Цитохимични методипреследват идентифицирането на химични и ензимни вещества в клетките, като използват цветни реакции за това. Цитохимичните препарати запазват клетъчната структура, което позволява идентифицирането на клетките и вътреклетъчното локализиране на изследваното съединение. Ето защо в хематологията се предпочитат не биохимичните, трудоемки, разрушаващи клетъчната структура на много разнородна клетъчна популация, а цитохимичните методи.
Цитохимиядоказа, че сред морфологично идентичните клетки има значителни химични и ензимни разлики.
Гликоген (реакция CHIC) (PAS) - метод на Hotchkiss - Mac Minus
Принцип на Шик. Полизахаридите се откриват чрез реакция, която окислява алкохолните групи, които се превръщат в алдехидни групи, а последните се идентифицират чрез цветна реакция с реактива на Шиф.
Реактиви за PAS реакция: 1. Спиртоформалинова фиксираща смес: 9 части абсолютен етилов алкохол + 1 част 40% формалин; дръжте при +4°.
2. Периодна киселина, 1% воден разтвор. Разтворът е безцветен. Съхранявайте в бутилка от кафяво стъкло на тъмно при лабораторна температура. Пожълтелият разтвор не е приложим.
3. Реактив на Шиф. Разредете 1 g основен фуксин в 200 ml дестилирана вода при точка на кипене. Разклаща се в продължение на 5 минути, охлажда се до температура 50 °, филтрира се и се добавят 20 ml нормална солна киселина. Охлажда се до 25°, добавят се 2 g натриев или калиев метабисулфит, които напълно осигуряват разтвора. Разтворът трябва да престои един ден на тъмно и студено (+4 °). След това добавете 2 g активен въглен, говорете за 1 минута. и филтър.
Полученият филтрат е бистър и безцветен. Допуска се леко жълтеникав оттенък; ако разтворът порозовее, става неприложим. Съхранявайте при +4°C в херметически затворена бутилка от кафяво стъкло.
4. Зелена светлина -1% воден разтвор.
5. Диастаза: невтечнена човешка слюнка или 0,1% разтвор на амилолитично-диастатичен ензим във физиологичен разтвор.
Техника на реакция на Шик
1) 10-минутно фиксиране на петна със смес от алкохол-формалин; измиване с дестилирана вода;
2) окисляване с 1% разтвор на периодна киселина, 10 минути; измиване с дестилирана вода;
3) оцветяване с реактив на Шиф в покрит съд, на тъмно и студено, за 2 часа; измиване с течаща вода;
4) контраоцветяване 1% зелена светлина за 1 минута; изплакване с течаща вода.
Контролът е фиксиран намазкаподложени на диастазна инкубация, 60 min. при стайна температура за селективно отстраняване на гликогена. След измиване с дестилирана вода се обработва по обичайния метод.
Оценка на резултатите от PAS реакцията
Гликоген, боядисана в пурпурночервен цвят, появява се под формата на зърна или разпръснати. За контрол на реакцията се използват зрели цитонамазка гранулоцити. В допълнение към гликоген CHIC, положителна реакция се дава и от други вещества от въглехидратна природа, като муцин, мукопротеини, цереброзиди, фибрин. Гликогенът се диференцира от тези съставки чрез предварително третиране с диастаза, след което гликогенът вече не се оцветява.
AT гранулоцитигликогенът вече е диспергиран на етапа на промиелоцитите и започва да се увеличава, когато узрее. При нормални условия лимфоцитите са отрицателни или 20% от тях могат да съдържат няколко малки зрънца гликоген. Моноцитите са отрицателни или имат фина грануларност.
Интензивност оцветяванеопределени полуколичествено. В реакцията CHIC се отразява под формата на гликогенов индекс или среден реакционен индекс (Astaldi). Нормалният гликогенов индекс варира от 0,10 до 0,30. Обикновено само патологичните лимфоцити имат степен на натоварване над 3.
Той беше посочен като метод на реакция на Шик:
а) При извършване на диференциална диагноза на някои цитологични видове остра левкемия:
- Миелобластите и промиелуитите са PAS-отрицателни или придобиват слаб дифузен цвят. Телата на Auer дават положителна реакция, която отслабва след храносмилане със слюнка.
- Лимфобластите при остра левкемия и лимфосаркома дават остра PAS-положителна реакция под формата на зърна или големи блокове гликоген.
- Еритробластите при еритремия и остра еритролевкемия дават рязко положителна разпръсната или гранулирана реакция, за разлика от нормалните еритробласти, които са PAS-отрицателни;
- Моноцитоидните бласти са непостоянно слабо положителни, с фина грануларност.
б) С цел диагностика и проследяване на ефективността на лечението при хронична лимфна левкемия: повишеното ниво на гликоген показва тежка форма на заболяването и лоша прогноза.
Растеж на гликогенв патологични лимфоцити, явление, което не е характерно за левкемия, се обяснява с повишаване на метаболитната активност при всякакъв вид лимфоидна пролиферация.
в) За разграничаване на клетките на Гоше от други макрофаги с натрупване.
Реакцията на Шик показва наличието или отсъствието на необходимото ниво на антитоксин в кръвта за защита на тялото от дифтерия. Понастоящем тази реакция се използва по-рядко поради въвеждането на по-чувствителни методи (RPHA).
Реакцията на Шик се провежда при деца, ваксинирани срещу дифтерия със завършена ваксинация и поне една реваксинация. На възраст над 13 години реакцията може да бъде поставена и с неизвестна история на ваксинация. Състоянието на антидифтерийния имунитет се проверява не по-рано от 6 месеца след последната реваксинация и не по-рано от два месеца след остро заболяване.
Реакцията на Шик се поставя и в групи, които са неблагоприятни за дифтерия, новопристигнали деца, когато няма информация за ваксинации. Деца с отрицателна реакция на Шик не получават допълнителни ваксинации. Допълнителни ваксинации, независимо от имунния слой в екипа, се извършват за деца с положителни и съмнителни реакции.
Резултатите от реакцията на Шик се записват в картата за превантивна ваксинация (ф. 63), като се посочват датата на поставяне и изследване на реакцията, серията на токсина и института, който е произвел токсина.
За установяване на реакцията на Shik се използва разреден активен (ненагрят) дифтериен токсин. 0,2 ml съдържа една Shik-доза.
За да настроите реакцията на Шик, трябва да използвате еднограмови (туберкулинови), внимателно проверени спринцовки с точни градуировки, които не позволяват течността да преминава между стените на спринцовката и нейното бутало.
Строго е забранено провеждането на реакцията на Шик в помещенията, където е извършена реваксинация срещу туберкулоза в този ден, както и използването на спринцовки, игли и други инструменти, използвани за имунизация срещу туберкулоза.
Кожата на мястото на инжектиране се избърсва с памучна вата, навлажнена със 70% етилов алкохол. Токсинът (0,2 ml) се инжектира интрадермално в средната част на палмарната повърхност, обикновено в лявата предмишница. Въвеждането се извършва бавно с известно напрежение, характерно за интрадермално инжектиране на течност. Инжектирането се извършва под много лек наклон на спринцовката към предмишницата, почти успоредно на повърхността на кожата. Разрезът на иглата трябва напълно да влезе в кожата и да свети през епидермиса. На мястото на инжектиране трябва да се образува белезникава, добре ограничена везикула (папула) с диаметър около 1 cm, която има отпечатък на мястото на космените фоликули ("лимонова кора"). Този мехур (папула) изчезва за 10-15 минути. Ако везикула (папула) не се образува или изчезва твърде бързо при инжектиране на токсина, това означава, че инжектирането е направено неправилно, дълбоко и токсинът, който е попаднал подкожно, може да не предизвика реакция. В резултат на това може да се получи неправилен резултат.
Реакцията се записва след 72 или 96 ч. Резултатите се оценяват както следва:
а) Реакцията на Shik е положителна, ако се появи зачервяване и инфилтрация на мястото на инжектиране на токсина. Посочва се степента на реакция: "+" - ако зачервяването е с диаметър 1 -1,5 cm, (+ +" - ако е 1,5 - 3 cm, "+ + +" - ако е повече от 3 cm;
б) реакцията на Shik е отрицателна, когато няма зачервяване и инфилтрация на мястото на инжектиране на токсина;
в) Реакцията на Шик е съмнителна, ако зачервяването и инфилтратът по време на въвеждането на токсина или не са ясно изразени, или с изразена реакция, диаметърът на зачервяването е приблизително 0,5 cm (обозначено с "±").
Противопоказания за формулирането на реакцията на Шик: спазмофилия, епилепсия, гнойни заболявания, контакт с пациенти с вирусен хепатит, бронхиална астма.
Реакцията на Шик може да помогне при диференциалната диагноза между атипичната дифтерия и други заболявания със съпътстващо носителство на дифтериен бацил (в случаите, когато реакцията на Шик се поставя преди прилагането на антидифтериен серум).
Проучванията през последните две години на диагностичната стойност на теста Shik в метода на титриране съгласно V. I. Ioffe, с 1/40, 1/10, 1/5 DLM дифтериен токсин (1, 4 и 8 кожни дози), доведе до заключението, че определянето на височината на имунитета помага при диференциалната диагноза.
При повечето носители на токсигенни дифтерийни бацили се определя интензивен антитоксичен имунитет, който се изразява в отрицателни реакции не само към една, но и към 4 и 8 кожни дози от токсина (K. V. Blumenthal).
При някои пациенти с дифтерия, при които беше възможно да се определи състоянието на имунитета чрез реакцията на Шик преди прилагането на серума, последният се оказа положителен за една кожна доза.
По този начин, ако със съмнителна клинична картина и откриване на токсигенни дифтерийни бацили, тестът на Шик в обичайните условия (1/40 DLM от токсина) дава положителен резултат, предположението за дифтерия е по-разумно.
Реакцията на аглутинация също може да помогне при диференциална диагноза, тъй като при дифтерия има редовно повишаване на антителата в кръвта до 2-3-та седмица от началото на заболяването, докато според авторите съпътстващото носителство не дава забележимо повишаване на антителата в рамките на определеното време.
В заключение трябва да се каже, че отхвърлянето на диагнозата дифтерия при откриване на дифтериен бацил във всички случаи трябва да бъде достатъчно обосновано с убедителни клинични данни.
Като се има предвид, че при диференциална диагноза в такива случаи често възникват големи трудности, особено за участъковия лекар, се препоръчва тези пациенти да бъдат насочени към диагностичните отделения. При липса на диагностични легла диагнозата дифтерия може да се постави само след консултация с опитен лекар.
"Дифтерия при деца", М. Е. Сухарева, К. В. Блументал
Откриването на BL в типична клинична картина на фоликуларна ангина, когато изпод лигавицата на сливиците блестят гнойни фоликули, като зърна от просо, също може лесно да се разглежда като съпътстващ носител, тъй като островчетата на дифтерийните нападения винаги са разположени на повърхността на лигавицата. Хроничният тонзилит често е придружен от повече или по-малко дългосрочно носителство на дифтериен бацил и поради това често е необходимо да се диференцира атипичната дифтерия ...
За опитен лекар не е трудно да диагностицира гъбичен тонзилит (причинен от leptotrix) със съпътстващо носителство на дифтериен бацил, тъй като клиничната проява на микозата на фаринкса по същество няма прилика с процеса на дифтерия; но очевидно същите причини, най-често хронично увреждане на назофаринкса, едновременно допринасят за дългосрочната вегетация на гъбичките и носителството на дифтериен бацил. По-трудна диференциална диагноза...
В болницата е приета Луда П. на 8 години. I. V. Rusakova на 9 септември 1960 г. с диагноза "дифтерия на фаринкса?". Момичето е добре имунизирано срещу дифтерия, често боледува от тонзилит. Заболя на 5 септември, температура 37,5°, главоболие, умерени болки в гърлото. На 6 - 7 септември температурата беше в рамките на 38 - 39 °, неразположение, болката в гърлото продължаваше ....
Откриването на дифтериен бацил в сеитба от фаринкса или носа с типична клинична картина на грипна крупа или крупа с катар на горните дихателни пътища не може да бъде решаващ аргумент в полза на дифтерийната етиология на крупата. В такива случаи е необходимо идентифициране на изолирани микроби, но е напълно възможно носителство на BL в гърлото или носа, придружаващо недифтериен круп. Ето извадка от историята...
Боря Б., на 8 години, е настанен в дифтеритно-диагностичното отделение на болницата. I. V. Rusakova на 27 септември 1960 г. с диагноза "дифтерия на фаринкса?". Момчето е добре имунизирано срещу дифтерия. Повторно болен от тонзилит. Разболя се на 24. IX, температура 39,5°, втрисане, болки в гърлото. 25. IX детето е прегледано от лекар: температурата остава висока, отбелязва се ярка хиперемия на фаринкса, жълтеникава, разхлабена, но доста обширна ...
Токсини (от гръцки toxikon - отрова), вещества от бактериален произход, които могат да инхибират физиологичните функции, което води до заболяване или смърт на животни и хора. По химическа природа всички токсини са протеини или полипептиди. За разлика от други органични и неорганични токсични вещества, токсините при поглъщане предизвикват образуването на антитела.
При някои инфекциозни заболявания (дифтерия, скарлатина), за да се определи интензивността на имунитета и чувствителността на децата, се използват интрадермални тестове с използване на подходящи разредени токсини. Положителната реакция (локално възпаление на кожата в областта на инжектиране на токсин) се дължи на токсичния ефект на токсина върху кожните тъкани. Отрицателният резултат от реакцията се обяснява с неутрализирането на внесения в кожата токсин от съответния антитоксин, съдържащ се в имунния организъм в достатъчно количество за това.
Токсините се получават от токсигенни щамове на микроби (дифтериен бацил или скарлатинов стрептокок) чрез инокулация върху течна хранителна среда (бульон на открито), последвано от филтриране през бактериални филтри. От получените токсини се приготвят диагностични токсини Шика (дифтериен) и Дик (скарлатина). Токсините се инжектират интрадермално в количество от 0,2 ml (Shika) и 0,1 ml (Dick) в средната част на вътрешната повърхност на предмишницата.
Анатоксините са филтрати от бульонни култури на токсигенни микроорганизми, които са загубили своята токсичност поради специална обработка, но са запазили до голяма степен антигенните и имуногенни свойства на оригиналните токсини.
Когато се въвеждат в тялото на човек или животно, токсоидите предизвикват образуването на антитоксичен имунитет, което им позволява да се използват за профилактика на тези инфекциозни заболявания, които се основават на действието на екзотоксини, отделяни от патогени, както и за хиперимунизация на животни - производители на антитоксични серуми.
Независимо от вида на токсоида, неговата имуногенност и антигенност се определят от съответните свойства на оригиналния токсин. Ето защо в лабораториите, които произвеждат тези лекарства, се обръща много внимание на създаването на оптимални условия за образуване на токсини.
За получаване на токсини с висока якост са необходими щамове, които се отличават с особено изразена способност да образуват токсини при изкуствени условия. Не всички щамове токсигенни бактерии притежават тези свойства. За производствени цели се използват щамове, които са адаптирани към изкуствена среда и трайно запазват способността си да образуват токсини.
Културите от токсинообразуващи агенти се съхраняват или в изсушено състояние, или върху среди, които са оптимални за този тип бактерии. Преди да бъдат използвани за инокулиране на масови партиди, щамовете се пасивират върху средата, използвана за получаване на токсина.
При равни други условия силата на токсините се определя от качеството на хранителната среда, така че лабораториите обръщат внимание на подготовката на хранителната среда. Суровините, химикалите и другите съставки, които съставляват средата, се подлагат на най-щателен контрол в биохимичните лаборатории на производствените институти.
За образуване на токсини се използват течни хранителни среди, които включват месна вода и продукти от пептично (бульон на Мартин, среда на Рамон) или триптично (среда на Поуп) смилане на месо.
Процесът на хидролиза на месото се контролира чрез определяне на общия аминен азот и коефициента на разцепване на протеина, който се изчислява от отношението на аминовия азот към общия. Използват се и безмесен казеин, полусинтетични среди.
Към хранителната среда, предназначена за образуване на токсини, се добавят въглехидрати (глюкоза, малтоза или смес от тях). Когато въглехидратите ферментират, се освобождава голямо количество енергия, което е необходимо за процесите на синтез, които се случват в развиващата се култура. Добавянето на въглехидрати драстично увеличава силата на токсините, произведени в околната среда.
В допълнение към въглехидратите, някои метали са необходими за образуването на токсини в минимални дози. Образуването на токсини от дифтериен бацил се инхибира от излишък на желязо в околната среда в същата степен, както и от липсата му. При наличие на оптимални количества желязо в околната среда рязко се засилва токсинообразуването.
Образуването на токсини се извършва в пълна степен при определено pH на средата. Междувременно, по време на растежа на културата, стойността на pH се променя и може да достигне такива показатели, които ще потиснат образуването на токсина.
За да се елиминира тази среда, се добавят буферни вещества, за да се поддържа желаната стойност на pH. Едно от тези вещества с буферни свойства е натриевият ацетат, който се добавя към бульона в количество от 0,5-0,75%.
В зависимост от биологичните характеристики на микроба, произвеждащ токсини, се използват различни условия на отглеждане и по-специално се регулира аерацията на средата. Дифтерийният бацил образува токсин при условия на максимална аерация, напротив, тетаничният бацил и други токсигенни анаероби не се нуждаят от кислород. В съответствие с това, в първия случай културата се отглежда в тънък слой от средата с голяма повърхност на контакт с въздуха, във втория случай средата се излива във висок слой и различни кислородни адсорбенти (памучна вата , сухи червени кръвни клетки) се добавят.
Температурата на растеж и продължителността му варират за различните микроби. Общо за процеса на образуване на токсини е необходимостта от перфектен контрол на температурата в инкубатора. Колебанията в температурата влияят неблагоприятно на силата на токсина. Следователно термостатите, в които се образува токсин, са оборудвани с прецизни термостати.
Във всеки отделен случай продължителността на култивирането на културата се определя от интензивността на образуване на токсини върху дадена серия среда. За да се реши въпросът с времето на прекратяване на култивирането, силата на токсина iH в средата се определя в различни периоди на култивиране.
Когато силата на токсина достигне своя максимум, той се отделя от микробните тела, като това става чрез филтриране през специални бактериални филтри (анаеробни микроорганизми) или обикновени хартиени (дифтериен бацил).
Превеждането на токсични филтрати ванатоксин се извършва чрез продължително излагане на формалин при температура 39-40 °C. Формалинът се свързва със свободните аминогрупи на аминокиселините, полипептидите и протеините на токсина, поради което губи токсичните си свойства. Преходът на ванатоксиновия токсин става в рамките на 3-4 седмици. За правилното образуване на токсоид pH на токсина има значение. Най-благоприятна е неутрална или леко алкална реакция на средата.
Анатоксините се характеризират с пълна безвредност за животните. Но при непълна неутрализация в тях могат да останат остатъци от токсини, които причиняват късно увреждане на чувствителния организъм. Следователно, когато се проверява безопасността на токсоидите, животните се наблюдават дълго време. Безвредността на токсоидите е необратима. Никакви ефекти не водят до възстановяване на загубената токсичност.
Анатоксините запазват почти напълно антигенните свойства на токсините. Това може да се провери чрез различни методи in vitro (реакция на флокулация, реакция на свързване на токсоид) и експерименти върху животни, при които въвеждането на токсоид предизвиква образуването на съответните антитоксини и създаването на антитоксичен имунитет.
Анатоксините са устойчиви; те понасят многократно замразяване и размразяване, издържат на действието на висока температура и са стабилни при продължително съхранение.
Анатоксините съдържат освен специфични протеини и баластни вещества, от които могат да бъдат освободени по различни начини. Те се основават на способността на токсоидите да се утаяват при насищане с неутрални соли, соли на тежки метали, киселини (солна, трихлороцетна, метафосфорна), както и в присъствието на етилов и метилов алкохол при ниски температури. Тези методи понастоящем се използват за получаване на пречистени концентрирани токсоиди.
Токсоидите се адсорбират върху различни неразтворими вещества (фосфорни соли, алуминиев хидроксид), това се използва за получаване на сорбирани токсоиди, които се характеризират със забавена абсорбция в организма, в резултат на което може да се получи по-силен имунитет.
Поради своята безвредност, висока антигенност и имуногенност, токсоидите са най-ценното средство за профилактика и лечение на редица заболявания.
В момента са получени токсоиди: дифтериен, тетаничен, ботулинов, стафилококов, дизентериен, от токсини, произведени от патогени на газова гангрена, както и от змийска отрова.
Бактериалните или инфекциозните алергени са суспензия от убити микробни клетки или различни фракции, извлечени от тях, и се използват като диагностични препарати за откриване на свръхчувствителност на организма към патогени на инфекциозни заболявания.
Бактериалните екзотоксини (дифтерия, скарлатина) се използват за кожни тестове за определяне на антитоксичния имунитет към тези заболявания.
Кожните алергични тестове се използват за диагностициране на много инфекциозни заболявания, придружени от алергично преструктуриране на тялото. В зависимост от начина на въвеждане на алергена могат да се прилагат кожни тестове - при определяне на чувствителност към определени лекарствени, химични вещества; скарифициращо - при определяне на чувствителността към домашни, поленови, епидермални алергени и интрадермално - при определяне на чувствителността към бактериални и гъбични алергени.
Диагностичната стойност на реакциите на организма към алергените е различна по време на инфекциозния процес. В началото на инфекциозния процес положителната реакция показва само инфекция със специфичен патоген и състояние на алергия към него и не може да се счита за диагностична. В разгара на заболяването като диагностичен тест се взема предвид алергичен тест. След някои инфекциозни заболявания в продължение на няколко години остава алергия към съответния патоген, чието откриване показва инфекция. При положителна реакция към алергена, която се взема предвид след 20 минути, а след това след 24 и 48 часа (рядко 7 дни), има усещане за парене на мястото на инжектиране, зачервяване, подуване и може да има везикула .
Алергените, използвани за диагностични цели, са различни по химическа природа и методи на производство.
Следва описание на някои от диагностичните лекарства, които са широко разпространени в практиката.
1. Туберкулин. В момента има три лекарства за провеждане на алергични туберкулинови тестове:
alttuberculin Koch, сух пречистен туберкулин (PPD) и пречистен туберкулин в стандартно разреждане.
Alttuberculin Koch (ATK) е жълтеникаво-кафява течност, получена чрез изпаряване до 1/10 от първоначалния обем на 5-6-седмична култура от микобактерии, отглеждани в глицериново-месно-пептонов бульон. Старият туберкулин на Кох съдържа отпадъци и продукти от гниене на микобактерии и хранителна среда. Лекарството трябва да съдържа най-малко 90 000 TU (туберкулинови единици) на 1 ml.
Сух пречистен туберкулин (PPD) - (Derivatum protei nos purificatum tuberculini mammalinii) е протеинов препарат, получен от филтрата на културата на Mycobacterium tuberculosis чрез утаяване с химикали, последвано от пречистване. 1 ml пречистен сух туберкулин съдържа 50 000 единици. Лекарството се използва за интрадермални тестове на Манту, подкожни тестове на Кох и други тестове.
Пречистен туберкулин в стандартно разреждане (PPD-2) се приготвя от туберкулинов прах чрез разреждането му в разтворител (tween-80), което осигурява стабилизиране на биологичната активност на лекарството - 2 или 5 TU в 0,1 ml.
Използва се само за поставяне на интрадермални проби Манту.
Предимството на пречистените туберкулини е тяхната висока чувствителност и стандартизация.
Провежда се туберкулинова диагностика, за да се определи инфекцията на населението, особено на децата и юношите, с туберкулоза; при подбор на хора за ваксиниране срещу туберкулоза; определяне на ефективността на ваксинацията и др.
За масова туберкулинова диагностика се използва интрадермален тест на Манту, като се използва пречистен туберкулин в стандартно разреждане.
Ако изследваното лице не е заразено с Mycobacterium tuberculosis, се наблюдава отрицателна реакция; с размер на инфилтрата 2-4 mm, тестът е съмнителен, така че реакцията трябва да се повтори след 3-4 седмици. Ако инфилтратът е повече от 5 mm, реакцията се счита за положителна.
2. Tularin съдържа микроорганизми, убити при нагряване при 70 ° C в 3% глицерин, използва се за интрадермално приложение при диагностициране на туларемия, започвайки от 3-5-ия ден на заболяването. Тестът с туларин се използва и за определяне на постваксиналния имунитет.
3. Бруцелин - представлява филтрат от 3-седмична (убита от топлина) бульонна култура от трите вида бруцела.
Лекарството се прилага строго интракутанно при диагностициране на бруцелоза и при определяне на имунитета при ваксинирани хора (кожен тест на Burne).
4. Токсоплазмин - антигенен комплекс, получен от ексудат на коремната кухина на мишки, инфектирани интраперитонеално с причинителя на токсоплазмоза. Препаратът не трябва да съдържа жизнеспособна токсоплазма.
Токсоплазмин се използва за диагностика при съмнителни за токсоплазмоза заболявания - при акушерска патология, увреждане на очите, треска с неясна етиология и др.
5. Антраксин - препарат, съдържащ комплекс протеин-полизахарид-нуклеинова киселина, получен чрез хидролиза на антраксни бацили. Anthraxin се използва за диагностика при пациенти с антракс, за определяне на състоянието на алергия при имунизирани хора и при преболедували тази инфекция. Алергичният тест е положителен още в първите дни на заболяването.
6. Дизентерия - представлява протеинова фракция на двата причинителя на дизентерия Shigella Flexner и Sonne и се използва като допълнителен диагностичен инструмент при съмнение за дизентерийна етиология на стомашно-чревното заболяване при хора от всички възрасти.
7. Бактериалните алергени от такива микроорганизми като стафилококи, стрептококи, пневмококи, катарални Neisseria, Escherichia, Enterococcus, Proteus, псевдодифтерийни бацили се получават под формата на пречистени термостабилни фракции от филтрати на 5-6-дневна бульонна култура (метод на Андо-Вержиковски). ) или под формата на нативни препарати - инактивирана бактериална суспензия, съдържаща метаболитни продукти. Пречистените бактериални алергени са протеини, извлечени от микроорганизми (до 83%) с малка добавка на захари и нуклеинови киселини.
Препаратите са предназначени за откриване на свръхчувствителност на организма към микроорганизмите, от които са получени.
Бактериалните екзотоксини (дифтерия и скарлатина) се използват за определяне на антитоксичния имунитет към дифтерия в реакцията на Шик и към скарлатина в реакцията на Дик.
Дифтериен токсин се приготвя от пречистен екзотоксин, след две години експозиция, чрез разреждане в глицерол-желатинова смес, така че 0,2 ml да съдържа 1/40 Dim за морско свинче. Токсинът се инжектира в доза от 0,2 ml строго интрадермално в средната част на палмарната повърхност на предмишницата. При положителна реакция към токсина (т.е. при липса на антитоксичен имунитет в субекта), взета предвид след 72-96 часа, на мястото на инжектиране се появяват инфилтрат и еритема от 15 до 30 mm. Следователно е необходима допълнителна ваксинация срещу дифтерия.
Децата с отрицателна реакция на Шик (при липса на локални промени поради неутрализиране на инжектирания токсин с антитоксини) не получават допълнителни ваксинации.
Скарлатинният токсин (еритрогенен) е термостабилен нуклеопротеин на стрептококи, консервиран с фенол (0,2%) или мертиолат (в разреждане 1: 10 000). Аленият токсин се дозира в така наречените кожни дози, като една кожна доза се приема за такова количество токсин, което при интрадермално приложение на заек предизвиква възпаление (15-20 mm). За да се определи интензивността на имунитета срещу скарлатина, децата се инжектират стриктно интрадермално скарлатинов токсин в доза от 0,1 ml (една кожна доза за заек). Отчитането на реакцията се извършва след 18-24 часа.
Положителна реакция, показваща липса на имунитет срещу скарлатина, е образуването на еритема на мястото на инжектиране с размери от 20-30 mm или повече с рязко положителна реакция.