העובר או לווריד. ECs נגועים ממוקמים בתרמוסטט בתנאים ותקופות התלויות בסוג החיידק ובמטרות המחקר. ניתן לקבל נתונים מסוימים על תוצאות הזיהום על ידי בדיקה חיצונית של EC תחת מיקרוסקופ (הזרקת כלי דם, אובדן ניידות וכו'). עם זאת, ברוב המקרים, CE נפתח. לשם כך, לאחר טיפול בתמיסת אלכוהול ויוד, חותכים את הקליפה מעל גבול שק האוויר, האלנטואי ולאחר מכן שואבים את מי השפיר בעזרת פיפטה או מזרק פסטר, תוך הימנעות מפגיעה בכלים ובחלמון. שַׁלפּוּחִית. העובר והממברנה הכוריאנלנטואית מוסרים מהקליפה, מניחים בכוסות סטריליות, שוטפים בתזקיק סטרילי. להשקות ולבדוק. המשך המחקר של העובר והנוזלים שלו תלוי בסוג החיידק או הנגיף ובמטרות הניסוי.

(מקור: מילון המונחים של מיקרוביולוגיה)

ראה מה זה "עובר עוף" במילונים אחרים:

רעילות עוברים- רעילות עוברית, היכולת של חומרים פיזיקליים, ביולוגיים, כימיים ואחרים להשפיע לרעה על העובר המתפתח. ההשפעה העוברית של חומרים שונים נקבעת על ידי חשיפה לנקבות ... ... מילון אנציקלופדי וטרינרי

"תרנגולות" מפנה לכאן; ראה גם משמעויות אחרות. ? עוף ביתי ... ויקיפדיה

תרנגולות תרנגולות הן הקישוט של כל חצר סיווג מדעי ממלכה: בעלי חיים סוג: Chordates Class ... ויקיפדיה

הכינה: המורה אוגישבע ש.ה.

שקופית 3

המבנה של וירוסים

שקופית 4

מבנה וירוסים A - וירוס פשוט B - וירוס מורכב

שקופית 5

על פי מידת הסכנה שלהם, הנגיפים מחולקים לארבע קבוצות: קבוצה I: פתוגנים של אבולה, לאסה, מרבורג, מאצ'ופו, אבעבועות שחורות, וירוס הפטיטיס B (קופים). קבוצה II: arboviruses, כמה נגיפים זירה, נגיפי כלבת, נגיפי הפטיטיס C ו-B אנושיים, HIV. קבוצה III - וירוסים של שפעת, פוליומיאליטיס, אנצפלומיוקרדיטיס, חיסון. קבוצת IV - אדנו-וירוסים, וירוסי קורונה, נגיפי הרפס, ריאו-וירוסים, אונקו-וירוסים.

שקופית 6

שקופית 7

עקרונות סיווג הנגיפים סוג חומצת הגרעין, המבנה שלה, אסטרטגיית שכפול ממדים, מורפולוגיה, סימטריה של הנגיף, מספר קפסומרים, נוכחות סופרקפסיד. נוכחות של אנזימים ספציפיים, במיוחד RNA ו-DNA פולימראזות, neuraminidase רגישות לחומרים פיזיים וכימיים, במיוחד לאתר תכונות אימונולוגיות מנגנוני העברה טבעיים טרופיזם למארח, רקמותיו ותאיו פתולוגיה, היווצרות תכלילים סימפטומטולוגיה של מחלות.

שקופית 8

סיווג וירוסים (המכילים RNA)

שקופית 9

סיווג וירוסים (המכילים DNA)

שקופית 10

ההרכב הכימי של הנגיפים הרכב הנגיפים כולל חומצת גרעין, חלבון, ליפידים, גליקוליפידים, גליקופרוטאין. הם תמיד מכילים סוג אחד של חומצת גרעין (DNA או RNA), המהווה בין 1% ל-40% מהמסה של הנגיף. גנומים ויראליים מכילים מידע מספיק לסינתזה של חלבונים מעטים בלבד. המסה שלהם מגיעה ל-10-15 מ"ג, שהם פי מיליון פחות מאשר בתאים, ואורכם הוא עד 0.093 מ"מ. מספר זוגות הנוקלאוטידים נע בין 3150 (נגיף הפטיטיס B) ל-230,000 (נגיף וריולה). חלבונים של וירוסים (70-90%) מחולקים למבני ולא מבניים. מבניים - חלבונים המהווים חלק מנגיפים תאיים בוגרים. הם מבצעים מספר תפקידים חשובים: - מגנים על חומצת הגרעין מנזק חיצוני - מקיימים אינטראקציה עם ממברנות של תאים רגישים - מבטיחים את חדירת הנגיף לתא - בעלי פעילות RNA ו-DNA פולימראז וכו' רבייה שלהם. הם: - מווסתים את הביטוי של הגנום הנגיפי - הם מבשרים של חלבונים ויראליים שיכולים לדכא ביוסינתזה תאית. בהתאם למיקום בוויריון, החלבונים מחולקים לקפסיד, סופרקפסיד, מטריקס, חלבוני ליבה וחלבונים הקשורים לחומצת גרעין. ליפידים (15-35%) כלולים בנגיפים מורכבים והם חלק מממברנת העל-קפסיד, היוצרים את שכבת השומנים הכפולה שלו. הם: - מייצבים את המעטפת הוויראלית - מגנים על השכבות הפנימיות של נגיפים מפני חומרים הידרופיליים של הסביבה החיצונית - לוקחים חלק בדה-פרוטאין של נגיפים.

שקופית 11

רבייה של וירוסים. תכונותיו נעוצות בעובדה שהגנומים מיוצגים ע"י רנ"א ודנ"א, הם מגוונים במבנה ובצורה, כמעט כל הרנ"א הנגיפי מסוגלים להשתכפל ללא תלות ב-DNA של התא. חלבוני הנגיף נשברים במרחב ובזמן: חומצות גרעין משתכפלות בגרעין התא, חלבונים בציטופלזמה ואוסף של ויריון שלמים יכול להתרחש על פני השטח הפנימיים של הממברנה הציטופלזמית. רביית וירוסים היא מערכת ייחודית ליצירה מחדש של מידע זר בתאים אוקריוטיים ומבטיחה כפיפות מוחלטת של מבנים תאיים לצרכי הווירוסים. בהתרבות של וירוסים, מבחינים במספר שלבים. ספיחת הנגיפים על פני התא, חדירתם (חדירתם) לתא והסרתם (דה-פרוטאיניזציה) שייכים למוקדמים. שלבים מאוחרים (אסטרטגיית גנום ויראלי) כוללים סינתזת חומצות גרעין נגיפיות, סינתזת חלבונים, הרכבת ויריון ושחרור חלקיקים ויראליים מהתא.

שקופית 12

התקשרות של וירוסים למשטח התא מסופקת על ידי שני מנגנונים: לא ספציפי וספציפי. לא ספציפי נקבע על ידי כוחות האינטראקציה האלקטרוסטטית המתרחשת בין קבוצות כימיות על פני השטח של וירוסים ותאים הנושאים מטענים שונים. המנגנון הספציפי (ספיחה הפוכה ולא הפיכה) נקבע מראש על ידי קולטנים ויראליים ותאיים משלימים. הם יכולים להיות בעלי אופי חלבון, פחמימה, שומנים. לדוגמה, הקולטן לנגיפי השפעת הוא חומצה סיאלית. מספר הקולטנים באתרי ספיחה יכול להגיע ל-3000. על פני השטח של וירוסים, הקולטנים ממוקמים בדרך כלל בתחתית שקעים וחריצים. חדירת נגיפים לתא מתרחשת באמצעות מנגנון אנדוציטוזיס קולטן (variant viropexis) על מקטעים מיוחדים של קרומי התא המכילים בלוק מיוחד בעל משקל מולקולרי גבוה - קלתרין. הממברנות חודרות ונוצרים ואקוולים תוך תאיים מצופים בקלאטרין. מספרם יכול להגיע ל-2000. Vacuoles, מתאחדים, יוצרים רצפטוזומים, והאחרונים מתמזגים עם ליזוזומים. חלבוני פני השטח של וירוסים מקיימים אינטראקציה עם ממברנות הליזוזומים, והנוקלאופרוטאין שלהם נכנס לציטופלזמה. עם זאת, קיים מנגנון נוסף לחדירה של וירוסים לתא - השראת היתוך ממברנה. זה מתרחש עקב חלבון היתוך ויראלי מיוחד (F- מ-fusion - fusion). כתוצאה מתהליך זה משתלבת מעטפת הליפופרוטאין הנגיפית עם קרום התא, והגנום שלה חודר לתא. חלבון כזה זוהה בשפעת, פארא-אינפלואנזה, נגיף רבדו ואחרים.

שקופית 13

ההתפשטות של ויריון היא תהליך רב-שלבי שבמהלכו משתחרר מנגנון הגרעין שלהם, קליפות הגנה נעלמות, המעכבות את ביטוי הגנום. זה מתרחש באזורים מיוחדים - ליזוזומים, מנגנון גולגי. שלבים מאוחרים של רבייה מכוונים לסינתזה של חומצות גרעין ויראליות וחלבון. מנגנון השכפול (יצירת גנומים נגיפיים שהם העתק מדויק של המבשר) תלוי במאפייני חומצת הגרעין. זה שונה עבור סוגים שונים של וירוסים. שכפול בווירוסים המכילים RNA עוקב אחר דפוסים דומים. IRNA מסונתז על RNA אימהי, וצורות ביניים של RNA משמשות כתבנית לסינתזה של הגנום הנגיפי. שעתוק הוא תהליך היווצרות של מידע (מטריקס) RNA. זה מתרחש בעזרת אנזימים מיוחדים הנקראים RNA פולימראזות תלויות DNA או RNA. לנגיפי DNA יש אנזימים אלה ממקור תאי, בעוד שלנגיפי RNA יש תעתיקים ספציפיים לווירוסים משלהם. בשלב התרגום, מידע גנטי נקרא מ-RNA שליח ומתורגם לרצף של חומצות אמינו. התהליך מתרחש בריבוזומים. מולקולות RNA נעות בריבוזומים בהתאם לרצף קוד הטריפלט, המוכר על ידי RNA העברה. האחרונים נישאים על חלקים מיוחדים של חומצות אמינו.

שקופית 14

שקופית 15

שקופית 16

גידול וירוסים עוברי עוף בני 6-12 ימים. שיטות הדבקה - פתוחות, סגורות

שקופית 17

גידול וירוסים תרביות תאים: - תרביות טריפסיניות ראשוניות של עוברי אדם, כליות קופים, פיברובלסטים של עוברי עוף וכו'; מסוגל לצמוח על פני מספר קטעים כתרבויות משניות; תאים מושתלים; הם תרביות תאים שרכשו את היכולת לגדילה ורבייה בלתי מוגבלים; הם מתקבלים מגידולים או מרקמות אנושיות או חיות רגילות שיש להן קריוטיפ שונה. HeLa (סרטן צוואר הרחם) Hep-2 (קרצינומה של הגרון האנושי), HF (קרצינומה של הפה האנושי), RD (רבדומיוסרקומה אנושית), RH (כליה עוברית אנושית), Vero (כליה של קוף ירוק), SPEV (כליה עוברית חזירית), VNK- 32 (כליה של האוגר הסורי). תרביות תאים תאים דיפלואידים; הם תרביות תאים מאותו סוג, יש להם קבוצה דיפלואידית של כרומוזומים והם מסוגלים לעמוד בפני עד 100 מעברים בתנאי מעבדה. הם מהווים מודל נוח להשגת תכשירי חיסון של וירוסים, מאחר שהם נקיים מזיהום על ידי וירוסים זרים, מאחסנים את הקריוטיפ המקורי במהלך המעברים, ואין להם פעילות אונקוגנית. לרוב, נעשה שימוש בקווי תרבית המתקבלים מפיברובלסטים עובריים אנושיים (WI-38, MRC-5, MRC-9, IMR-90), פרות, חזירים, כבשים וכדומה. תרביות תאים מאוחסנות קפואות.

שקופית 18

אמצעי תרבית המשמשים לתמיכה בתרביות תאים או בגידולם הם טבעיים או סינתטיים (מלאכותיים). מדיה טבעית - סרום דם של בקר, נוזלים מחללים סרואיים, מוצרי הידרוליזה של חלב, הידרוליזטים שונים (5% המוהידרוליזאט, 0.5% הידרוליזט לקטואלבומין) או תמציות רקמות. ההרכב הכימי שלהם עוזר ליצור תנאים דומים לאלה הקיימים בגוף האדם. חסרון משמעותי של מדיה כזו הוא האופי הלא סטנדרטי שלהם, מכיוון שההרכב האיכותי והכמותי של הרכיבים הכלולים בהרכבם יכול להשתנות. לחומרי הזנה סינתטיים אין את החיסרון הזה, מכיוון שההרכב הכימי שלהם סטנדרטי, מכיוון שהם מתקבלים על ידי שילוב של תמיסות מלח שונות (ויטמינים, חומצות אמינו) בתנאים מלאכותיים. הפתרונות הנפוצים ביותר הללו כוללים מדיום 199 (גידול של תרביות תאים טריפסיניות וניתנות להשתלה ראשוניות), מדיום איגל (מכיל סט מינימלי של חומצות אמינו וויטמינים ומשמש לטיפוח של קווי תאים דיפלואידים וניתנים להשתלה), מדיום EagleMEM (גידול של במיוחד קווי תאים תובעניים), תמיסה הנקס, המשמשת לייצור מדיית תרבית, שטיפת תאים וכו'.

שקופית 19

שקופית 20

שקופית 21

זיהום של חיות מעבדה. חיות מעבדה רבות נמצאות בשימוש נרחב בווירולוגיה לצורך בידוד וזיהוי של וירוסים, השגת סמים אנטי-ויראליים ספציפיים, חקר היבטים שונים של הפתוגנזה של מחלות ויראליות, ופיתוח דרכים להילחם במחלות ולמנוע אותן. לרוב משתמשים בעכברים לבנים בגילאים שונים (בני יומיים), חולדות לבנות, חזירי ים, ארנבות, סנאים טחונים, חולדות כותנה, קופים ואחרים.

שקופית 22

ישנן דרכים שונות להדביק בעלי חיים, בהתאם לטרופיזם של וירוסים, לתמונה הקלינית של המחלה. חומר הבדיקה יכול להינתן: - דרך הפה - לתוך דרכי הנשימה (שאיפה, דרך האף) - עורי - תוך עורי - תת עורי, תוך שרירי - תוך ורידי - תוך צפקי - תוך לבבי - על הקרנית המצולקת - לתוך החדר הקדמי של העין - לתוך המוח.

שקופית 23

שקופית 24

שקופית 25

שקופית 26

בקטריופאג'ים (פאגים) (מיוונית אחרת φᾰγω - "אני זולל") הם וירוסים שמדביקים באופן סלקטיבי תאי חיידקים. לרוב, בקטריופאג'ים מתרבים בתוך חיידקים וגורמים להתמוגגות שלהם. ככלל, בקטריופאג' מורכב ממעטפת חלבון ומהחומר הגנטי של חומצת גרעין חד-גדילית או דו-גדילית (DNA או, פחות נפוץ, RNA). גודל החלקיקים הוא בערך 20 עד 200 ננומטר. ללא תלות בפרדריק טוורט, המיקרוביולוג הצרפתי-קנדי ד'הרל פליקס דיווח על גילוי בקטריופאג'ים ב-3 בספטמבר 1917. יחד עם זה, ידוע כי המיקרוביולוג הרוסי ניקולאי פדורוביץ' גמאליה, בשנת 1898, צפה לראשונה בתופעה של תמוגה של חיידקים (אנתרקס) בהשפעת חומר מושתל. מחזור חיים לבקטריופאג'ים ממוזגים וארסיים יש אותו מחזור בשלבים הראשונים של אינטראקציה עם תא חיידקי. ספיחת בקטריופאג' על קולטני תאים ספציפיים לפאג. הזרקת חומצת גרעין פאג' לתא מארח. שכפול משותף של פאג' וחומצות גרעין חיידקיות. חלוקת תא. יתר על כן, הבקטריופאג' יכול להתפתח על פי שני מודלים: דרך ליזוגנית או ליטית. בקטריופאג'ים מתונים לאחר חלוקת תאים נמצאים במצב נבואה (מסלול ליסוגני). בקטריופאג'ים ארסיים מתפתחים על פי המודל הליטי: חומצת הגרעין של הפאג מכוונת את הסינתזה של אנזימי הפאג, תוך שימוש במנגנון סינתזת החלבון של החיידק לשם כך. הפאג משבית בדרך זו או אחרת את ה-DNA וה-RNA של המארח, ואנזימי הפאג מבקעים אותו לחלוטין; RNA הפאג "מכניע" את המנגנון הסלולרי של סינתזת חלבון. חומצת הגרעין של הפאג משכפלת ומכוונת את הסינתזה של חלבוני מעטפת חדשים. חלקיקי פאג חדשים נוצרים כתוצאה מהרכבה עצמית ספונטנית של מעטפת החלבון (קפסיד) סביב חומצת הגרעין הפאג; תחת שליטה של ​​RNA הפאג, ליזוזים מסונתז. תמוגה של תאים: התא מתפרץ בהשפעת ליזוזים; כ-200-1000 פאגים חדשים משתחררים; פאג'ים מדביקים חיידקים אחרים. 1 - ראש, 2 - זנב, 3 - חומצת גרעין, 4 - קפסיד, 5 - "צווארון", 6 - מעטפת חלבון זנב, 7 - סיב זנב, 8 - קוצים, 9 - צלחת בסיסית

שקופית 27

זיהום של עובר העוף עובר העוף משמש לטיפוח של וירוסים, מיקופלזמות. השתמש בעוברים בגיל 8-14 ימים, בהתאם לסוג הנגיף ושיטת ההדבקה; על הקרום הכוריון-אלנטואיק, לתוך חלל האלנטואי והמי השפיר, לתוך שק החלמון. לפני ההדבקה, הכדאיות של העובר נקבעת באובוסקופ וגבולות שק האוויר מסומנים בעיפרון על הקליפה. הדבקה של עוברי עוף מתבצעת בקופסה בתנאים אספטיים לחלוטין, באמצעות מכשיר מעוקר על ידי הרתחה. הקליפה שמעל לחלל האוויר מנוגבת באלכוהול, נשרפת בלהבה, נמרח בתמיסת יוד 2%, משפשפת שוב באלכוהול ונורה. חומר ויראלי בכמות של 0.05 - 0.2 מ"ל מוחל על הממברנה הכוריונית-אלנטואית באמצעות מזרק טוברקולין או פיפטה פסטר. עוברים נפתחים לאחר 48-72 שעות של דגירה בתרמוסטט. נוכחות הנגיף בממברנה הכרולנטואית נקבעת: 1. על ידי כתמים אטומים לבנבנים בצורות שונות; 2. בתגובת ההמגלוטינציה.

שקופית 28

שקופית 29

שקופית 30

שקופית 31

תודה!!!

הצג את כל השקופיות

עוברים משמשים בגיל 8 עד 14 ימים, תלוי בסוג הנגיף, שיטת ההדבקה. רבייה בעוברי תרנגולת מתרחשת בחלקים שונים של העובר שיטות הדבקה: על הקרום הכוריואלנטואיק, על הקרום האלוטואי והמי השפיר, על שק החלמון, על גוף העובר.

29. תרבויות רקמות.

בהתאם לטכניקת ההכנה, ישנם 3 סוגי תאים:

שכבות חד-שכבות מסוגלות להתרבות על פני השטח של זכוכית ניטרלית מבחינה כימית בצורה של חד-שכבה;

השעיה, razmn-I בכל נפח המדיום המזין;

איבר - חלקים שלמים של איברים ורקמות השומרים על המבנה המקורי.

הכנת תרבית תאים ראשונית מורכבת ממספר שלבים: טחינת רקמות, הפרדת תאים, שטיפת ההשעיה שנוצרה מטריפסין.

סִימָן:

- פעולה ציטופטית - שינויים מורפולוגיים בתאים הנראים במיקרוסקופ, עד לדחייה מזכוכית.

תכלילים ויראליים הם הצטברות של חלקיקים ויראליים או הפרדה של רכיבי וירוס בציטופלזמה או בגרעין התאים.

פלאקים הם אזורים מוגבלים המורכבים מתאי ניוון. הם נראים ככתמים בהירים על רקע תאים מוכתמים.

מבחן צבע

ספיגת המד היא היכולת של תרביות תאים לספוח תאי דם אדומים על פני השטח שלהם.

הַפרָעָה.

30. סיווג, הרכב כימי של בקטריופאג'ים.

בקטריופאג'ים הם וירוסים חיידקיים בעלי יכולת לחדור לתאי חיידקים ולגרום לפירוקם. יש להם צורה של ראשן, חלק מהצורה דמוית חוט מעוקב. הם מורכבים מראש איקוסהדרלי ותהליך זנב. בתוך התהליך הזנב יש מוט גלילי, בחוץ - נדן, התהליך מסתיים בלוח בזאלי משושה עם קוצים קצרים. הפאג'ים מורכבים מחומצת גרעין וחלבון. בפאג'ים בצורת זרע, ה-DNA הדו-גדילי ארוז בחוזקה בסליל בתוך הראש. חלבונים הם חלק מהקליפה. בנוסף לחלבונים מבניים, נמצאו חלבונים פנימיים הקשורים לחומצת הגרעין וחלבוני האנזים המעורבים באינטראקציה של הפאג' עם התא.

31. תהליך האינטראקציה בין פאג'ים ארסיים לתא חיידקי הרגיש אליהם

פאג'ים ארסיים יכולים רק להגדיל את מספרם במהלך המחזור הליטי. תהליך האינטראקציה של בקטריופאג ארס עם תא מורכב ממספר שלבים: ספיחה של הבקטריופאג על התא, חדירה לתא, ביוסינתזה של מרכיבי הפאג והרכבתם ויציאה של בקטריופאג'ים מהתא.

בתחילה, בקטריופאג'ים מתחברים לקולטנים ספציפיים לפאג על פני תא החיידק. זנבו של הפאג' בעזרת אנזימים הממוקמים בקצהו (בעיקר ליזוזים), ממיס מקומית את קרום התא, מתכווץ וה-DNA הכלול בראש מוזרק לתא, בעוד שכבת החלבון של הבקטריופאג' נשארת בחוץ. . DNA המוזרק גורם לשינוי מבנה מלא של חילוף החומרים בתא: סינתזה של DNA חיידקי, RNA וחלבונים נעצרת. הדנ"א של הבקטריופאג מתחיל להיות שעתוק באמצעות אנזים טרנסקריפטאז משלו, אשר לאחר הכניסה לתא החיידק מופעל. ראשית, מסונתזים mRNAs מוקדם ואחר כך מאוחר, הנכנסים לריבוזומים של התא המארח, שם מסונתזים חלבוני בקטריופאג'ים מוקדם (DNA פולימראזות, נוקלאזות) ומאוחר (חלבוני קפסיד וזנב, ליזוזים, ATPase וטרנסקריפטאז). שכפול DNA של בקטריופאג' מתרחש על פי מנגנון חצי שמרני ומתבצע בהשתתפות פולימראזות DNA משלו. לאחר סינתזה של חלבונים מאוחרים והשלמת שכפול ה-DNA, מתרחש התהליך הסופי - הבשלת חלקיקי הפאג או שילוב של DNA הפאג עם חלבון מעטפת ויצירת חלקיקי פאג זיהומיים בוגרים.

צהריים טובים, קוראים יקרים! היום ניתן תיאור, נראה תמונות וסרטונים על התפתחות תרנגולת בביצה ביום במהלך הדגירה בבית ובחוות עופות. התאמן בביטחון הן בקנה מידה מפעל והן בחצרות פרטיות.

אבל, למרות תפוצתו הרחבה, מעטים חושבים על המנגנון המורכב שנקבע ברמה הגנטית המבטיח את גדילתו והתפתחותו של העוף.

עד עכשיו ישנה דעה שהאפרוח צומח מהחלמון. במאמר זה תלמדו את כל הסודות החבויים תחת, כמו גם איזו משמעות "נוראה" מסתתרת מתחת למילים אלנטואיס בתרנגולת ואמניון בתרנגולת, ואיזה תפקיד הם ממלאים.

התפתחות של תרנגולת בביצה ביום צילום

בלסטודיסק

התפתחות האפרוח מתחילה עם הבלסטודיסק. Blasodisk הוא קריש קטן של ציטופלזמה הממוקם על פני החלמון. במיקום הבלסטודיסק, צפיפות החלמון נמוכה בהרבה, מה שתורם לציפה מתמדת של החלמון עם הבלסטודיסק כלפי מעלה.

תכונה זו מספקת חימום טוב יותר במהלך תהליך הדגירה. הבלסטודיסק המופרי מתחיל להתחלק בעודו בגוף העוף, וכאשר הוא נגזר, הוא כבר מוקף לחלוטין בבלסטודרם. הבלסטודיסק נראה כמו כתם לבן קטן בגודל של כ-2 מ"מ.

הילה האור המקיפה את הדיסק הנבט הוא הבלסטודרם.

כאשר הביצית נכנסת לתנאי סביבה נוחים, שנפסקו לאחר ההטלה, חלוקת התאים נמשכת.

אתה צריך לדעת:בניגוד לדעה הרווחת כי ניתן לבצע הדלקה רק מהיום ה-6 לדגירה, התפתחות הבלסטודרם נראית בבירור לאחר 18-24 שעות מתחילת הדגירה. בשלב זה נראה בבירור אפל בקוטר של 5-6 מ"מ, הנעים בקלות כאשר הביצה הופכת.

ביום השני - השלישי של הדגירה, מתחיל התפתחותם של קונכיות זמניות:

1. אמניון בעוף
2. אלנטואה בעוף

כולם, למעשה, איברים זמניים שנועדו לבצע את הפונקציות של הבטחת הפעילות החיונית של העובר עד לרגע היווצרותו הסופית.

אמניון בעוף

זוהי קליפה המגנה על העובר מפני פגיעה פיזית וייבוש, עקב מילוי בנוזל. האמניון בעוף מווסת את כמות הנוזלים בהתאם לגיל העובר.

משטח האפיתל של שק השפיר מסוגל למלא את החלל עם העובר במים, וגם מבטיח את יציאת הנוזל עם גדילתו.

אלנטואה בעוף

אחד האיברים הזמניים המבצע פונקציות רבות:

• אספקת חמצן לעובר;
• מבודד חומרי פסולת מהעובר;
• משתתף בהובלת נוזלים וחומרים מזינים;
• מספק מינרלים וסידן מהקליפה לעובר.

האלנטואיס בגוזל, בתהליך גדילתו, יוצר רשת כלי דם נרחבת המצפה את כל פני השטח הפנימיים של הביצה ומחוברת אל הגוזל דרך חבל הטבור.

נשימת עוף בביצה

לחילופי החמצן בביצה, בהתאם לשלב ההתפתחות של התרנגולת, יש מנגנון שונה. בשלב הראשוני של ההתפתחות, חמצן מגיע מהחלמון ישירות לתאי הבלסטודרם.

עם הופעת מערכת הדם, חמצן נכנס לדם כבר, עדיין מהחלמון. אבל החלמון לא יכול להבטיח באופן מלא את הנשימה של אורגניזם שגדל במהירות.

החל מהיום ה-6, הפונקציה של מתן חמצן מועברת בהדרגה אל האלנטואיס. צמיחתו מתחילה בכיוון תא האוויר של הביצה, ולאחר שהגיעה אליו, מכסה שטח פנימי גדול יותר ויותר של הקליפה. ככל שהעוף גדל יותר, כך השטח המכוסה על ידי אלנטואיס גדול יותר.

בעת הדלקה, היא נראית כמו רשת ורדרדה, המכסה את כל הביצה ונסגרת על הצד החד שלה.

לאכול תרנגולת בביצה

בימים הראשונים להתפתחות העובר משתמש בחומרי הזנה של חלבון וחלמון. מכיוון שהחלמון מכיל קומפלקס שלם של מינרלים, שומנים ופחמימות, הוא מסוגל לספק את כל הצרכים הראשוניים של אורגניזם גדל.

לאחר סגירת האלנטואיס (יום 11 להתפתחות), מתרחשת חלוקה מחדש של פונקציות. העובר הופך גדול יותר ותופס מיקום לאורך הציר הארוך של הביצית, ראשו לכיוון הקצה הקהה. החלבון בשלב זה מרוכז בקצה החד של הביצה.

משקל האפרוח, יחד עם לחץ האלנטואיס, מבטיח את עקירת החלבון ואת חדירתו דרך השפיר אל פי העובר. תהליך מתמשך זה מבטיח צמיחה והתפתחות מהירה של האפרוח בביצה מיום ליום במהלך הדגירה.

מהיום ה-13, המינרלים שהעוף משתמש בהם להמשך פיתוח נמסרים על ידי אלנטואיס מהקליפה.

כדאי לדעת: התזונה הרגילה של עוף מסוגלת לספק רק אלנטואיס סגור בזמן בעוף. אם, כשהיא נסגרת, בקצה החד של הביצה, נשאר חלבון שאינו מכוסה בכלים, לעוף לא יהיו מספיק חומרים מזינים להמשך גדילה.

תנוחת הביצה והתפתחות האפרוח

לאחרונה, הדגירה של ביצי תרנגולות במצב אנכי נהוגה יותר ויותר. אבל לשיטה זו אין את ההשפעה הטובה ביותר על התפתחות העוף.

במצב זקוף, הנטייה המקסימלית בעת פנייה היא 45°. נטייה זו אינה מספיקה לצמיחה נורמלית של האלנטואיס ולסגירתו בזמן. זה נכון במיוחד עבור ביצים גדולות.

כאשר דגירה במצב אופקי, הסיבוב מסופק על ידי 180 מעלות, אשר משפיע לטובה על צמיחת האלנטואיס וכתוצאה מכך על תזונת הגוזל.

ככלל, לפלופים שבקעו עם ביצים זקופות משקל נמוך ב-10% מאלה שבקעו במצב אופקי.

חשיבות הפיכת הביצים להתפתחות אפרוחים

הפיכת ביצים במהלך הדגירה נחוצה בכל שלבי ההתפתחות, למעט היום הראשון והשניים האחרונים. ביום הראשון, יש צורך בחימום אינטנסיבי של הבלסטודיסק, וביום האחרון, החריקה הקטנה כבר תפסה עמדה לפרוץ את הקליפה.

בשלבי ההתפתחות הראשוניים, הפיכת ביצית מבטלת את הסיכון להידבקות בלסטודרם או מי שפיר לחלק הפנימי של הקליפה.

סיבוב עוזר גם:

• התכווצות מי שפיר;
• חימום אחיד של ביצים;
• אימוץ על ידי העובר של העמדה הנכונה;
• שיפור חילופי גז;
• סגירה בזמן של האלנטואיס;
• שיפור תזונת העובר.

כעת, לאחר קריאת המאמר, ניתן לשפוט את מורכבות התהליכים המתרחשים עם תרנגולת קטנה או תרנגולת במהלך התפתחותו ממספר כלובים לציפור קטנה. תהליך זה מורכב לא פחות מהתפתחות של ילד אנושי או, למשל, חתלתול ברחם, שבו מובטחים תנאים קבועים.

התפתחותה של תרנגולת בביצה ביום תלויה לחלוטין בתנאים חיצוניים, שספקם הוא דגירה.

אנו מאחלים לכולם משיכה מוצלחת של פלפלים צהובים, אפורים ואחרים!

הירשם לעדכוני האתר כדי להיות הראשון לדעת חדשות עוף שיעזרו לפתור את כל הבעיות.

הנה תמונה מהקוראת הקבועה שלנו יוליה ארפטבה, העוף שבקע מתחת!

בתגובות תוכלו להוסיף תמונות של תרנגולות מטילות, תרנגול ותרנגולות! או עופות אחרים. אנחנו תוהים איזה סוג של לול יש לך?
אהבתם את הכתבה? שתף עם חברים ברשתות חברתיות:

הצטרפו אלינו ב-VKontakte, קראו על תרנגולות!

בידוד וירוסים בחיות מעבדה.

בחירת חיות המעבדה תלויה בסוג הנגיף. חיות מעבדה הן מודל ביולוגי. לעיתים יש צורך לבצע 3-5 מעברים "עיוורים", אסימפטומטיים לפני שניתן להתאים את הנגיף לתנאי מעבדה. עם זאת, חיות מעבדה אינן רגישות לנגיפים מסוימים, ובמקרה זה יש להשתמש בחיות רגישות באופן טבעי. כמו, למשל, עם קדחת חזירים ואנמיה זיהומית של סוסים.

מטרת הדבקת חיות מעבדה:

1. לחקור את הפתוגנזה של המחלה;

2. לבודד את הנגיף מהחומר הפתולוגי;

3. ייצור של סמים חיסוניים והיפר-אימוניים;

4. ייצור חיסונים;

5. תחזוקה של וירוסים בתנאי מעבדה;

6. טיטרציה, על מנת לקבוע את כמות הנגיף ליחידת נפח;

7. מודל ביולוגי להגדרת תגובת ניטרול;

בחירת השיטה להדבקת חיות מעבדה תלויה בטרופיזם של הנגיף. אז, כאשר מטפחים וירוסים נוירוטרופיים, בעלי חיים נדבקים במוח; נשימתי תוך-נוזלי, תוך קנה הנשימה; דרמטרופית - תת עורית ותוך עורית.

ההדבקה מתבצעת בהתאם לכללי האספסיס והאנטיספסיס.

ישנן דרכים רבות להחדיר חומר המכיל וירוסים לגופם של בעלי חיים:

תַת עוֹרִי; - תוך מוחי; - תוך עורי;

תוך פריטונאלי; - תוך שרירי; - תוך עיני;

תוֹך וְרִידִי; - תוך-נוזל; - מזון מזון;

לאחר ההדבקה, החיות מסומנות, מונחות בקופסה מבודדת ונצפה במשך 10 ימים. מוות של בעל חיים ביום הראשון לאחר ההדבקה נחשב לא ספציפי ואינו נלקח בחשבון בעתיד.

3 סימנים מצביעים על יעילות הזיהום:

נוכחות של סימנים קליניים

מוות של בעלי חיים

שינויים אנטומיים פתולוגיים (גודל, צורה, צבע ועקביות של האיבר).

עובר תרנגולת הוא ביצית תרנגולת מופרית בה מתפתח עובר (עובר). גידול וירוסים על עוברי עוף ושליו הפך לאחרונה לנפוץ כאחת השיטות הפשוטות והאמינות ביותר לטיפוח ואבחון של וירוסים רבים וכמה חיידקים - ברוצלה, ריקטסיה, ויבריוס.

ניתן להתרבות נגיפים רבים של בני אדם ובעלי חיים בפיתוח עוברי עוף. רקמה עוברית, במיוחד ממברנות העובר, עשירות ברקמות של אפיתל הנבט, היא סביבה נוחה להתרבות של וירוסים רבים. וירוסים בעלי תכונות אפיתליוטרופיות (אבעבועות שחורות, ILT וכו') מתפתחים בהצלחה על הממברנה הכוריאנלנטואית, וגורמים לשינויים הנראים מקרוסקופיים. נציגים שונים של myxoviruses (שפעת, מחלת ניוקאסל, מחלת כלבים וכו'), וירוסים של ברונכיטיס זיהומית, דלקת כבד של ברווזון, arboviruses וכו 'מתרבים היטב בעובר כאשר החומר מוכנס לחלל האלנטואי. חלק מהנגיפים מתרבים בהצלחה בשק החלמון.

יתרונות:

1. חסכוני, יתר על כן, ביצים זמינות בקלות;

2. עוברי אפרוחים המתפתחים חסרים מנגנוני הגנה, מכיוון המערכת החיסונית עדיין לא מפותחת;

3. קליפת הביצה מונעת דרכה חדירת חיידקים ווירוסים מהסביבה;

לטיפוח ובידוד נגיפים בעוברי תרנגולות נדרש ציוד פשוט מאוד - תרמוסטט או חממה קונבנציונליים.

תנאים:

1. ביצים מתקבלות מחוות ידועות כנקיות ממחלות זיהומיות;

2. עוברי עוף מתקבלים בצורה הטובה ביותר מגזעים לבנים של תרנגולות (לגהורן, לבן רוסי), מכיוון שהם עמידים יותר למניפולציות ואינם מתים מפציעות קטנות. בנוסף, המעטפת שלהם לבנה ושקופה יותר מגזעים אחרים, וקל יותר לראות אותה, מה שנוח לצפייה והתבוננות בתהליך העבודה איתם;

3. לדגירה נבחרות ביצים מופרות שהוטלו לפני לא יותר מ-10 ימים;

4. הם לוקחים ביצים לא מזוהמות, מכיוון שאי אפשר לשטוף אותן לפני הדגירה, וביצים מלוכלכות פחות נראות במבט (אובוסקופיה) ובעבודה איתן, אתה יכול להדביק את העובר בזמן מניפולציה;

דגירה של ביצים באינקובטור או בתרמוסטט עם חימום מים וגישה לאוויר, ובזמן הדגירה בטרמוסטט יש להפוך את הביצים 2-3 פעמים ביום ולהוציא אותן 5-10 דקות באוויר לגז טוב יותר. לְהַחלִיף. כדי לשמור על לחות מסוימת, כלי עם מים ממוקם בתרמוסטט לאידוי, הטמפרטורה בתרמוסטט צריכה להיות 38 מעלות.

התפתחות העובר מתרחשת כבר ביום הראשון של הדגירה, הנחת המוח והשלד מתרחשת. מבנה עובר עוף בגיל 7-9 ימים(ראה מחברת).

לזיהום, לרוב משתמשים בעוברים בני 7-12 ימים. העבודה עם עוברי עוף מתבצעת בחדר אגרוף סטרילי תוך הקפדה על אספסיס.

מטרת הדבקת עוברי אפרוחים:

1. לבודד את vyrus מהחומר הפתולוגי;

2. פיתוח חיסונים;

3. תחזוקת הנגיף במעבדה;

4. טיטרציה של וירוסים;

5. מודל ביולוגי להגדרת תגובת ניטרול;

6. מחקר של התערבות וירוסים וייצור אינטרפרון; זיהום של עוברי עוף:

לזיהום, יש לבחור עוברים ברי קיימא עם ניידות מוגדרת היטב. לפני ההדבקה, כל העוברים נבדקים בקפידה בחדר חשוך על אובוסקופ.

במהלך ההארה של העוברים לפני ההדבקה, מתוארים על גבי הפוגה (חלל אוויר), מהלך כלי הדם הגדולים ומקום הצגת העובר, כלומר, האזור על הקליפה שבו העובר נמצא הכי קרוב אליו. קליפה עם עיפרון פשוט. סימן הפוגה, מקום הצגת העובר ומהלך כלי הדם הגדולים משמשים אז קו מנחה בבחירת המקום להחדרת החומר המכיל את הנגיף בזמן ההדבקה.

עוברי העוף שנבחרו להדבקה מועברים לקופסה, שם הם עובדים איתם. לפני ההדבקה, הקליפה באתר ההזרקה מטופלת פעמיים באלכוהול יוד ונורה. מינון ההדבקה הוא 0.1-0.2 ס"מ.

בהתאם לסוג הנגיף ולמטרת ההדבקה, ישנם שונים שיטות להחדרת חומר המכיל וירוסים:

1) זיהום על הממברנה הכוריואלנטואית , עוברים בגילאי 7-12 ימים משמשים בבידוד וטיפוח של וירוסים נוירוטרופיים, דרמטרופיים וחלק מהנגיפים פנטרופיים (אבעבועות שחורות, אנצפלומיאליטיס, ILT, מחלת הפה והטלפיים, כלבת, מגפה וכו'). ישנם 3 סוגי זיהום:

א) פתחו את הפוגה וחתכו אותה במספריים, הפרידו את קרום המעטפת ומרחו חומר על הממברנה הכוריואלנטואית (CAO). לאחר מכן סוגרים את החור בביצה עם כובע זכוכית סטרילי ושולי הכובע עוברים בשעווה;

ב) חותכים משולש באורך צלע של כ-1 ס"מ בעזרת קובץ מחט (קובץ) או אזמל משונן בקליפה בגבול הפוג'י מצד הצגת העובר, קטע מהקליפה. וקרום infrashell מוסר עם פינצטה והחומר מוזרק. החור נסגר עם זכוכית כיסוי סטרילית והקצוות עוברים שעווה או אטומים עם טיח דבק סטרילי.

ג) מוציאים אזור קטן מהקליפה בשטח של כ-0.5 ס"מ עם אזמל במקום הצגת העובר, ואז מסירים את קרום הקליפה באזור זה בעזרת פינצטה או מחט. החומר מוזרק. אם החומר לא משתלב היטב בחלל הביצה, אפשר לשאוב אוויר מהפוגה דרך החור בקליפה של הפאג בעזרת אגס גומי, וכתוצאה מכך, פאג מלאכותי הוא נוצר במקום החדרת החומר, ואז החומר מוכנס בקלות. החור במעטפת נסגר עם סרט דבק או בשעווה.

2) זיהום בחלל האלנטואי. שיטת הדבקה זו פשוטה מאוד ומשמשת לבידוד וירוסים רבים. לזיהום, לוקחים עוברים בני 10-11 ימים. ישנם שני סוגים של זיהום:

א) ההדבקה מתבצעת דרך הפאג מבלי לחתוך אותו. המרחק מהחלק העליון של הפוג'י ועד לגבול הפוג'י המסומן בעיפרון על הקליפה נמדד במחט, והמחט מוחדרת לעומק המסומן ומעמיקה עוד 0.5 ס"מ כדי לנקב את הקרום הכוריאנלנטואיק;

ב) החומר מוזרק במחט דרך ניקור בקליפה במקום הצגת העובר לעומק של 3-5 מ"מ באזור האווסקולרי. החור במעטפת נסגר עם סרט דבק או בשעווה.

3) זיהום בשק החלמון. לזיהום משתמשים בעוברים בני 5-8 ימים. ישנם שני סוגים של זיהום:

א) המחט מוכנסת מהצד של הפוג'י לתוך שק החלמון בזווית של 45 מעלות למקום הצגת העובר בשליטה של ​​אובוסקופ;

ב) הביצה מונחת על המעמד גם עם מקום הצגת העובר למטה ומחדירים את המחט מלמעלה למטה לכיוון העובר לעומק של כ-1 ס"מ.

אתר ההזרקה אטום בנייר דבק ומכוסה בשעווה. ארבע) זיהום בחלל השפיר.בשיטת הדבקה זו יכול הנגיף להיכנס לתאים שונים הנמצאים במגע עם מי השפיר ולהתרבות בהם. לנוחות ההדבקה, מומלץ לדגור את העוברים הפוך 2-3 ימים לפני ההדבקה. לאחר מכן העובר והאמניון מוזזים כלפי מעלה ונוח יותר להדביק אותו. ישנם שני סוגים של זיהום:

א) לפתוח ולחתוך את הפוגה, להסיר את קרום הקליפה בפינצטה ולתפוס את האמניון, להדק את האמניון בפינצטה ולהזריק את החומר לחלל השפיר במינון של 0.1 מ"ל. החור בקליפה נסגר לאחר מכן עם מכסה זכוכית סטרילית והקצוות עוברים שעווה;

ב) זיהום במחט ארוכה דרך פאג בחדר חשוך תחת שליטה של ​​העין.במחט, הקצה מכופף תחילה בזווית ישרה כדי ליצור אזור קטן. המחט מוחדרת בשליטה של ​​העין דרך הפאג של הטרום-עובר, בלחץ של מחט קהה, העובר יזוז במקרה זה, לאחר מכן מחוררים את השפיר בדחיפה קלה ומשוך מעט את המחט חזור. במקרה זה, העובר צריך לנוע למעלה מאחורי המחט. ואז החומר מוצג.

5) זיהום בגוף העובר וזיהום במוח. משתמשים בעוברים בני 7-12 ימים, ההדבקה מתבצעת על ידי החדרת חומר לחלקים שונים בגוף או ישירות למוח. לצורך הדבקה, פותחים את הפוגה ומשכים את העובר עם פינצטה. בשיטות ההדבקה הללו, עד 30% או יותר ממספר העוברים הנגועים עלולים למות מטראומה.

6) זיהום בכלי הדם הגדולים של הממברנה הכוריואלנטואית. שיטה זו של זיהום, כמו הקודמת, משמשת לעתים רחוקות מאוד. החומר מוזרק במחט דקה לאחר הסרת הקליפה לאורך כלי הדם ישירות לכלי לאורך זרימת הדם.

לאחר ההדבקה יש לסמן בעיפרון פשוט עוברי עוף ולהכניס אותם לתרמוסטט. הם מנוטרים מדי יום על ידי צפייה, ניטור מתבצע עד 7-8 ימים, תלוי בסוג הנגיף. במקרה של מוות של העוברים מוציאים אותם בדחיפות מהתרמוסטט ומכניסים אותם למקרר עד לרגע הפתיחה. אם העובר מת תוך 14-18 השעות הראשונות, זה יכול להיות כתוצאה מטראומה או רעילות מהחומר הפתולוגי. לכן, כמו במקרה של הדבקה של חיות מעבדה, במקרים מפוקפקים מומלץ לבצע מספר מעברים ולקחת מספר עוברים לכל חומר בניסוי.

נתיחת הגופה של עוברי התרנגולת הנגועים המתים, או אלה שהוצאו לאחר תום תקופת התצפית, מתבצעת עם כל כללי האספסיס בתנאי אגרוף סטריליים. כאשר פותחים, הקליפה מטופלת באלכוהול ונשרפת, ואז הפוגה מנותקת. בעובר שנפתח שואבים תחילה בזהירות את הנוזל האלנטואי (כמותו כ-7 מ"ל), לאחר מכן מושכים את קרום השפיר בפינצטה, מחוררים אותו בפפטת פסטר ומוצצים את מי השפיר (כמותו 1.0-1.5 מ"ל). ), ואז החלמון נאסף, הממברנות מוסרות והעובר. הנוזל, הממברנות והעובר עצמו נבדקים בקפידה לאיתור שינויים. מי השפיר בדרך כלל שקופים לחלוטין; כאשר הם נגועים, הם יכולים להיות עכורים, מדממים. השינויים האופייניים הנגרמים על ידי הנגיף בולטים ביותר על הממברנה הכוריאנלנטואית: מופיעים מוקדים דלקתיים, אטומים, עגולים בצורתם ושטפי דם. שטפי דם יכולים להיות בגוף העובר. כל החומר נאסף במיכל סטרילי.

עוברי עוף בווירולוגיה נמצאים בשימוש נרחב לא רק לבידוד וירוסים, אלא גם להצטברות וייצור של אנטיגנים, להכנת חיסונים חיים ומומתים, טיטרציה של וירוסים, ליצירת תגובה לנטרול וירוסים, להחלשה (החלשה). ) וירוסים, לחקר התערבות של וירוסים והשגת אינטרפרון.