Reaginide kui IgE avastamisega sai võimalikuks sensibilisatsiooni tuvastamine in vitro meetoditega. Atoopiliste haiguste kliiniline diagnoos on lubatud ainult spetsialiseeritud laborites. Teatud väärtusega on nii uuritud patsientidele kui ka passiivselt sensibiliseeritud isikutele tehtud nahatestid. Esimest korda reprodutseeris Blackley 1873. aastal õietolmu poolt sensibiliseeritud patsiendi sidekesta ja naha lokaalset allergilist reaktsiooni. Allergiatestimine põhineb asjaolul, et allergeeni väikestes annustes manustades saab esile kutsuda antigeen-antikeha reaktsiooni. Allergeenitesti saab korrata šokiorganitel, eriti allergilise riniidi korral - nina limaskestal, bronhiaalastma korral - bronhidel. Need meetodid on aga töömahukad ja mitte alati ohutud. Kõige kättesaadavamad on nahatestid ja limaskestatestid. Viimaseid peetakse provokatiivseks testiks, kuna need jäljendavad allergeeni loomulikku kehasse tungimise teed.
Nahatestid. Nende määramisel eeldatakse, et atoopiaga patsientidel satub vereringesse märkimisväärne osa antikehi, vaatamata reagiinide kõrgele tootmisele limaskestadel ning hingamisteede ja seedetrakti lümfoidkoes. See on tingitud teiste elundite ja kudede sensibiliseerimise seisundist. Uuringu eesmärk on indutseerida antigeen-antikeha reaktsioon allergeeni väikese annuse lokaalse manustamise teel ilma organismi funktsionaalsete häirete või üldreaktsiooni tekke riskita. Selle meetodi eelised hõlmavad võimalust üheaegselt sisse viia märkimisväärses koguses allergeene.
Sõltuvalt allergeeni manustamise tüübist eristatakse järgmisi teste: süstimise test ja skarifikatsiooni test, intra- ja nahasisene.
Nahatest torkega See on patsiendi esmasel läbivaatusel valitud meetod. Tilk allergeenilahust viiakse eelnevalt antiseptiga töödeldud piirkonda (käsivarre peopesapoolne külg, selg). Punktsioon tehakse lantseti, nõela või kanüüliga. Allergeeni imendumise hõlbustamiseks kasutatakse testi modifikatsiooni - pärast süstimist tõstetakse nahk üles ja süstekohta tehakse kerged sälgud. Punktsioon peab olema pindmine, et mitte põhjustada verejooksu. Katsealade vaheline kaugus on vähemalt 4 cm.Pärast iga testi tuleb instrumenti vahetada või põhjalikult steriliseerida, et välistada valepositiivne reaktsioon. Kontrollideks on ekstraktide valmistamiseks kasutatud lahused (reaktsioon peaks olema negatiivne) ja värskelt valmistatud histamiini lahus naha reaktsioonivõime hindamiseks.
Tulemusi võetakse arvesse 20 minuti pärast. Hindamiskriteeriumiks on mullide ja erüteemi tsooni keskmine läbimõõt.
Skarifikatsiooni test. Naha pinnale tehakse lantseti abil umbes 0,5 cm pikkused sälgud, millesse teatud ettevaatusega (püüdes mitte tekitada verejooksu) sisestatakse allergeen ja hõõrutakse neid kergelt. Reaktsiooni arvestamine on sarnane ülaltooduga. Kergelt tuleb meeles pidada, et skarifikatsiooni käigus on naha erineva raskusastmega kahjustused vältimatud, mistõttu on allergeeni imendumise protsessi raske kontrollida.
Mõlemal testil on mitmeid eeliseid. Seega ei nõua need erikulusid, on suhteliselt ohutud ja valutud. See on eriti oluline väikelastele proovide määramisel.
Nahaakna test- see on tegelikult skarifikatsioonitesti modifikatsioon. Naha pinnale tehakse sälgud, allergeen viiakse sisse ja kaetakse katteklaasiga. 24 tunni pärast eemaldatakse objektiklaas ja värvitakse migreeruvate rakkude tuvastamiseks. Allergilise reaktsiooni näitaja on eosinofiilia üle 5%. Testi puudused hõlmavad asjaolu, et selle tulemused ei ole alati korratavad.
Intradermaalne test on esmane uurimismeetod juhul, kui ei ole viiteid kõrgele sensibiliseerimisele. Tavaliselt tehakse testimine patsiendi õlal või seljal. Nahka töödeldakse alkoholiga ja seejärel süstitakse rangelt intradermaalselt umbes 0,2 ml allergeeniekstrakti. Selleks on mugav kasutada kanüüle nr 18 või 20. Naha kõrge tundlikkuse tõttu ei ole mõnel patsiendil võimalik määrata täpset allergeeni annust. Lisaks on allergeeni suurte annuste kasutamine seotud patsiendi traumaga. Kontrollideks on: lahus ekstrakti valmistamiseks (negatiivne reaktsioon) ja värskelt valmistatud histamiini lahus. 20 minuti pärast saab reaktsiooni tulemusi arvesse võtta. Positiivse testiga kaasneb mullide moodustumine koos hüpereemia tsooniga piki perifeeriat. Positiivne reaktsioon negatiivse kontrolliga on mullide ja hüperemiatsooni moodustumine läbimõõduga vastavalt 7 ja 15 mm. Nahailmingute läbimõõdu ja allergeeni või histamiini kontsentratsioonide näitajate võrdlev analüüs näitas teatud mustrit.
Nahatestide tulemused ja nende tõlgendamine.
1. Lokaalsed reaktsioonid. a) Varajane reaktsioon tekib 10 minuti pärast ja saavutab maksimumi 20-30 minuti pärast (blisteri läbimõõt 1 mm, erüteemi tsoonid - 15 mm). b) Antigeeni kõrgema kontsentratsiooni korral täheldatakse sageli hilist tüüpi reaktsiooni (heinapalaviku, loomakarvadest põhjustatud sensibiliseerimisega). Mõnel uuritud isendil on see tingitud sademete tekkest. On tõestatud, et IgE-klassi antikehad võivad 4-12 tunni pärast põhjustada hilist tüüpi reaktsiooni, millega kaasneb erüteem ja turse, millega kaasneb sügelus ja mõnikord valulikud aistingud. Histoloogiline analüüs näitab eosinofiilide, neutrofiilide ja mononukleaarsete rakkude infiltratsiooni koos tursega. Suure tõenäosusega mängivad rolli sellised tegurid nagu kallikreiin ja FHN-A.
2. Üldised reaktsioonid. Patsientidel täheldatakse sageli fokaalseid reaktsioone, millega kaasnevad põhihaiguse sümptomid. Seda soodustab valmisolek šokiorganite immuunvastuseks. Selline reaktsioon on loomulikult ebasoovitav. Teisest küljest võib selle avaldumist pidada tõendiks selle sensibiliseerimise patogeneetilisest tähtsusest.
Raskeid tüsistuste vorme täheldatakse peamiselt kõrge sensibiliseerimisega. Kõige ohtlikum on anafülaktiline šokk.
Allergeeni valik. Põhimõtteliselt on kolme tüüpi nahateste:
- "Kinnitustest" (sisse tuuakse need allergeenid, millel peaks olema patogeneetiline tähtsus). Sel juhul lähtub arst anamneesi andmetest.
"Otsingu" test on ette nähtud patsientidele, kelle anamneesis pole kinnitust või ülevaatamist vajavaid andmeid. Allergeenide valik ei ole piiratud.
Sensibiliseerimise astme määramine. Taastoodetakse nn nahatiitrimist, st teatud kogus allergeeni sisestatakse provokatiivses testis kasutatava annuse või desensibiliseerimisel algannuse valimiseks, samuti viimase kontrollimiseks. Need indikaatortestid on olulised sobiva allergeeniekstrakti ja annuse valimiseks. Reaktsioonides ärge kasutage aineid, millega patsient ei ole kokku puutunud. Ekstraktide segude kasutamine ei ole välistatud. Seetõttu peaks allergeenitesti testimise läbi viima arst, kes tunneb hästi haiguse ajalugu ja olemust.
Mõelge kõige tavalisematele allergeenide rühmadele.
A) õietolm: maitsetaimed (rebasesaba, siil, bukharnik, kammtarretis, diivanirohi, nõges, aruhein, jahubanaan, hapuoblikas, mitmeaastased aganad); lilled (karikakar, tulerohi, moon, tulp, kuldvits, tšistja, võilill, heinamaa süda, võikull); teravili (rukis); põõsad (kibuvitsamarjad, leedrimarjad, koerroos, sirel, sarapuupähkel); puud (kask, pärn, valge jaaniuss, paju, mänd, lepp, kastan, kirss).
B) Loomade ja inimeste epidermise elemendid: kõõm (jänes, kass, koer, jäär, pull, kits, siga, hobune); suled (hani, part ja kana); inimese kõõm.
C) Kodutolm.
D) Puugid.
E) Hallitusseened: Penicillium, Aspergillus, Mucor, Cladosporium, Hormodendrum, Alternaria.
E) Toidukaubad: mageveekalad (forell, haug, karpkala, linask, koha); mere- ja ookeanikalad (tursk, ruff, heeringas, makrell); liha (sealiha, veiseliha, lambaliha, hobuseliha, kitseliha, linnuliha); piim (lehma- ja kitsepiim, värske ja keedetud), munad (valge ja munakollane); teravili (jahu ja nisukliid, rukis, oder, kaer, mais); puuviljad ja kaunviljad.
Katsereaktsioonide tulemusi mõjutavad järgmised mittespetsiifilised tegurid:
1. Kohalik verevarustus. Külma aastaajal võivad patsiendil tekkida veresoonte häired, sellistel juhtudel on vaja taastada naha temperatuur normaalseks (selleks pühitakse nahk alkoholi või eetriga). Nahatestide soovimatuks tagajärjeks on väljendunud reaktsioon hüpereemia kujul.
2. Allergeeni süstimise koht. Märgitakse, et seljal esile kutsutud reaktsioonid on rohkem väljendunud kui õlal. See aga ei tähenda, et reaktsioon õlal võib olla valenegatiivne. Tulemusi võivad mõjutada ilm, ultraviolettkiirgus ja röntgenkiirgus.
3. Loomulik kokkupuude allergeeniga. Vahetult pärast allergeeni suurtest annustest põhjustatud reaktsioone väheneb antikehade tase veidi. Selle efekti annab ka pikaajaline allergeeni elimineerimine (üle 1 aasta). Võrdluseks, pikaajaline kokkupuude allergeeniga, näiteks rohuhooajal, võib põhjustada reaktsiooni suurenemist.
4. Ravimid. Antihistamiinikumid sobivates annustes võivad testireaktsiooni pärssida, seetõttu tuleks need tühistada 2–7 päeva ja adrenaliini derivaadid - üks päev enne nahateste. Inhalatsiooni teel manustatud isoprenaliinil ei ole märkimisväärset toimet. Eufilliini toime on samuti nõrgalt väljendunud. Terapeutilistes annustes manustatud kortikosteroidid ja AKTH mõjutavad kohest ravivastust vähe. Ainult suured kortikosteroidide annused või nende paikne manustamine võivad reaktsiooni nõrgendada. Täheldati reaktsiooni hilinenud (hilise) faasi pärssimist kortikoidide poolt.
5. Vanus. Võrdlev analüüs näitas, et väikelastel on nahareaktsioonid vähem väljendunud kui täiskasvanutel. Selle põhjuseks pole mitte ainult reagiini madalad kontsentratsioonid. On kindlaks tehtud, et naha passiivse sensibiliseerimise korral sama seerumiga on reaktsioonide raskusaste lastel palju madalam. Madal sensibiliseerituse tase leiti ka lastel 1. eluaastal. Noorte ja keskealiste rühmade vahel reeglina erinevusi ei ole. Ainult osal üle 50-aastastest patsientidest täheldatakse allergeenile reageerimise ja samal ajal spetsiifilise IgE kontsentratsiooni vähenemist.
6. Igapäevased biorütmid võivad mõjutada ka nahatestide tulemuslikkust (reaktsiooni kõikumisi täheldati 5-71% piires keskmisest tasemest). Minimaalseid kõrvalekaldeid täheldatakse umbes kell 11.00, maksimaalseid - kell 23.00. Arvatakse, et see nähtus on seotud hormoonide, eriti 17-hüdroksükortikosteroidide tootmisega.
Kui välistada kõik võimalikud meetodi vead, siis tõestavad nahatestide positiivsed tulemused immunoloogilises mõttes spetsiifilise sensibiliseerimise fakti. Kuid nad ei saa alati haiguse diagnoosi kinnitada. Negatiivne reaktsioon ei välista ka sensibiliseerimise võimalust. Lisaks on reaktsiooni tõsiduse põhjal võimatu teha järeldust selle testi tulemuste patogeneetilise tähtsuse kohta.
Valenegatiivne reaktsioon võib olla tingitud järgmistest vigadest:
Allergeeni aktiivsuse kaotanud ekstraktide säilivusaja ületamine;
spetsiifilise allergeeni puudumine (see kehtib eriti juhul, kui kahtlustate allergiat kodutolmu suhtes);
Allergeeni sissetoomise mittefüsioloogiline meetod (mitu allergeene siseneb kehasse toidu ja ravimitega), negatiivse reaktsiooni korral määratakse provokatiivne test;
Sensibiliseerimise varased staadiumid (allergia kliinilised ilmingud on võimalikud juba haiguse algstaadiumis, kuna sünteesitud reagiinid seonduvad kiiresti rakupinnaga, kuid viimase kontsentratsioon ei pruugi olla positiivse reaktsiooni tekitamiseks piisavalt kõrge);
Immuunvastuse vähenemine, mis on seotud ravimite võtmisega, patsiendi vanus jne. Nendel juhtudel vähenevad ka histamiiniga kontrollproovi näitajad.
Valepositiivse reaktsiooni võivad põhjustada järgmised põhjused:
Allergeenide ärritav toime (tervetel inimestel tehtud nahatestide tulemuste põhjal valiti välja ja soovitati allergeenide optimaalsed individuaalsed annused);
Naha ülitundlikkus (mehaaniline ärritus, urtikaaria, positiivne kontrollreaktsioon).
Anamnestiliste andmete ja nahatestide tulemuste analüüs näitas järgmisi mustreid:
1) Kui nahatest on positiivne ja allergeen on teada, siis on sensibiliseerimise fakt väljaspool kahtlust.
2) Kui reaktsioon on negatiivne ja allergeeni ei tuvastata, siis tõenäoliselt ei ole kõnealune allergeen haiguse põhjustaja.
3) Kui positiivse testi korral pole infot allergeeni kohta, siis tuleks üle vaadata anamneesiandmed ja kontrollida positiivsete reaktsioonitulemuste tõelist põhjust. Teadaolev seisund, mida nimetatakse "latentseks sensibiliseerimiseks". Lisaks säilitavad patsiendid pärast kliinilist taastumist sageli positiivse nahatesti pikka aega. Mõnel juhul tuvastatakse "subkliiniline sensibiliseerimine". Neid positiivse testi võimalikke põhjuseid tuleks kaaluda.
Nahatesti tüsistused. Peamine oht tuleneb allergeeni suurte annuste kasutamisest: kõige tõenäolisem on hiliste ja üldiste reaktsioonide teke. Koos patsiendi seisundi ägenemise ohuga võivad ilmneda kõik allergiliste seisundite sümptomid, sealhulgas anafülaktiline šokk.
Provokatsioonitest on usaldusväärne allergeenide testimise meetod, mille puhul iseloomulikud sümptomid on põhjustatud kahtlustatava aine füsioloogilisel teel manustamisest. Testi erinevad variandid peavad vastama kahele nõudele: 1 - võimalusel tuleb allergeenitesti manustada erinevates annustes vastavale organile, 2 - antigeen-antikeha reaktsiooni hindamine peab olema objektiivne.
Testi tingimuseks on loomuliku kontakti puudumine allergeeniga, kuna vastasel juhul raskendab see oluliselt tulemuste tõlgendamist. Soovitav on, et patsient ei teaks, millist allergeeni talle süstitakse (pimemeetod). Kontroll on test, milles kasutatakse ekstrakti valmistamise lahust (platseebo).
Test, milles on välistatud atoopilise reaktsiooni põhjustaja arvatav allergeen. Tavaliselt pärinevad anamneesiandmetest. Seda testi kasutatakse haiguse kaugelearenenud staadiumide diagnoosimiseks, et määrata kindlaks patsiendi võimalused taastuda.
Nahateste kasutatakse I ja IV tüüpi ülitundlikkusreaktsioonide poolt vahendatud allergiliste haiguste tuvastamiseks. Nahatestide tegemise tehnikat on kirjeldatud A.D. Ado jt metoodilises kirjas. ("Mitteinfektsioosse päritoluga allergeenide kasutamine allergiliste haigustega patsientide spetsiifiliseks diagnoosimiseks ja desensibiliseerimiseks", Moskva, NSV Liidu tervishoiuministeerium, 1969). Nahatestide jaoks kasutatakse standardseid allergeene, mis sisaldavad 10 000 valgu lämmastiku ühikut (PNU) 1 ml kohta. Reeglina asetatakse nahatestid küünarvarre sisepinnale. Sisestage samaaegselt proovid kontrollvedeliku ja histamiiniga. Nahahaiguste korral tehakse testid kahjustustest mõjutamata kohtadele. Praegu kasutatakse järgmisi nahateste: tilk, pealekandmine, torketest, skarifikatsioon, intradermaalne.
kukkumise test
Varem 70% alkoholiga rasvatustatud nahale kantakse tilk standardset allergeeni. Reaktsiooni hinnatakse 20 minuti pärast. Proovi hindamine on näidatud tabelis 15-1.
Kukkumistesti hindamine
Rakenduse test
70% alkoholiga eelnevalt töödeldud nahale kantakse allergeenilahusega niisutatud marli tükk (1 cm3) ja kinnitatakse kleepplaastriga. Reaktsiooni võetakse arvesse pärast 30, 60 min, 6 h, 12 h, 24 h, 48 h, 72 h. Taotlustesti hindamine on näidatud tabelis 15-2.
Rakenduse testi hindamine
torke test
Torketest tehakse spetsiaalse torkelantsetiga. Kasutatav seade võimaldab standardida süstimissügavust (1,0-1,5 mm). Süstimine toimub allergeeni tilga ja kontrollvedeliku kaudu. Torketesti tulemust võetakse arvesse 15-20 minuti pärast. Torketesti skoor on näidatud tabelis 15-3.
Torketestide hindamine.
Skarifikatsiooni test
70% alkoholiga töödeldud küünarvarrele kantakse tilkhaaval 4-5 cm kaugusel üksteisest 0,01% histamiini, kontrollvedelikku ja allergeene (6-10 allergeeni korraga). Kobestiga kantakse iga tilga kaudu kaks paralleelset 4-5 mm pikkust ja 2 mm vahega kriimu. Kriimustused tehakse pealiskaudseks, kahjustamata naha veresooni. 10 minutit pärast naha skarifikatsiooni leotatakse tilgad vatitupsudega. Proove võetakse arvesse 10-20 minuti pärast. Kriimunäidiste hinnang on näidatud tabelis 15-4.
Skarifikatsiooniproovide hindamine.
Tuleb meeles pidada, et skarifikatsioonitestid annavad sageli valepositiivseid reaktsioone.
Intradermaalsed testid
Teostage reeglina mikroobsete allergeenidega. Mittenakkuslike allergeenide puhul viiakse need läbi ainult juhtudel, kui pealekandmis- ja kriimustustestid annavad negatiivse tulemuse ning anamnees viitab selgelt allergiale.
Testi tegemise tehnika on järgmine: pärast küünarvarre või selja naha töötlemist 70° piiritusega insuliinisüstlaga süstitakse nahasiseselt 0,02-0,1 ml allergeeni. Nahasiseselt süstitav allergeen peaks olema 10 korda madalam kui skarifikatsiooni testimisel. Kontrollina süstitakse intradermaalselt kontrollvedelikku ja histamiini lahust. Testi tulemusi võetakse arvesse 20 minuti, 6 tunni, 12 tunni, 24 tunni, 48 tunni möödumisel vastavalt hindamisskaalale, kuna reaktsioonid nakkuslikele allergeenidele võivad toimuda nii koheselt kui ka viivitusega.
Tuleb meeles pidada, et nahasisesed testid on vähem spetsiifilised kui nahatestid ja annavad üsna sageli valepositiivseid ja valenegatiivseid tulemusi. Intradermaalse testimise ajal ei tohiks samaaegne uuritavate allergeenide arv ületada 4-5.
Intradermaalsete testide hindamine
reaktsiooni tulemus | Naha reaktsioon |
|
| 20 minuti pärast | 24-72 tunni pärast | |
| Negatiivne | Nagu kontrolli all | Nagu kontrolli all |
| Kahtlane | Hüpereemia | Kerge hüpereemia ilma kudede infiltratsioonita |
| Nõrgalt positiivne | Papule 4-8 mm ümbritsetud hüperemiaga | Hüpereemia, infiltraat läbimõõduga 5-10 mm |
| Positiivne | Papule 9-15 mm ümbritsetud hüperemiaga | Hüpereemia, infiltraat läbimõõduga 11-15 mm |
| tugevalt positiivne | Papule 16-20 mm, mida ümbritseb pseudopoodiaga hüperemia | Hüpereemia, infiltraat läbimõõduga 16-20 mm |
| väga tugevalt positiivne | Papule üle 20 mm, mida ümbritseb hüperemia pseudopoodia, vesiikulid | Hele hüperemia, infiltraat läbimõõduga üle 20 mm, vesiikulid, lümfangiit |
Allergilised diagnostilised testid - Allergiate diagnoosimise meetodid. Need viiakse läbi pärast seda, kui põhjaliku ajaloo kogumise käigus on tuvastatud kahtlustatavad allergeenid. Proovid tehakse väljaspool haiguse ägenemise faasi ja mitte varem kui 2-3 nädalat pärast ägedat allergilist reaktsiooni, tk. Selle aja jooksul väheneb organismi tundlikkus allergeeni suhtes.
Sõltuvalt kasutatavast tehnikast võivad nahatestid olla otsesed või kaudsed. Otseste nahatestidega süstitakse allergeen intradermaalselt või epidermist torkimise või kratsimise teel kahjustades. Tilgutamise ja manustamise otseste nahatestide korral kantakse allergeen (tavaliselt ravim või aine) tervele nahale tilga või aplikatsioonina. Nahareaktsiooni peetakse positiivseks, kui ilmneb hüperemia, infiltratsioon või punetus. See võib ilmneda 20 minuti jooksul (vahetu reaktsioon), 6-12 tunni pärast (ülemineku tüüpi reaktsioon), 24-48 tunni pärast (hilinenud reaktsioon). Nahareaktsiooni tüüp sõltub allergilise reaktsiooni immunoloogilise mehhanismi olemusest. Erinevat tüüpi otsestest nahatestidest on kõige tundlikum intradermaalne, millele järgneb skarifikatsioon, süstimine, pealekandmine, tilgutamine.
Kaudsed nahatestid hõlmavad Prausnitz-Küstneri reaktsiooni, mille käigus patsiendi vereseerumit manustatakse nahasiseselt tervele inimesele ja pärast antikehade fikseerimist retsipiendi nahal (24 tunni pärast) allergeen süstitakse samasse kohta. Reagiini antikehade olemasolu testitavas seerumis hinnatakse lokaalse nahareaktsiooni tekke põhjal. See reaktsioon ei välista patogeeni ülekandumist vereseerumiga doonori varjatud infektsiooni korral, seega on selle kasutamine piiratud. Reaginantikehade tuvastamiseks on kõige parem kasutada erinevaid immuunreaktsioone – ensüümi immuunanalüüsi jne. Nahatesti tüübi valik sõltub haigusest, eeldatavast tundlikkuse astmest, allergeeni iseloomust ja ka naha reaktsioonivõimest. Teatud ravimite (antihistamiinikumid, rahustid) tarbimine vähendab dramaatiliselt naha reaktsioonivõimet, seetõttu tuleb enne allergoloogilist läbivaatust hoiduda nende ravimite võtmisest 5-7 päeva jooksul.
Allergiliste haiguste diagnoosimisel ei saa täielikult tugineda nahatestidele ja nende tulemusi üle hinnata. Nahateste ja nende tulemuste hindamist viivad läbi ainult spetsiaalselt koolitatud meditsiinitöötajad.
Kui remissiooniperioodil esineb lahknevusi allergilise ajaloo andmete ja nahatestide tulemuste vahel, on näidustatud provokatiivsed testid. Need testid põhinevad allergiliste reaktsioonide reprodutseerimisel allergeeni sisseviimisega elundisse või koesse, mille lüüasaamine on haiguse pildil esikohal. On konjunktiivi, nina ja sissehingamise provokatiivseid teste. Konjunktiivi provokatsiooni test viiakse läbi allergeeni tilgutamisega alumisse sidekesta kotti. Reaktsiooni peetakse positiivseks, kui ilmnevad konjunktiivi hüperemia, pisaravool ja silmalaugude sügelus. Allergilise riniidi ja heinapalaviku puhul tehakse nina provokatiivne test: ühte ninapoolde tilgutatakse allergeen, teise tilgutatakse kontrollvedelikku. Reaktsioon loetakse positiivseks, kui allergeeni tilgutamisel esineb nasaalset hingamist ja sügelust. Bronhiaalastma etioloogiliseks diagnoosimiseks kasutatakse inhalatsiooni provokatiivset testi: aerosooldosaatori abil hingab patsient allergeeni lahust suu kaudu. Reaktsioon loetakse positiivseks, kui kopsude elutähtsus on vähenenud rohkem kui 15%.
Provokatiivsete testide hulka kuuluvad ka külma- ja kuumatestid, mida kasutatakse külma- ja kuumaurtikaaria korral. Selgete haigusnähtude puudumisel tehakse kokkupuudet provotseeriv test. See põhineb patsiendi otsesel kokkupuutel kahtlustatava allergeeniga keskkonnas, kus patsient tavaliselt asub. Selle testi vastand on eliminatsioonitest - väidetava allergeeni väljajätmine toidust, leibkonna allergia all kannatava patsiendi viimine nn allergeenivabasse palatisse jne. Leukotsütopeenilisi ja trombotsütopeenilisi provokatiivseid teste kasutatakse toiduallergiate ja ravimiallergiate diagnoosimine. Nende analüüside aluseks on leukotsüütide ja trombotsüütide arvu vähenemine veres pärast testitava allergeeni manustamist patsiendile.
M o d o d i c h i n g s
1. Ringsadestamise reaktsioonAskoli poolt. Kitsasse väikese koguse lahjendamata sadestava seerumiga tuubi, hoides seda kaldus asendis, kantakse pipetiga aeglaselt piki seina sama kogus Ag-d. ekstraheeritakse keetmise teel erinevatest põllumajanduslikest toorainetest. Et need kaks vedelikku ei seguneks, asetatakse katseklaas ettevaatlikult vertikaalselt. Positiivse reaktsiooni korral katseklaasis ilmub 5-10 minuti pärast seerumi ja uuritava ekstrakti vahelisele piirile hallikasvalge rõngas. Reaktsiooniga kaasneb tingimata seerumi ja antigeeni kontroll.
Ascoli reaktsiooni kasutatakse siberi katku, tulareemia, katku Ag tuvastamiseks. Samuti on see leidnud rakendust kohtumeditsiinis valgu liigi, eelkõige vereplekkide määramiseks sanitaarpraktikas liha, kala, jahutoodete võltsimise ja piimas leiduvate lisandite tuvastamisel. Selle RP miinuseks on sademe (rõnga) ebastabiilsus, mis kaob isegi kergel raputamisel. Lisaks ei saa seda kasutada sademe moodustumisel osaleva Ag kvantitatiivse koostise määramiseks.
Toksiini neutraliseerimise reaktsioonid antitoksilise seerumiga in vitro.
2. Difteeria tekitaja toksilisuse tuvastamine sademereaktsioonisOuchterlony järgi. Reaktsioon kantakse agargeeli süvenditesse Petri tassidele. Geelina kasutatakse hästi pestud läbipaistvat agarit. Ag ja seerum lisatakse agargeelile nii, et neid sisaldavad süvendid oleksid teatud kaugusel. Antikeha ja antigeen üksteise suunas difusioonil ja üksteisega ühendamisel moodustavad 24-48 tunniga immuunkompleksi valge riba kujul. Kompleksse sadestava aine juuresolekul tekivad mitmed ribad. Sel juhul liidetakse seroloogiliselt seotud antigeenide ribad kokku ja heterogeensete ribad ristuvad, mis võimaldab määrata uuritavate ainete antigeense struktuuri üksikasju. Seda kasutatakse laialdaselt eksotoksiine tootvate viiruste ja bakterite põhjustatud haiguste diagnoosimiseks.
Nahatestid on kõige lihtsam ja ohutum meetod toiduallergiate diagnoosimiseks, mis võimaldab mitte ainult põhjuslikult olulisi allergeene tuvastada, vaid ka soovitada üht või teist tüüpi allergilist reaktsiooni, mis on seotud haiguse ägenemisega.
Nahatestide kättesaadavus ei tulene mitte ainult lihtsast ja odavast tehnikast, vaid ka suhteliselt väikesest vastunäidustuste loetelust nende läbiviimiseks. Nahatestide väärtuse ja ohutuse üle vaieldakse kirjanduses laialdaselt. Sellega seoses avaldas Venemaa Lasteallergoloogide ja Immunoloogide Ühing peamised nahatestide sätted, mida allergoloogid ja
Praktilised lastearstid juhinduvad oma töös:
1. Nahatestide läbiviimine on allergoloogi üks peamisi ülesandeid.
2. Nahateste tehakse igas vanuses lastele.
3. Nahateste saab teha peaaegu kõigi meditsiinitööstuses toodetud allergeenidega.
4. Nahateste ei tehta haiguse ägenemise ajal
(atoopilise dermatiidi mittetäielik remissioon ei ole
vastunäidustus).
5. 7 päeva enne nahatesti, ärge võtke
antihistamiinikumid, 2 nädalat enne
paiksed glükokortikoidid nahapiirkonnas, kus testitakse.
6. Teatud allergeenidega nahatestide tegemise vastunäidustuseks on anamneesis anafülaktilised reaktsioonid nendele või ristreaktiivsetele allergeenidele.
Eriti sageli tekib küsimus, millises vanuses saab
teha nahateste? Naha testimisel vanusepiirangut ei ole. Siiski tuleb meeles pidada, et alla kaheaastastel lastel on naha reaktiivsus vähenenud, mistõttu on nende proovide tundlikkus väiksem kui täiskasvanutel.
Sõltuvalt allergeeni sisestamise tehnikast on olemas torketestid, skarifikatsiooni-, nahasisesed ja aplikatsioonitestid (Patch-Te81). Venemaal kasutatakse allergiate diagnoosimiseks endiselt laialdaselt skarifikatsiooniteste, kuigi Euroopa Allergoloogia ja Kliinilise Immunoloogia Akadeemia eksperdid ei soovita neid sagedaste valepositiivsete reaktsioonide ja vähese teabesisalduse tõttu kasutada. Praegu on peamine soovitatav nahatesti meetod torketest. Torketesti metoodika on standardiseeritud, mis teeb tulemuste võrdlemise lihtsaks, isegi kui need on saadud erinevates kliinikutes. Sellel allergiadiagnostika meetodil on nahatestide nahatestide ees mitmeid eeliseid:
> vähem traumaatiline;
> selle läbiviimisel satub organismi minimaalne kogus allergeene, mille tõttu patsiendile tehakse suurem hulk proove;
> valepositiivseid reaktsioone esineb palju harvemini;
> süsteemsete reaktsioonide väike tõenäosus.
Meie uuringute kohaselt ületab torketestide infosisu oluliselt kriimustustestide infosisu (joonis 24).
Võttes arvesse asjaolu, et naha testimine torketesti meetodil pole meie riigis laialt kasutusel, peatume sellel tehnikal lähemalt. Torketest tehakse küünarvarre või ülaselja sisepinnal. Eeltöödeldud nahale kantakse 70% alkoholilahusega tilk test-kontrollvedelikku, histamiini lahust (negatiivne ja positiivne kontroll) ja allergeeniekstrakte üksteisest 2-2,5 cm kaugusel, vähemalt 5 mm kaugusel. randme ja 3 cm kaugusel kubitaalsest süvendist. Eraldi kobestite või prik-lantsettidega tehakse madalad süstid nurga all läbi tilga (ilma
naha veresoonte kahjustus) kuni 1-1,5 mm sügavusele. Reaktsiooni hinnatakse 10-15 minuti pärast (adekvaatse vastusega kontrollile). Vastus nahatraumale ei ole suurem kui 2 mm, seega on sensibiliseerimise tunnuseks papuli suurus üle 2 mm ja/või hüpereemia üle 3 mm. Torketesti tulemuse tõlgendus on toodud tabelis 7. Selgus, et torketesti käigus tekkinud reaktsiooniala suurenemisel on selge korrelatsioon toiduallergia kliiniku tõenäosusega.
Vastavalt reaktsiooni toimumise ajale võib oletada üht või teist tüüpi immunopatoloogilist alust allergilise reaktsiooni vallandamiseks. IgE-vahendatud reaktsioonid ilmnevad kohese (10-30 minuti pärast) nahareaktsioonina, immunokompleksreaktsioonid ilmnevad 6-12 tunni pärast, hilinenud - 24-48 tunni pärast.
Viimasel ajal on toiduallergia hilinenud tüübi uurimisel üha sagedamini välja toodud “uue” tehnika – toidukaupade pealekandmistestid (Liopy-Patch-me81).
Vastavalt tehnikale tehakse neid rakendustestidena, kuid looduslike toodetega, nagu nisu, piim, muna, soja. Atoopilise dermatiidi, ösofagiidi ja enterokoliidiga laste läbivaatuse programmi on soovitatav lisada pa!ch test. E. laguuni (1995) töös on näidatud, et pa!sh test on negatiivne, kui allergiline reaktsioon tekib esimese kahe tunni jooksul pärast provokatsiooni, ja positiivne - hilinenud reaktsioonide korral. C. Koerra (2001) uuringus märgiti, et positiivse pa!cb testi ja positiivsete IgE antikehade tiitrite korral on korrelatsioon provokatiivse testiga ligi 100%. Seetõttu peetakse meetodit väga paljulubavaks, kuid hetkel ei ole nende proovide metoodika veel standarditud, mistõttu tuleb sellesuunalisi uuringuid jätkata.
Intradermaalseid teste kasutatakse peamiselt sensibiliseerimise tuvastamiseks bakteriaalse ja seente päritolu allergeenide suhtes. Toiduallergeenidega tehakse neid ainult siis, kui nahatestid on negatiivsed või küsitavad ning anamnees on selgelt positiivne. Siiski tuleb arvestada, et see testimine suurendab tüsistuste riski.
Nahatestide diagnostilise väärtuse osas puudub üksmeel, eriti sõltuvalt toiduallergeenist või toiduallergia kliinilisest vormist. Toiduallergiaga patsientide uurimine näitas, et toiduainete positiivsete nahatestide protsent määratakse kõige sagedamini 3-7-aastastel lastel, mõnevõrra harvem vanematel kui 7-aastastel ja alla 3-aastastel lastel. Toiduallergia kliinilistest vormidest määratakse nahatestide positiivsete tulemuste protsent sagedamini dermorespiratoorse sündroomiga patsientidel ja palju harvemini atoopilise dermatiidiga patsientidel. Peamised nahatestide probleemid on järgmised:
1. Valenegatiivsed testitulemused, mille põhjuseks on:
> IgE-vahendatud reaktsioonide puudumine;
> pseudoallergilised reaktsioonid;
> väike hulk uuritud allergeene;
> madala kvaliteediga allergeenid;
> naha reaktiivsuse vähenemine (varane lapsepõlv).
2. Valepositiivsed testitulemused, mille põhjused on järgmised:
> pseudoallergilised reaktsioonid (muutused allergeenide omadustes, sama allergeeni erinevate kontsentratsioonide kasutamine);
> naha ülitundlikkus;
> ristreageerivad allergeenid (eriti tüüpilised samasse liiki kuuluvatele allergeenidele: piim – veiseliha; muna – kana).
Meie enda uuringute tulemuste analüüs näitas, et nahatorketestide ja anamneesi diagnostiline tähtsus erinevate allergeenide suhtes positiivsete provokatiivsete testidega on erinev (joon. 25). Nahatestide kõrgeim infosisaldus on tüüpiline kõrgekvaliteedilistele allergeenidele (enamasti termostabiilsed), nagu lehmapiim, kanamunad, kala, nisu, pähklid. Ja leidsime täiesti erineva diagnostilise tähtsuse nahatestidel taimede allergeenide (peamiselt termolabiilsete), näiteks puu- ja köögiviljade puhul. Patsientidel, kelle nahatestide tulemused nende allergeenide suhtes olid positiivsed, olid provokatiivsed testid enamasti negatiivsed. Seda on üldiselt täheldatud patsientidel, kellel on samaaegne õietolmu sensibiliseerimine, mis on seletatav õietolmu esinemisega
ühised antigeensed tegurid õietolmu allergeenide ja toiduainete vahel, mis põhjustavad ristallergilisi reaktsioone.
| kana |
| - proovid + näidised |
Nahatestimine on lihtne ja usaldusväärne meetod spetsiifilise IgE tuvastamiseks. Tehke naha - punktsioon ja skarifikatsioon - ja intradermaalsed testid. Nahatestide positiivsed tulemused (erüteem ja villid allergeeni süstekohas) on diagnostilise väärtusega ainult koos anamneesi, füüsikaliste ja laboratoorsete uuringute andmetega.
Näidustused ja allergeenide valik. Nahatestide peamine näidustus on allergeenide tuvastamine, millega kokkupuude põhjustab haigust. Testimiseks allergeenide valikul tuleks arvestada nendega kokkupuute tõenäosust antud piirkonnas (tuleb tähele panna, et allergiat tekitav õietolm on teatud piirkondadele omane ning mikromiitid, hallitusseened ja loomade epidermis on kõikjal ühesugused. USA-s on allergeenide diagnostilised ja terapeutilised preparaadid saadaval kontsentreeritud või lahjendatud ekstraktidena.
Olemas on allergeenide diagnostilised preparaadid naha- ja intradermaalsete testide jaoks. Kontsentreeritud allergeeniekstraktide säilivusaeg on 2-3 aastat. See sõltub ravimite kontsentratsioonist ja nende säilitustemperatuurist. Säilitustemperatuuril 2-8 * C vahekorras 1:100 lahjendatud ekstraktid säilitavad oma omadused kuni 1 aasta ning vähem kontsentreeritud (1:1000) kaotavad oma aktiivsuse mõne nädala või kuu pärast. Sellega seoses tuleb allergeenipreparaate, eriti lahjendatud, regulaarselt ajakohastada. Ravimid, mida doseeritakse AE korral, samuti nõelavad putukamürgid ja muud allergeenid, mida doseeritakse mikrogrammides, säilivad kõige paremini lüofiliseeritud kujul.
Ettevaatusabinõud:
Bronhospasmi ajal ei tohi nahateste teha.
Enne intradermaalset testi tuleb teha nahatest, kuna nahatestiga saab tuvastada ülitundlikkust minimaalse süsteemse reaktsiooni riskiga.
Kuna nahatestide ajal on võimalik anafülaktiline šokk, peaksid hädaabivahendid alati käepärast olema.
Nahateste võib teha kogenud õde või laborant, kuid alati arsti juuresolekul.
Nahateste on kõige parem teha seljal, kuna siin saab korraga testida mitut allergeeni.
Tehnika.
Kirjavahemärkide testid:
Nahk puhastatakse 70% isopropüül- või etüülalkoholiga. Et villid kokku ei läheks, peaks kõrvuti asetsevate punktsioonide vahe olema vähemalt 2 cm Torkekohad on märgistatud, iga viies on nummerdatud (see hõlbustab tulemuste salvestamist). Igasse sihtpunkti kantakse tilk allergeeniekstrakti lahjenduses 1:10, 1:20 või lahjendamata standardpreparaati ja nahk torgatakse. Naha augustamisseadmed peaksid olema mugavad, odavad, ühekordselt kasutatavad ja tagama standardse torkesügavuse. Tavaliselt kasutatakse steriilseid 26 G nõelu, steriilseid õmblusnõelu, steriilseid Morrow Browni nõelu ja plastikust Dermapik nõelu. Nõel lastakse 45 * nurga all läbi allergeeniekstrakti tilga ja torgatakse nahk läbi, et verd välja ei tuleks. Nõela välja võttes tõstke nahk kergelt üles. Nõela ei saa uuesti kasutada, see visatakse kohe spetsiaalsesse konteinerisse. Morrow Browni nõelte ja sarnaste seadmete teraviku pikkus on 1 mm, mis tagab standardse torkesügavuse. Dermapiku nõelte otsas on allergeen. 15-20 minutit pärast punktsiooni kontrollige, kas on tekkinud erüteem ja villid. Olles mõõtnud väikseima ja suurima mullide läbimõõdu, arvutage keskmine väärtus millimeetrites. Kui mull, mille läbimõõt on üle 10 mm, ilmub vähem kui 15 minutit pärast punktsiooni, eemaldatakse allergeen ettevaatlikult nahalt.
Reaktsiooni mittespetsiifilisele ärritusele hinnatakse lahustiga negatiivse kontrollprooviga. Tavaliselt on selleks fosfaatpuhverdatud soolalahus (pH 7,4), millele on lisatud 0,4% fenooli (bakterite kasvu pärssimiseks).
Urinaarse dermograafiga patsientide nahatestid loetakse positiivseks, kui reaktsioon allergeenile on tugevam kui reaktsioon lahustile.
Positiivne kontrollproov asetatakse 0,1% histamiini lahusega. Kontrollproovi võtmise koht tuleks eemaldada kohast, kus ülejäänud proovid võeti. Positiivset kontrolltesti (hinnanguga "+++") kasutatakse allergeenidega tehtud testide tulemuste hindamiseks ning see võimaldab teil tuvastada ka vähenenud nahareaktiivsust, mida täheldatakse lastel, eakatel ja H1-blokaatoreid kasutavatel patsientidel.
Multitest-aplikaator on ühekordselt kasutatav seade torketestide tegemiseks, mis võimaldab üheaegselt sisestada erinevaid allergeene. Selle seadmega saadud tulemused on kooskõlas intradermaalsete testide, radioallergosorbendi testi ja ajaloo andmetega. Aplikaatori peamine eelis on see, et see võimaldab maksimaalselt ühtlustada nahatestide tingimusi (naha punktsiooni sügavus, punktsioonide vaheline kaugus, allergeeni annus), peamiseks puuduseks on kõrge hind.
Skarifikatsioonitestid on vähem tundlikud kui punktsioonitestid ja võtavad kauem aega.
Intradermaalsed testid viiakse läbi kaheldavate punktsioonitestide tulemustega. Intradermaalsete testidega positiivse reaktsiooni saamiseks on vaja allergeeni väiksemat annust. Positiivse punktsioonitesti põhjustanud allergeen võib intradermaalselt manustatuna põhjustada väljendunud lokaalse ja isegi süsteemse reaktsiooni. Kui positiivseid tulemusi annab vähem kui viis punktsioonitesti, võib koheselt teha nahasisese testi. Kui positiivseid punktsiooniteste on rohkem, tehakse intradermaalsed testid järgmisel päeval. Süsteemse reaktsiooni vältimiseks viiakse erinevatel päevadel läbi nahasisesed testid ristreaktiivsete allergeenidega, eriti taimeekstraktidega. Allergeenide valik, võttes arvesse klimaatilisi ja geograafilisi tingimusi ning anamneesi andmeid, võimaldab vähendada proovide arvu miinimumini. Intradermaalseid teste toiduallergeenidega ei tehta.
Intradermaalsed testid:
Intradermaalsete testide jaoks kasutatakse allergeeniekstrakte lahjenduses 1:100. Positiivse kontrollina kasutatakse 0,01% histamiini lahust, mille reaktsioon on hinnanguliselt "+++", ja lahustit kasutatakse negatiivse kontrollina. Vahemaa allergeeni süstekohtade ja kontrollproovide vahel peaks olema suurem kui torketestide tegemisel.
Intradermaalsete testide jaoks kasutage küünarvarre sisepinna ülemist kolmandikku või õla välispinda. 2–5-aastastel lastel on mugavam allergeenid seljanahasse viia.
Nahk puhastatakse alkoholiga ja märgitakse süstekohad, mille vaheline kaugus peab olema vähemalt 2,5 cm.
0,1 ml allergeeniekstrakti tõmmatakse ühekordselt kasutatavasse steriilsesse tuberkuliinisüstlasse. Kuna mullide ilmumist intradermaalse õhu süstimise ajal võib pidada positiivseks reaktsiooniks, on vaja õhumullid süstlast täielikult eemaldada.
Nahk venitatakse ja nõel sisestatakse 45 * nurga all, lõigatakse alla. Nõela lõige peab olema täielikult naha sisse sukeldatud.
Pärast ligikaudu 0,02 ml lahuse sisestamist peaks moodustuma 1-3 mm läbimõõduga papul. Kui lahus satub naha alla või voolab välja, siis papule puudub. Sel juhul viiakse allergeen uuesti teise kohta.
Reaktsiooni hinnatakse 15-30 minuti pärast. Tulemuste hindamiseks on kaks võimalust. Üks neist mõõdab erüteemi ja villi maksimaalset ja minimaalset läbimõõtu ning arvutab seejärel välja keskmise väärtuse, kuna nahatestide tulemuste hindamisel mõõdab teine ainult maksimaalset läbimõõtu. Villi piiride nähtavamaks muutmiseks pigistatakse selle ümber olevat nahka kahe sõrmega. Tulemuste hindamisel pöörake tähelepanu villi kujule. Kui mulli piirid on ebaühtlased, märgitakse see uuringuprotokolli.
Mõned autorid eelistavad esmalt lisada allergeenide lahjendatud lahuseid, näiteks 1:100 000, ja seejärel lahuseid, mille kontsentratsiooni suurendatakse järjest 10 korda. Iga allergeeni puhul aktsepteeritakse maksimaalne lubatud annus; reaktsiooni puudumisel selle saavutamisel loetakse proov negatiivseks.