kana embrüo kana embrüo
(CE) - kana embrüo embrüonaalse arengu erinevatel etappidel. Mikrobioolis. praktikat kasutatakse viiruste, riketsia ja mõnikord bakterite isoleerimiseks, kasvatamiseks ja tuvastamiseks. Laboratoorseks otstarbeks valitakse värsked, väetatud, hästi läbipaistvad ja pragudeta EC-karbid. Inkubeerimine toimub statiivi pesades muna tömbi otsaga hästi ventileeritavates inkubaatorites või termostaatides temperatuuril 37–37,5 ° C, suhteline õhuniiskus 63–65%. Nakatumiseks valitakse välja 4-13 päeva vanused embrüod, millel on väljendunud veresooned, munakollane ja liikuv vari. Enne nakatumist töödeldakse munakoori alkoholiga, põletatakse ja süstekohas (sageli õhukambri kohal) määritakse 2% joodi tinktuuriga. Materjal või uurimus. to-ru viiakse, avades või mitteavades kesta, munakollase kotti (rickettsia), allantoisi või amnioni õõnsustesse (enamik viirusi), kantakse koorioni-allantoisi membraanile. Harvemini süstitakse to-ru embrüo kehasse või intravenoosselt. Nakatunud EC-d asetatakse termostaadi tingimustele ja perioodideks, mis sõltuvad mikroobi tüübist ja uuringu eesmärkidest. Mõningaid andmeid nakatumise tulemuste kohta saab EÜ välise uurimisega mikroskoobi all (soonde süstimine, liikuvuse kaotus jne). Kuid enamikul juhtudel avatakse CE. Selleks lõigatakse pärast alkoholi ja joodi tinktuuriga töötlemist õhukotti, allantoisi ja seejärel Pasteuri pipeti või süstlaga amnionivedelik ära, vältides veresoonte ja munakollase kahjustamist. kotike. Embrüo ja koorionallantoidne membraan eemaldatakse kestast, asetatakse steriilsetesse tassidesse, pestakse steriilse destillaadiga. kasta ja kontrollida. Embrüo ja selle vedelike uurimise edasine käik sõltub mikroobi või viiruse tüübist ja katse eesmärkidest.
(Allikas: Mikrobioloogia terminite sõnastik)
Vaadake, mis on "Chicken Embryo" teistes sõnaraamatutes:
EMBRÜOTOKSILISUS- embrüotoksilisus, füüsikaliste, bioloogiliste, keemiliste ja muude mõjurite võime avaldada negatiivset mõju arenevale embrüole. Erinevate ainete embrüotoksiline toime selgub kokkupuutel emasloomadega ... ... Veterinaarentsüklopeediline sõnaraamat
"Kanad" suunab siia; vaata ka teisi tähendusi. ? Kodukana ... Wikipedia
Kanad Kanad on iga õue kaunistus Teaduslik klassifikatsioon Kuningriik: Loomad Tüüp: Akordide klass ... Wikipedia
Koostanud: õpetaja Ugysheva Sh.E.
slaid 3
Viiruste struktuur
slaid 4
Viiruste struktuur A - lihtviirus B - kompleksviirus
slaid 5
Ohtlikkuse astme järgi jagunevad viirused nelja rühma: I rühm: Ebola, Lassa, Marburgi, Machupo, rõugete ja B-hepatiidi viiruse (ahvid) patogeenid. II rühm: arboviirused, mõned arenaviirused, marutaudiviirused, inimese C- ja B-hepatiidi viirused, HIV. III rühm - gripiviirused, poliomüeliit, entsefalomüokardiit, vaktsiinia. IV rühm - adenoviirused, koronaviirused, herpesviirused, reoviirused, onkoviirused.
slaid 6
Slaid 7
Viiruste klassifitseerimise põhimõtted Nukleiinhappe tüüp, struktuur, replikatsioonistrateegia Mõõtmed, morfoloogia, virioni sümmeetria, kapsomeeride arv, superkapsiidi olemasolu. Spetsiifiliste ensüümide, eriti RNA ja DNA polümeraaside, neuraminidaasi olemasolu Tundlikkus füüsikaliste ja keemiliste mõjurite, eriti eetri suhtes Immunoloogilised omadused Loomulikud ülekandemehhanismid Tropism peremeesorganismi, selle kudedesse ja rakkudesse Patoloogia, inklusioonide moodustumine Haiguste sümptomatoloogia.
Slaid 8
Viiruste klassifikatsioon (RNA-d sisaldavad)
Slaid 9
Viiruste klassifikatsioon (DNA-d sisaldavad)
Slaid 10
Viiruste keemiline koostis Viiruste koostis sisaldab nukleiinhapet, valku, lipiide, glükolipiide, glükoproteiine. Need sisaldavad alati ühte tüüpi nukleiinhapet (DNA või RNA), mis moodustab 1–40% virioni massist. Viiruse genoomid sisaldavad teavet, mis on piisav vaid mõne valgu sünteesiks. Nende mass ulatub 10-15 mg-ni, mis on 1 miljon korda vähem kui rakkudes, ja pikkus kuni 0,093 mm Nukleotiidipaaride arv ulatub 3150-st (B-hepatiidi viirus) kuni 230 000-ni (variola viirus). Viiruste valgud (70-90%) jagunevad struktuurseteks ja mittestruktuurseteks. Struktuursed - valgud, mis on osa küpsetest rakuvälistest virioonidest. Nad täidavad mitmeid olulisi funktsioone: - kaitsevad nukleiinhapet väliste kahjustuste eest - suhtlevad tundlike rakkude membraanidega - tagavad viiruse tungimise rakku - omavad RNA ja DNA polümeraasi aktiivsust jne. Need: - reguleerivad viiruse genoomi ekspressiooni - on viirusvalkude eelkäijad, mis võivad pärssida raku biosünteesi. Sõltuvalt asukohast virionis jagunevad valgud kapsiidiks, superkapsiidiks, maatriksiks, tuumvalkudeks ja nukleiinhappega seotud valkudeks. Lipiidid (15-35%) sisalduvad kompleksviirustes ja on osa superkapsiidmembraanist, moodustades selle topeltlipiidikihi. Nad: - stabiliseerivad viiruse ümbrist - kaitsevad virioonide sisekihte väliskeskkonna hüdrofiilsete ainete eest - osalevad virioonide valguvabastamises.
slaid 11
viiruste paljunemine. Selle iseärasused seisnevad selles, et genoome esindavad nii RNA kui DNA, need on struktuurilt ja kujult mitmekesised, peaaegu kõik viiruse RNA-d on võimelised paljunema raku DNA-st sõltumatult.viiruse valgud on ruumis ja ajas katki: nukleiinhapped replitseeruvad raku tuumas, valgud tsütoplasmas ja tsütoplasmaatilise membraani sisepinnale võib koguneda terved virioonid. Viiruse paljundamine on ainulaadne süsteem võõrinformatsiooni taasloomiseks eukarüootsetes rakkudes ja tagab rakustruktuuride absoluutse allutamise viiruste vajadustele. Viiruste paljunemisel eristatakse mitmeid etappe. Varasemate hulka kuulub viiruste adsorptsioon raku pinnal, tungimine (penetratsioon) rakku ja lahtiriietumine (deproteiniseerumine). Hilised etapid (viiruse genoomi strateegia) hõlmavad viiruse nukleiinhapete sünteesi, valgusünteesi, virioni kokkupanekut ja viirusosakeste vabanemist rakust.
slaid 12
Viiruste kinnitumine rakupinnale toimub kahe mehhanismi abil: mittespetsiifiline ja spetsiifiline. Mittespetsiifilise määravad elektrostaatilise interaktsiooni jõud, mis tekivad viiruste pinnal olevate keemiliste rühmade ja erinevat laengut kandvate rakkude vahel. Spetsiifiline mehhanism (pöörd- ja mittepöörduv adsorptsioon) on eelnevalt määratud komplementaarsete viiruse ja raku retseptoritega. Neil võib olla valk, süsivesikud, lipiidid. Näiteks gripiviiruste retseptoriks on siaalhape. Adsorptsioonikohtade retseptorite arv võib ulatuda 3000-ni. Viiruste pinnal paiknevad retseptorid tavaliselt süvendite ja pragude põhjas. Viiruste tungimine rakku toimub retseptori endotsütoosi (viropeksi variant) mehhanismi kaudu rakumembraanide spetsiaalsetel osadel, mis sisaldavad spetsiaalset suure molekulmassiga plokki - klatriini. Membraanid tungivad sisse ja tekivad klatriiniga kaetud rakusisesed vakuoolid. nende arv võib ulatuda 2000-ni. Vakuoolid, ühinedes, moodustavad retseptosoomid ja viimased ühinevad lüsosoomidega. Viiruste pinnavalgud interakteeruvad lüsosoomide membraanidega ja nende nukleoproteiin siseneb tsütoplasmasse. Viiruste rakku tungimiseks on aga veel üks mehhanism – membraanifusiooni esilekutsumine. See tekib spetsiaalse viiruse sulandvalgu tõttu (F- fusioonist - fusioon). Selle protsessi tulemusena integreerub viiruse lipoproteiini ümbris rakumembraaniga ja selle genoom siseneb rakku. Sellist valku on tuvastatud gripi, paragripi, rabdoviiruste ja teiste puhul.
slaid 13
Virioonide lahtiriietumine on mitmeetapiline protsess, mille käigus vabaneb nende nukleiinne aparaat, kaovad kaitsekestad, mis pärsivad genoomi ekspressiooni. See esineb spetsialiseeritud piirkondades - lüsosoomides, Golgi aparaadis. Paljunemise hilised etapid on suunatud viiruse nukleiinhapete ja valkude sünteesile. Replikatsioonimehhanism (viiruse genoomide moodustumine, mis on prekursori täpne koopia) sõltub nukleiinhappe omadustest. Erinevat tüüpi viiruste puhul on see erinev. RNA-d sisaldavate viiruste replikatsioon järgib sarnaseid mustreid. IRNA sünteesitakse ema RNA-l ja RNA vahepealsed vormid toimivad viiruse genoomi sünteesi mallina. Transkriptsioon on teabe (maatriksi) RNA moodustamise protsess. See toimub spetsiaalsete ensüümide, mida nimetatakse DNA- või RNA-sõltuvateks RNA polümeraasideks, abil. DNA viirustel on need rakulise päritoluga ensüümid, samas kui RNA viirustel on oma viirusspetsiifilised transkriptaasid. Translatsioonifaasis loetakse messenger-RNA-st geneetiline teave ja tõlgitakse see aminohapete järjestusse. Protsess toimub ribosoomides. RNA molekulid liiguvad ribosoomides vastavalt tripleti koodi järjestusele, mille tunnevad ära ülekande-RNA-d. Viimaseid kantakse spetsiaalsetes aminohapete sektsioonides.
Slaid 14
slaid 15
slaid 16
Viiruste kasvatamine Kana embrüod vanuses 6-12 päeva. Nakatumise meetodid - avatud, suletud
Slaid 17
Viiruste kultiveerimine Rakukultuurid: - inimese embrüote, ahvide neerude, kanaembrüo fibroblastide jne esmased trüpsiinitud kultuurid; võimeline kasvama mitmel käigul teisese kultuurina; siirdatud rakud; need on rakukultuurid, mis on omandanud piiramatu kasvu ja paljunemise võime; Neid saadakse kasvajatest või inimese või looma normaalsetest kudedest, millel on muutunud karüotüüp. HeLa (emakakaela kartsinoom) Hep-2 (inimese kõri kartsinoom), HF (inimese suuõõne kartsinoom), RD (inimese rabdomüosarkoom), RH (inimese embrüonaalne neer), Vero (roheline ahvi neer), SPEV (sea embrüo neer), VNK- 32 (Süüria hamstri neer). Rakukultuurid diploidsed rakud; need on sama tüüpi rakukultuurid, neil on diploidne kromosoomide komplekt ja need on laboritingimustes võimelised taluma kuni 100 passaaži. Need on mugav mudel viiruste vaktsiinipreparaatide saamiseks, kuna need on vabad võõrviirustega saastumisest, säilitavad passaažide ajal algse karüotüübi ja neil puudub onkogeenne toime. Kõige sagedamini kasutatakse kultuuriliine, mis on saadud inimese embrüonaalsetest fibroblastidest (WI-38, MRC-5, MRC-9, IMR-90), lehmadest, sigadest, lammastest jms. Rakukultuure säilitatakse külmutatult.
Slaid 18
Rakukultuuride või nende kasvu toetamiseks kasutatavad söötmed on looduslikud või sünteetilised (kunstlikud). Looduslik sööde - veiste vereseerum, vedelikud seroossetest õõnsustest, piima hüdrolüüsi tooted, erinevad hüdrolüsaadid (5% hemohüdrolüsaat, 0,5% laktoalbumiini hüdrolüsaat) või koeekstraktid. Nende keemiline koostis aitab luua tingimusi, mis on sarnased inimkehas eksisteerivatega. Selliste kandjate oluline puudus on nende mittestandardne olemus, kuna nende koostisesse kuuluvate komponentide kvalitatiivne ja kvantitatiivne koostis võib muutuda. Sünteetilistel toitainetel seda puudust ei ole, kuna nende keemiline koostis on standardne, kuna need saadakse kunstlikes tingimustes erinevate soolalahuste (vitamiinid, aminohapped) kombineerimisel. Nende kõige sagedamini kasutatavate lahuste hulka kuuluvad sööde 199 (primaarsete trüpsiinitud ja siirdatavate rakukultuuride kultiveerimine), Eagle sööde (sisaldab minimaalset aminohapete ja vitamiinide komplekti ning seda kasutatakse diploidsete ja siirdatavate rakuliinide kultiveerimiseks), EagleMEM sööde (eriti rakukultuuride kasvatamine). nõudlikud rakuliinid), lahus Hanks, mida kasutatakse söötme valmistamiseks, rakkude pesemiseks jne.
Slaid 19
Slaid 20
slaid 21
Laboriloomade nakatumine. Arvukalt laboriloomi kasutatakse viroloogias laialdaselt viiruste eraldamiseks ja identifitseerimiseks, spetsiifiliste viirusevastaste seerumite saamiseks, viirushaiguste patogeneesi erinevate aspektide uurimiseks ning haiguste vastu võitlemise ja ennetamise viiside väljatöötamiseks. Kõige sagedamini kasutatakse erinevas vanuses (kahepäevaseid) valgeid hiiri, valgeid rotte, merisigu, küülikuid, maaoravaid, puuvillarotte, ahve jt.
slaid 22
Loomade nakatamiseks on erinevaid viise, olenevalt viiruste tropismist, haiguse kliinilisest pildist. Testitavat materjali võib manustada: - suu kaudu - hingamisteedesse (sissehingamine, nina kaudu) - dermaalselt - intradermaalselt - subkutaanselt, intramuskulaarselt - intravenoosselt - intraperitoneaalselt - intrakardiaalselt - karmistunud sarvkestale - silma eeskambrisse - ajju.
slaid 23
slaid 24
Slaid 25
slaid 26
Bakteriofaagid (faagid) (teisest kreeka keelest φᾰγω - "ma õgin") on viirused, mis nakatavad valikuliselt bakterirakke. Kõige sagedamini paljunevad bakteriofaagid bakterite sees ja põhjustavad nende lüüsi. Bakteriofaag koosneb reeglina valgukestast ja üheahelalise või kaheahelalise nukleiinhappe (DNA või harvemini RNA) geneetilisest materjalist. Osakeste suurus on ligikaudu 20 kuni 200 nm. Frederick Twort'ist sõltumatult teatas Prantsuse-Kanada mikrobioloog D'Herelle Felix bakteriofaagide avastamisest 3. septembril 1917. aastal. Koos sellega on teada, et Vene mikrobioloog Nikolai Fedorovitš Gamaleja täheldas 1898. aastal esimest korda bakterite (siberi katku) lüüsi nähtust siirdatud aine mõjul. Elutsükkel Parasvöötme ja virulentsetel bakteriofaagidel on bakterirakuga suhtlemise algfaasis sama tsükkel. Bakteriofaagide adsorptsioon faagispetsiifilistel rakuretseptoritel. Faagi nukleiinhappe süstimine peremeesrakku. Faagide ja bakteriaalsete nukleiinhapete koosreplikatsioon. Raku pooldumine. Lisaks võib bakteriofaag areneda kahe mudeli järgi: lüsogeensel või lüütilisel teel. Mõõdukad bakteriofaagid pärast rakkude jagunemist on profaagi olekus (lüsogeenne rada). Virulentsed bakteriofaagid arenevad Lytic mudeli järgi: Faagi nukleiinhape juhib faagi ensüümide sünteesi, kasutades selleks bakteri valke sünteesivat aparaati. Faag ühel või teisel viisil inaktiveerib peremeesorganismi DNA ja RNA ning faagiensüümid lõhustavad selle täielikult; Faagi RNA "allutab" valgusünteesi rakumehhanismi. Faagi nukleiinhape replitseerib ja juhib uute ümbrisvalkude sünteesi. Uued faagiosakesed moodustuvad faagi nukleiinhappe ümber oleva valgu kesta (kapsiidi) spontaanse iseseisvumise tulemusena; faagi RNA kontrolli all sünteesitakse lüsosüüm. Rakkude lüüs: rakk puruneb lüsosüümi mõjul; vabaneb umbes 200-1000 uut faagi; faagid nakatavad teisi baktereid. 1 - pea, 2 - saba, 3 - nukleiinhape, 4 - kapsiid, 5 - "krae", 6 - sabavalgu ümbris, 7 - sabafibrill, 8 - ogad, 9 - basaalplaat
Slaid 27
Kana embrüo nakatumine Kana embrüot kasutatakse viiruste, mükoplasmade kasvatamiseks. Kasutage embrüoid 8-14 päeva vanuselt, olenevalt viiruse tüübist ja nakatumisviisist; koorioni-allantoisi membraanile, allantoisi ja amnioni õõnsustesse, munakollasesse kotti. Enne nakatumist tehakse ovoskoobis kindlaks embrüo elujõulisus ja õhukoti piirid märgitakse pliiatsiga kestale. Kana embrüote nakatamine toimub karbis rangelt aseptilistes tingimustes, kasutades keetmisega steriliseeritud instrumenti. Õhuruumi kohal olev kest pühitakse piiritusega, põletatakse leegis, määritakse 2% joodilahusega, hõõrutakse uuesti piiritusega ja põletatakse. Viiruslikku materjali koguses 0,05–0,2 ml kantakse koorioni-allantoisi membraanile tuberkuliinisüstla või Pasteuri pipetiga. Embrüod avatakse pärast 48–72-tunnist inkubeerimist termostaadis. Viiruse olemasolu krolantoidmembraanis määratakse: 1. Mitmesuguse kujuga valkjate läbipaistmatute laikudega; 2. Hemaglutinatsiooni reaktsioonis.
Slaid 28
Slaid 29
slaid 30
Slaid 31
Aitäh!!!
Vaadake kõiki slaide
Embrüoid kasutatakse 8–14 päeva vanuselt, olenevalt viiruse tüübist, nakatumisviisist. Kanaembrüote paljunemine toimub embrüo erinevates osades Nakatumise viisid: koorioallantoismembraanil, allotois- ja lootekestadel, munakollasel, embrüo kehal.
29. Koekultuurid.
Sõltuvalt valmistamistehnikast on 3 tüüpi rakke:
Ühekihilised on võimelised paljunema keemiliselt neutraalse klaasi pinnal ühekihilisena;
Suspensioon, razmn-I kogu toitainekeskkonna mahus;
Elund – terved elundite ja kudede tükid, mis säilitavad esialgse struktuuri.
Primaarse rakukultuuri valmistamine koosneb mitmest etapist: kudede jahvatamine, rakkude eraldamine, saadud suspensiooni pesemine trüpsiinist.
Näidustus:
- tsütopaatiline toime - mikroskoobi all nähtavad morfoloogilised muutused rakkudes kuni klaasist äratõukeni.
Viiruse inklusioonid on viiruseosakeste kogunemine või viiruse komponentide eraldamine tsütoplasmas või rakutuumas.
Naastud on piiratud alad, mis koosnevad degeneratiivsetest rakkudest. Need on määrdunud rakkude taustal nähtavad heledate laikudena.
värvi test
Hemadsorptsioon on rakukultuuride võime adsorbeerida punaseid vereliblesid nende pinnal.
Sekkumine.
30. Bakteriofaagide klassifikatsioon, keemiline koostis.
Bakteriofaagid on bakteriaalsed viirused, millel on võime tungida bakterirakkudesse ja põhjustada nende lahustumist. Neil on kulle kuju, osa kuupniiditaoline kuju. Need koosnevad ikosaeedrilisest peast ja sabaprotsessist. Sabaprotsessi sees on silindriline varras, väljaspool - ümbris, protsess lõpeb kuusnurkse lühikeste ogadega basaalplaadiga. Faagid koosnevad nukleiinhapetest ja valkudest. Spermatosoonikujulistes faagides on kaheahelaline DNA tihedalt pakitud pea sees olevasse spiraali. Valgud on osa kestast. Lisaks struktuurvalkudele leiti nukleiinhappega seotud sisemisi valke ja ensüümvalke, mis osalevad faagi ja raku interaktsioonis.
31. Virulentsete faagide ja nende suhtes tundliku bakteriraku interaktsiooni protsess
Virulentsete faagide arv võib suureneda ainult lüütilise tsükli jooksul. Virulentse bakteriofaagi ja raku interaktsiooni protsess koosneb mitmest etapist: bakteriofaagi adsorptsioon rakule, tungimine rakku, faagikomponentide biosüntees ja nende kokkupanek ning bakteriofaagide väljumine rakust.
Esialgu kinnituvad bakteriofaagid faagispetsiifiliste retseptorite külge bakteriraku pinnal. Faagi saba lahustab selle otsas paiknevate ensüümide (peamiselt lüsosüümi) abil lokaalselt rakumembraani, tõmbub kokku ja peas sisalduv DNA süstitakse rakku, bakteriofaagi valgukate jääb aga väljapoole. . Süstitud DNA põhjustab raku metabolismi täieliku ümberstruktureerimise: bakteriaalse DNA, RNA ja valkude süntees peatub. Bakteriofaagi DNA hakkab transkribeerima omaenda transkriptaasi ensüümi abil, mis pärast bakterirakku sisenemist aktiveerub. Esmalt sünteesitakse varased ja seejärel hilised mRNA-d, mis sisenevad peremeesraku ribosoomidesse, kus sünteesitakse varased (DNA polümeraasid, nukleaasid) ja hilised (kapsiidi- ja sabavalgud, lüsosüüm, ATPaas ja transkriptaas) bakteriofaagi valgud. Bakteriofaagi DNA replikatsioon toimub poolkonservatiivse mehhanismi järgi ja see viiakse läbi oma DNA polümeraaside osalusel. Pärast hiliste valkude sünteesi ja DNA replikatsiooni lõppemist toimub viimane protsess - faagiosakeste küpsemine või faagi DNA kombineerimine ümbrisvalguga ja küpsete nakkusohtlike faagiosakeste moodustumine.
Tere pärastlõunast, kallid lugejad! Täna anname kirjelduse, näitame fotosid ja videoid kana arengu kohta munas päevas inkubeerimise ajal kodus ja linnufarmides. enesekindlalt harjutatud nii tehase mastaabis kui ka privaatsetes hoovides.
Kuid vaatamata selle laiale levikule mõtlevad vähesed inimesed geneetilisel tasemel loodud keerulisele mehhanismile, mis tagab kana kasvu ja arengu.
Siiani on levinud arvamus, et tibu kasvab munakollast. Sellest artiklist saate teada kõik saladused, mis on peidetud, aga ka seda, milline "kohutav" tähendus on peidus sõnade allantois kanas ja amnion kana all ning millist funktsiooni need täidavad.
Kana areng munas päevade kaupa
Blastodisc
Tibude areng algab blastodiskist. Blasodisk on väike tsütoplasma tromb, mis asub munakollase pinnal. Blastodiski asukohas on munakollase tihedus palju väiksem, mis aitab kaasa munakollase pidevale hõljumisele blastodiskiga ülespoole.
See funktsioon tagab parema kuumutamise inkubatsiooniprotsessi ajal. Viljastatud blastodisk hakkab jagunema, kui see on veel kana kehas, ja selle pügamise ajaks on see juba täielikult blastodermiga ümbritsetud. Blastodisk näeb välja nagu väike umbes 2 mm suurune valge laik.
Iduketast ümbritsev hele halo on blastoderm.
Kui muna satub soodsatesse keskkonnatingimustesse, mis pärast munemist peatusid, jätkub rakkude jagunemine.
Sa peaksid teadma: Vastupidiselt levinud arvamusele, et küünlaid saab teha alles alates 6. inkubatsioonipäevast, on blastodermi areng selgelt nähtav 18-24 tunni möödudes inkubatsiooni algusest. Selleks ajaks on selgelt näha 5–6 mm läbimõõduga pimendus, mis muna ümberpööramisel kergesti liigub.
2.-3. inkubatsioonipäeval algab ajutiste kestade areng:
- Amnion kanas
- Allantois kanas
Kõik need on tegelikult ajutised elundid, mis on loodud täitma embrüo elutähtsa aktiivsuse tagamise funktsioone kuni selle lõpliku moodustumise hetkeni.
Amnion kanas
See on kest, mis kaitseb embrüot vedelikuga täitumise tõttu füüsilise mõju ja kuivamise eest. Kanas olev amnion reguleerib vedeliku kogust sõltuvalt embrüo vanusest.
Lootekoti epiteelipind suudab embrüoga õõnsust veega täita, samuti tagab selle kasvades vedeliku väljavoolu.
Allantois kanas
Üks ajutistest organitest, mis täidab paljusid funktsioone:
- embrüo hapnikuga varustamine;
- isoleerib embrüost jääkained;
- osaleb vedeliku ja toitainete transpordis;
- toimetab mineraalid ja kaltsiumi koorest embrüosse.
Tibu allantois loob kasvuprotsessis ulatusliku veresoonte võrgustiku, mis vooderdab kogu muna sisepinda ja on nabanööri kaudu tibuga ühendatud.
Kana hingeõhk munas
Hapnikuvahetusel munas, olenevalt kana arenguastmest, on erinev mehhanism. Arengu algfaasis jõuab hapnik munakollast otse blastodermi rakkudesse.
Vereringesüsteemi tulekuga siseneb hapnik verre juba, ikka munakollast. Kuid munakollane ei suuda täielikult tagada kiiresti kasvava organismi hingamist.
Alates 6. päevast läheb hapnikuga varustamise funktsioon järk-järgult üle allantoisile. Selle kasv algab muna õhukambri suunas ja sinna jõudes katab järjest suurema koore sisepinna. Mida suuremaks kana kasvab, seda suurem on allantoisiga kaetud ala.
Küünlatamisel näeb see välja nagu roosakas võrk, mis katab kogu muna ja sulgub selle terava poole pealt.
Kana söömine munas
Esimestel arengupäevadel kasutab embrüo valgu ja munakollase toitaineid. Kuna munakollane sisaldab tervet kompleksi mineraale, rasvu ja süsivesikuid, on see võimeline rahuldama kõik kasvava organismi esialgsed vajadused.
Pärast allantoisi sulgemist (arengu 11. päev) toimub funktsioonide ümberjaotumine. Embrüo muutub suuremaks ja võtab positsiooni piki muna pikitelge, pea tömbi otsa poole. Valk on sel hetkel koondunud muna teravasse otsa.
Tibu kaal koos allantoisi survega tagab valgu nihkumise ja selle tungimise läbi amnioni embrüo suhu. See pidev protsess tagab munas oleva tibu kiire kasvu ja arengu inkubatsiooni ajal päevast päeva.
Alates 13. päevast tarnib allantois koorest mineraalid, mida kana edasiseks arenguks kasutab.
Peaksite teadma: kana normaalne toitumine võimaldab kanas ainult õigeaegselt suletud allantoisi. Kui selle sulgemisel jääb muna teravasse otsa valku, mis pole anumatega kaetud, ei ole kanal edasiseks kasvuks piisavalt toitaineid.
Muna asend ja tibu areng
Viimasel ajal on üha enam hakatud kasutama kanamunade inkubeerimist vertikaalses asendis. Kuid see meetod ei mõjuta kana arengut kõige paremini.
Püstises asendis on maksimaalne kalle pööramisel 45°. Sellest kaldest ei piisa allantoisi normaalseks kasvuks ja õigeaegseks sulgemiseks. See kehtib eriti suurte munade kohta.
Horisontaalses asendis inkubeerimisel on pöörlemine 180°, mis avaldab positiivset mõju allantoisi kasvule ja sellest tulenevalt ka tibu toitumisele.
Püsti munadega koorunud kohevad on reeglina 10% väiksema kaaluga kui horisontaalasendis koorunud kohevad.
Munade pööramise tähtsus tibude arengule
Munade pööramine inkubeerimise ajal on vajalik kõigil arenguetappidel, välja arvatud esimesel ja kahel viimasel päeval. Esimesel päeval on vajalik blastodiski intensiivne kuumutamine ja viimasel päeval on väike kriuksuja juba võtnud positsiooni, et kestast läbi murda.
Arengu algfaasis välistab munade pööramine blastodermi või amnioni koore sisemusse kleepumise ohu.
Pööramine aitab ka:
- amnioni kokkutõmbumine;
- munade ühtlane kuumutamine;
- embrüo õige asendi vastuvõtmine;
- gaasivahetuse parandamine;
- allantoisi õigeaegne sulgemine;
- loote toitumise parandamine.
Nüüd, pärast artikli lugemist, saab hinnata protsesside keerukust, mis toimuvad väikese kuke või kanaga tema arenemisel mitmest puurist väikeseks linnuks. See protsess pole vähem keeruline kui inimlapse või näiteks kassipoja areng emakas, kus on tagatud püsivad tingimused.
Kana areng munas päevas sõltub täielikult välistingimustest, mille tagamine on haudumine.
Soovime kõigile edukat kollaste, hallide ja muude kohevate täidiste äravõtmist!
Tellige saidi värskendused, et olla esimene, kes saab teada kanauudistest, mis aitavad kõiki probleeme lahendada.
Siin on foto meie püsilugejalt Julia Areptevalt, kelle all koorus kana!
Kommentaaridesse saad lisada oma fotod munakanadest, kukest ja kanadest! Või muud linnuliha. Huvitav, milline kanakuut teil on?
Kas meeldis artikkel? Jagage sõpradega sotsiaalvõrgustikes: 
Liituge meiega VKontakte'is, lugege kanade kohta!
Viiruste isoleerimine laboriloomadel.
Laboriloomade valik sõltub viiruse tüübist. Laboriloomad on bioloogiline mudel. Mõnikord on enne viiruse laboratoorsete tingimustega kohandamist vaja läbi viia 3-5 "pimedat", asümptomaatiline passaaži. Siiski ei ole laboriloomad mõnele viirusele vastuvõtlikud ja sellisel juhul tuleb kasutada looduslikult vastuvõtlikke loomi. Nagu näiteks sigade katku ja hobuste nakkusliku aneemia korral.
Laboriloomade nakatamise eesmärk:
1. Uurida haiguse patogeneesi;
2. Isoleerida viirus patoloogilisest materjalist;
3. Immuun- ja hüperimmuunseerumite tootmine;
4. Vaktsiinide tootmine;
5. Viiruste hooldamine laboritingimustes;
6. Tiitrimine, et määrata viiruse kogus mahuühiku kohta;
7. Bioloogiline mudel neutraliseerimisreaktsiooni seadistamiseks;
Laboriloomade nakatamise meetodi valik sõltub viiruse tropismist. Niisiis, neurotroopsete viiruste kultiveerimisel nakatuvad loomad ajusse; hingamine intranosaalselt, intratrahheaalselt; dermatroopne - subkutaanselt ja intradermaalselt.
Nakatumine toimub vastavalt aseptika ja antisepsise reeglitele.
Viirust sisaldava materjali viimiseks loomade kehasse on palju võimalusi:
Subkutaanne; - intratserebraalne; - Intradermaalne;
intraperitoneaalne; - Intramuskulaarne; - Intraokulaarne;
Intravenoosne; - Intranosaalne; - toit;
Pärast nakatumist loomad märgistatakse, asetatakse isoleeritud kasti ja vaadeldakse 10 päeva. Looma surma esimesel päeval pärast nakatumist peetakse mittespetsiifiliseks ja seda ei võeta edaspidi arvesse.
3 märki näitavad infektsiooni tõhusust:
Kliiniliste tunnuste olemasolu
Loomade surm
Patoloogilised anatoomilised muutused (elundi suurus, kuju, värvus ja konsistents).
Kana embrüo on viljastatud kanamuna, milles areneb embrüo (embrüo). Viiruste kasvatamine kana- ja vutiembrüotel on viimasel ajal laialt levinud kui üks lihtsamaid ja usaldusväärsemaid meetodeid paljude viiruste ja mõnede bakterite – brutsella, riketsia, vibriooni – kultiveerimiseks ja diagnoosimiseks.
Arenevates kanaembrüodes saab kasvatada paljusid inimeste ja loomade viiruseid. Embrüonaalne kude, eriti embrüo membraanid, mis on rikas iduepiteeli kudede poolest, on soodne keskkond paljude viiruste paljunemiseks. Korionallantoismembraanil arenevad edukalt epiteliotroopsete omadustega viirused (rõuged, ILT jne), põhjustades makroskoopiliselt nähtavaid muutusi. Materjali allantoisiõõnde viimisel paljunevad embrüos hästi mitmesugused müksoviiruste esindajad (gripp, Newcastle’i tõbi, koerte katk jne), nakkusliku bronhiidi viirused, pardipoja hepatiidi viirused, arboviirused jne. Mõned viirused kultiveerivad edukalt munakollasekotis.
Eelised:
1. Kuluefektiivne, pealegi on munad kergesti kättesaadavad;
2. Arenevatel tibuembrüotel puuduvad kaitsemehhanismid, kuna immuunsüsteem pole veel välja kujunenud;
3. Munakoor takistab bakterite ja viiruste tungimist keskkonnast selle kaudu;
Kanaembrüo viiruste kasvatamiseks ja isoleerimiseks on vaja väga lihtsat varustust - tavalist termostaati või inkubaatorit.
Tingimused:
1. Munad on saadud farmidest, mis on teadaolevalt nakkushaigustest vabad;
2. Kana embrüoid saab kõige paremini valget tõugu kanadelt (leghorn, vene valge), sest need on manipuleerimiskindlamad ega sure väikeste vigastuste tõttu. Lisaks on nende kest valge ja läbipaistvam kui teistel tõugudel ning seda on kergem läbi näha, mida on mugav nendega töötamise ajal vaadata ja jälgida;
3. Inkubeerimiseks valitakse viljastatud munad, mis on munenud mitte rohkem kui 10 päeva tagasi;
4. Nad võtavad saastamata mune, kuna neid pole enne inkubeerimist võimalik pesta ja määrdunud munad on vaadeldes vähem nähtavad (ovoskoopia) ja nendega töötades võite manipuleerimise ajal embrüot nakatada;
Mune inkubeeritakse inkubaatoris või veesoojenduse ja õhu juurdepääsuga termostaadis ning termostaadis inkubeerimisel tuleb mune 2-3 korda päevas ümber pöörata ja 5-10 minutiks õhu käes välja võtta, et gaasid oleksid paremad. vahetada. Teatud niiskuse säilitamiseks asetatakse termostaadi aurustamiseks anum veega, termostaadi temperatuur peaks olema 38 °.
Embrüo areng toimub juba esimesel inkubatsioonipäeval, toimub aju ja luustiku munemine. Kana embrüo ehitus 7-9 päeva vanuses(vt märkmikku).
Infektsiooniks kasutatakse kõige sagedamini 7-12 päeva vanuseid embrüoid. Kanaembrüotega töötamine toimub steriilses poksiruumis, järgides kõige rangemalt aseptikat.
Tibude embrüote nakatamise eesmärk:
1. Eraldage vyrukad patoloogilisest materjalist;
2. Vaktsiinide väljatöötamine;
3. Viiruse hooldus laboris;
4. Viiruste tiitrimine;
5. Bioloogiline mudel neutraliseerimisreaktsiooni seadistamiseks;
6. Viiruste interferentsi ja interferooni tootmise uurimine; Kana embrüote nakatumine:
Nakatumiseks tuleb valida hästi määratletud liikuvusega elujõulised embrüod. Enne nakatumist uuritakse kõiki embrüoid hoolikalt pimendatud ruumis ovoskoobiga.
Embrüote nakatamiseelsel transilluminatsioonil on joonisel välja joonistatud pugu (õhuõõnsus), suurte veresoonte kulg ja embrüo esitlemise koht, s.o see piirkond kesta peal, kus embrüo asub sellele kõige lähemal. kest lihtsa pliiatsiga. Puga märk, embrüo esitlemise koht ja suurte veresoonte kulg on siis juhiseks viirust sisaldava materjali sissetoomise koha valimisel nakatumise ajal.
Nakatumiseks valitud kanaembrüod viiakse kasti, kus nad nendega töötavad. Enne nakatumist töödeldakse süstekoha kesta kaks korda jodeeritud alkoholiga ja põletatakse. Nakkuse annus on 0,1-0,2 cm.
Sõltuvalt viiruse tüübist ja nakatumise eesmärgist on neid erinevaid viirust sisaldava materjali sisseviimise meetodid:
1) Nakatumine koorioallantoismembraanil , 7-12 päeva vanuseid embrüoid kasutatakse neurotroopsete, dermatroopsete ja mõnede pantroopsete viiruste (rõuged, entsefalomüeliit, ILT, suu- ja sõratõbi, marutaudi, katk jne) isoleerimiseks ja kasvatamiseks. Infektsioone on 3 tüüpi:
a) avage puga ja lõigake see kääridega ära, eraldage kestamembraan ja kandke materjal koorioallantoismembraanile (CAO). Seejärel suletakse munas olev auk steriilse klaaskorgiga ja korgi servad vahatatakse;
b) embrüo esitlemise küljelt lõigatakse nõelviili (viili) või sakilise skalpelliga välja kolmnurk, mille külje pikkus on umbes 1 cm. ja infrashell membraan eemaldatakse pintsettidega ja materjal süstitakse. Auk suletakse steriilse katteklaasiga ja servad vahatatakse või suletakse steriilse kleepplaastriga.
c) embrüo esitlemise kohas eemaldatakse skalpelliga väike umbes 0,5 cm suurune kooreosa, seejärel eemaldatakse pintsettide või nõelaga sellest piirkonnast kesta membraan ja materjal süstitakse. Kui materjal munaõõnsusse hästi ei mahu, on võimalik kummipirni abil mopsi koores oleva augu kaudu pugast õhk välja pumbata ja selle tulemusena valmib kunstmops. moodustatakse materjali sissetoomise kohas ja seejärel on materjal hõlpsasti sisestatav. Korpuses olev auk suletakse kleeplindiga või vahatatakse.
2) Infektsioon allantoisiõõnes. See nakkusmeetod on väga lihtne ja seda kasutatakse paljude viiruste isoleerimiseks. Nakatumiseks võetakse 10-11 päeva vanused embrüod. Infektsioone on kahte tüüpi:
a) nakatumine toimub läbi mopsi ilma seda lõikamata. Mõõdetakse nõelaga kaugus mopsi ülaosast koorele pliiatsiga märgitud pugi piirini, nõel torgatakse märgitud sügavusele ja süvendatakse koorionallantoidmembraani läbistamiseks veel 0,5 cm;
b) materjal süstitakse nõelaga läbi kesta punktsiooni embrüo esitlemise kohas 3-5 mm sügavusele avaskulaarsesse piirkonda. Korpuses olev auk suletakse kleeplindiga või vahatatakse.
3) Nakatumine munakollases kotis. Nakatumiseks kasutatakse 5-8 päeva vanuseid embrüoid. Infektsioone on kahte tüüpi:
a) nõel torgatakse mopsi küljelt munakollasesse 45 ° nurga all embrüo esitlemiskoha suhtes ovoskoobi kontrolli all;
b) muna asetatakse alusele ka embrüo esitlemiskoht allapoole ja nõel torgatakse ülalt alla embrüo poole umbes 1 cm sügavusele.
Süstekoht suletakse kleeplindiga ja vahatatakse. neli) Nakatumine amnioniõõnes. Selle nakkusmeetodiga võib viirus siseneda erinevatesse looteveega kokkupuutuvatesse rakkudesse ja neis paljuneda. nakatumise hõlbustamiseks soovitatakse embrüoid 2-3 päeva enne nakatumist tagurpidi inkubeerida. Siis on embrüo ja amnion nihutatud ülespoole ja seda on mugavam nakatada. Infektsioone on kahte tüüpi:
a) avage ja lõigake puga ära, eemaldage pintsettidega kestamembraan ja haarake lootevesi, pingutage amnion pintsettidega ja süstige materjal amnioniõõnde annuses 0,1 ml. Seejärel suletakse kestas olev auk steriilse klaaskorgiga ja servad vahatatakse;
b) nakatamine pika nõelaga läbi mopsi pimedas ruumis silma kontrolli all.Nõela juures painutatakse ots esmalt täisnurga all, et tekiks väike ala. Nõel sisestatakse silma kontrolli all läbi preembrüo mopsi, nüri nõela survel, sel juhul embrüo nihkub, seejärel läbistatakse amnion kerge tõukega ja nõel tõmmatakse kergelt tagasi. Sel juhul peaks embrüo liikuma nõela taha üles. Seejärel tutvustatakse materjali.
5) Infektsioon embrüo kehas ja infektsioon ajus. Kasutatakse 7-12-päevaseid embrüoid, nakatumine toimub materjali viimisega erinevatesse kehaosadesse või otse ajju. Nakatumiseks avatakse puga ja embrüo tõmmatakse pintsettidega üles. Nende nakkusmeetodite korral võib kuni 30% või rohkem nakatunud embrüote arvust trauma tagajärjel surra.
6) Nakatumine koorioallantoismembraani suurtes veresoontes. Seda nakkusmeetodit, nagu ka eelmist, kasutatakse väga harva. Materjal süstitakse õhukese nõelaga pärast kesta eemaldamist mööda veresoont otse verevoolu mööda anumasse.
Pärast nakatumist tuleb kana embrüod märgistada lihtsa pliiatsiga ja asetada termostaadi. Neid jälgitakse igapäevaselt vaatamise teel, seiret tehakse olenevalt viiruse tüübist kuni 7-8 päeva. Embrüote surma korral eemaldatakse need kiiresti termostaadist ja asetatakse kuni avanemiseni külmikusse. Kui embrüo suri esimese 14-18 tunni jooksul, võib selle põhjuseks olla trauma või patoloogilise materjali toksilisus. Seetõttu, nagu ka laboriloomade nakatumise korral, on kahtlastel juhtudel soovitatav teha mitu passaaži ja võtta iga katsematerjali kohta mitu embrüot.
Surnud nakatunud või pärast vaatlusperioodi lõppu eemaldatud kanaembrüote lahkamine toimub kõigi aseptika reeglite järgi steriilsetes poksitingimustes. Avamisel töödeldakse kesta alkoholiga ja põletatakse, seejärel lõigatakse puga ära. Avanenud embrüos aspireeritakse esmalt ettevaatlikult allantoisivedelik (selle kogus on umbes 7 ml), seejärel tõmmatakse pintsettidega lootevesi, torgatakse Pasteuri pipetiga läbi ja imetakse lootevesi ära (selle kogus on 1,0-1,5 ml). ), seejärel kogutakse munakollane, eemaldatakse membraanid ja embrüo. Vedelikku, membraane ja embrüot ennast uuritakse muutuste suhtes hoolikalt. Lootevesi on tavaliselt täiesti läbipaistev, nakatumisel võib see olla hägune, verine. Viirusest põhjustatud iseloomulikud muutused avalduvad enim koorionallantoismembraanil: tekivad põletikukolded, läbipaistmatud, ümara kujuga ja verevalumid. Hemorraagia võib olla embrüo kehal. Kogu materjal kogutakse steriilsesse anumasse.
Kana embrüoid viroloogias kasutatakse laialdaselt mitte ainult viiruste eraldamiseks, vaid ka antigeenide akumuleerimiseks ja tootmiseks, elus- ja tapetud vaktsiinide valmistamiseks, viiruste tiitrimiseks, viiruse neutraliseerimise reaktsiooni käivitamiseks, nõrgestamiseks (nõrgendamiseks). ) viirused, viiruste interferentsi uurimiseks ja interferooni saamiseks.