Veregruppide määramise protseduur ABO süsteemi järgi seisneb A- ja B-antigeenide tuvastamises erütrotsüütides standardsete antikehade abil ning aglutiniinide kasutamises analüüsitava vere plasmas või seerumis standardsete erütrotsüütidega. Tehnika töötati välja 20. sajandi alguses ja seda kasutatakse meditsiinis aktiivselt siiani. Antigeenide A ja B määramine toimub tänu anti-A ja anti-B kolikoonidele.
Põhimõisted
Doonoritel ei määrata alati mitte ainult erütrotsüütides leiduvaid antigeene, vaid standardsete erütrotsüütide abil ka aglutiniini seerumis (plasmas). Veeniverd kasutatakse biomaterjalina. Enne uuringut peate päev enne analüüsi loobuma rasvasest toidust ja mitte suitsetama pool tundi enne analüüsi. Veregrupid määratakse kaks korda: esmalt meditsiiniosakonnas, kus materjal kogutakse, ja seejärel laboris tehtud uuringutega.
Veregruppide määramine ABO süsteemi järgi on peamine transfusioloogias kasutatav test. Samuti on mõnel loomal sarnane veregruppide süsteem, nagu šimpansid, gorillad ja bonobod.
Avastamise ajalugu
Teaduses on üldtunnustatud arvamus, et ABO-süsteemi järgi veregruppide määramise meetodi tuvastas esmakordselt Austria teadlane Karl Landsteiner 1900. aastal. Seejärel kirjeldas ta oma töös kolme tüüpi antigeene. Selle eest pälvis ta kolmkümmend aastat hiljem Nobeli meditsiini- ja füsioloogiaauhinna. Kuna varem polnud teadlaste vahel tihedaid sidemeid, tehti hiljem kindlaks, et Tšehhi seroloog Jan Jansky, olenemata K. Landsteineri uuringutest, kirjeldas esmalt nelja inimese veregruppi, kuid tema uurimused polnud laialdaselt teada. publik. Praegu on Venemaal ja endise NSV Liidu vabariikides kasutusel just Ya. Jansky välja töötatud klassifikatsioon. USA-s lõi W. L. Moss oma sarnase teose 1910. aastal.
Meetod veregruppide määramiseks vastavalt ABO süsteemile, kasutades kolikloone
Veregrupp tuleks määrata hea valgustusega ruumis, jälgides temperatuurivahemikku 15–25 kraadi Celsiuse järgi, kuna kõrvalekalded sellest normist võivad mõjutada uuringu tulemusi. Plaadile või taldrikule kirjutatakse patsiendi initsiaalid ja perekonnanimi. Vasakult paremale või ringis rakendatakse rühmade standardseid tähistusi (O (I), A (II), B (III)). Nende alla asetatakse tilkhaaval vastav seerum iga tüübi jaoks eraldi pipettidega. Seejärel lisatakse neile patsiendi veri. Materjali uurimiseks võetakse kõrvapulgast või sõrmest. Seda nõuab ABO süsteemi järgi veregrupi määramise tehnika.
Samuti on õigustatud kasutada erütrotsüüte, mis on katseklaasis pärast trombi moodustumist. Seerumi kogus peab olema kümme korda suurem kui lisatud vere kogus. Pärast seda segatakse tilgad klaasvarrastega (igaühe jaoks eraldi). Viie minuti jooksul plaati õrnalt loksutades jälgige hemaglutinatsioonireaktsiooni tekkimist. See ilmneb selles, et tekivad väikesed punased tükid, mis seejärel ühinevad suuremateks. Seerum kaotab sel ajal peaaegu täielikult värvi.
Vale hemaglutinatsiooni kõrvaldamiseks erütrotsüütide lihtsa aglutinatsiooniga lisage kolme minuti pärast üks tilk soolalahust ja kontrollige, kas aglutinatsioon püsib. Kui jah, siis on see tõsi. Kõik, veregruppide määramine ABO süsteemi järgi on lõpetatud.
Tulemuste tõlgendamine
Selle tulemusena võib täheldada nelja reaktsiooni:
- aglutinatsiooni ei esine ühegi seerumiga - esimene rühm O (I);
- reaktsioon ilmnes seerumitega I(ab) ja III(a) - teine rühm A(II);
- aglutinatsioon toimub seerumitega I(ab) ja II(b) - kolmas rühm B(III);
- kui reaktsioon toimub kolme seerumiga, on vaja läbi viia täiendav protseduur AB(IV) rühma reaktiividega, mis on standardsed; kui sellises tilgas aglutinatsiooni pole, võime eeldada, et tegemist on 4. veregrupiga AB (IV).
Rh-teguri ekspressmeetod
Veregruppide määramise meetod vastavalt ABO-süsteemile hõlmab Rh-faktori (Rh) samaaegset tuvastamist.
Plaadi pind on eelnevalt niisutatud ning sellele on kirjutatud “kontrollseerum” ja “reesusevastane seerum”. Seejärel asetatakse üks või kaks tilka vajalikke reaktiive pealdiste alla ja neile lisatakse analüüsitud materjal. Selleks võib kasutada ka sõrme verd (sama koguses kui seerumi maht) või pärast trombi tekkimist tuubi põhja jäänud erütrotsüüte (pool seerumi mahust). Materjali valik ei mõjuta lõpptulemust. Seejärel segatakse veri ja seerum kuiva klaaspulgaga, misjärel reaktsioon toimub eeldatavasti viis minutit. Valenäitude kõrvaldamiseks lisatakse kolme kuni nelja minuti pärast isotoonilist naatriumkloriidi lahust (vaid paar tilka). Veregrupi määramine ABO ja Rh süsteemi järgi toimub väga sageli.
Kui seerumitilgas toimub punaste vereliblede aglutinatsioon, näitab see positiivset reesusveri. Statistika kohaselt leidub Rh + 85% maailma elanikkonnast. Selle puudumine võimaldab meil rääkida Rh-negatiivsest kuuluvusest. Kui kontrollseerumis ilmneb aglutinatsioon, on see muutunud kasutuskõlbmatuks. Paraku ei tööta veregrupi määramise algoritm ABO süsteemi järgi alati ideaalselt.
Milliseid vigu saab selle tehnikaga teha?
Ebatäpsused vere teatud rühma kuuluvuse määramisel sõltuvad järgmistest põhjustest:
- Tehniline.
- Uuritava vere bioloogiline eripära.
- Standardsete seerumite ja erütrotsüütide defektne iseloom.
Tehnilised vead
Võimalikud vead ABO-süsteemi veregrupi ristsel määramisel:
Bioloogilise spetsiifilisuse vead
Analüüsitud vere bioloogilise eripäraga seotud vead jagunevad kahte tüüpi.
- Sõltuvalt erütrotsüütide omadustest.
- Seerumi bioloogilistest omadustest tingitud vead.
Vaatleme iga tüüpi üksikasjalikumalt.
Sõltuvalt punaste vereliblede omadustest
- Hiline aglutinatsioon erütrotsüütide ja antigeenide "nõrkade" vormide tõttu. Vigade vältimiseks on vaja standardsete erütrotsüütide abil määrata doonorite ja retsipientide veregrupp. Aglutinogeen A 2 tuleks tuvastada korduva uurimise teel teist tüüpi reaktiivide ja muude klaasnõudega, suurendades reaktsiooni registreerimisaega.
- "Panaglutinatsioon" ("autoaglutinatsioon") - vere võime näidata sama mittespetsiifilise iseloomuga reaktsiooni kõigi seerumitega, sealhulgas enda seerumiga. Viie minuti pärast sellise aglutinatsiooni raskusaste nõrgeneb, kuigi see peaks suurenema. Sarnaseid juhtumeid täheldatakse patsientidel, kellel on vähk, põletused jne. Kontrollina on vaja hinnata analüüsitud erütrotsüütide aglutinatsiooni ilmingut neljanda rühma standardseerumis ja soolalahuses. "Panaglutinatsiooniga" määratakse veregrupp erütrotsüütide kolmekordse pesemise tulemusena. Kui see soovitud tulemust ei anna, tasub vereproov uuesti võtta enne protseduuri soojendatud katseklaasi ja asetada proov termoanumasse, mis aitab hoida temperatuuri 37 kraadi Celsiuse järgi ja üle selle. Seejärel tuleks see toimetada laborisse, kus hoitakse ülaltoodud temperatuuri ning kasutatakse kuumutatud soolalahust, plaati ja reaktiive.
- Mõnikord on analüüsitud vere erütrotsüüdid paigutatud nagu "mündikolonnid" ja neid võib segi ajada aglutinaatidega. Lisades kaks tilka isotoonilist soolalahust ja raputades õrnalt plaati, on punased verelibled õiges asendis.
- Mittetäielik või segaaglutinatsioon, mis esineb teise, kolmanda ja neljanda rühma patsientidel luuüdi siirdamise tagajärjel või esimese kolme kuu jooksul pärast vereülekannet 0 (I).
Bioloogiliselt määratud seerum
Defektsete standardsete erütrotsüütide ja seerumite kasutamisega seotud vead
Nõrgad seerumid, mis on aegunud või mille tiiter on alla 1:32, on võimelised tekitama nõrga ja hilise aglutinatsiooni. Selliste reaktiivide kasutamine on vastuvõetamatu.
Mittesteriilsetes tingimustes valmistatud ja ebapiisavalt konserveeritud ebasobivate standardsete erütrotsüütide või seerumite kasutamine põhjustab "bakteriaalse" aglutinatsiooni ilmnemist, mis on mittespetsiifiline.
ABO süsteemi veregruppide kohta on palju populaarseid oletusi, mis ilmnesid kohe pärast selle avastamist erinevates kultuurides üle maailma. Nii sai näiteks eelmise sajandi 30ndatel Jaapanis ja mõnes teises riigis populaarsust teooria, mis seob veregrupi ühe või teise isiksusetüübiga. Sarnased teooriad on tänapäeval populaarsed.
Samuti levib arvamus, et A-grupiga inimesel on kalduvus tugevale pohmellile, O-d seostatakse heade hammastega ja A2-rühma kõrgeima IQ-tasemega. Kuid selliseid väiteid pole teaduslikult tõestatud.
Kaalusime veregruppide määramist ABO süsteemi järgi standardseerumit kasutades.
Veregrupid on normaalsed pärilikud mitmesugused vere immunoloogilised tunnused. Nende tunnuste alusel jagatakse kõik inimesed rassist, vanusest ja soost olenemata nelja rühma. Inimese veregrupp jääb muutumatuks kogu elu. Ühe veregrupi inimesed erinevad teiste veregruppide inimestest erütrotsüütides sisalduvate aglutinogeenide (A ja B) ning seerumis sisalduvate α- ja β-aglutiniinide olemasolu või puudumise poolest.
AB0 süsteemi veregrupid: 0(I) veregrupp sisaldab aglutiniinid α ja β, aglutinogeenid selles puuduvad; A (II) veregrupp - aglutiniin α ja aglutinogeen A; B(III) veregrupp-aglutiniin ja aglutinogeen B; AB(IV) veregrupp – sisaldab aglutinogeene A ja B, aglutiniinid puuduvad.
Retsipient on isik, kellele tehakse vereülekanne, doonor on isik, kes annab oma vere ülekandeks. Retsipiendi jaoks sobib ideaalselt sama rühma veri. Veri on absoluutselt kokkusobimatu, kui retsipiendil on doonori erütrotsüütides aglutiniinid, kuna sellistel juhtudel kombineeritakse ühe vere aglutinogeen A teise vere aglutiniiniga A või aglutinogeen B aglutiniiniga β. Arendab nn, st erütrotsüütide liimimine väikesteks ja suurteks tükkideks. Kokkusobimatu vere ülekandmine põhjustab tõsiseid tagajärgi ja võib olla surma põhjuseks. Rühma 0(I) retsipiendile ei saa üle kanda ühegi teise rühma verd, välja arvatud samad. AB(IV) rühma retsipiendil ei ole aglutiniini, seega võib talle üle kanda kõikide rühmade verd. AB(IV) rühma saaja on universaalne saaja. 0(I) rühma verd võib üle kanda mis tahes veregrupiga inimestele. Seetõttu nimetatakse 0 (I) rühma kuuluvaid inimesi universaalseteks doonoriteks.
Lisaks aglutinogeenidele A ja B leidub mõnikord erütrotsüütides ka teisi aglutinogeene (näiteks jne). Juhtudel, kui veri ei ühildu Rh-faktoriga (vt), on ka vereülekanne võimatu, et vältida punaste vereliblede hävitamisega (hemolüüsiga) seotud tõsiseid tüsistusi.
Enne iga vereülekannet, mis viiakse läbi vastavalt retseptile ja arsti järelevalve all, tuleb kindlasti määrata veregrupp ja teha kindlaks selle sobivus.
Riis. 1-4. Veregruppide määramine standardseerumitega (A, B, 0).
Riis. 1. Uuritud 0 (I) rühma veri.
Riis. 2. A (II) rühma testitud veri.
Riis. 3. B (III) rühma testitud veri.
Riis. 4. Uuritud veri AB (IV) rühmast.
Veregruppide määramise meetod. Veregrupi määramiseks valmistage ette puhas taldrik, klaaspliiats, standardsed seerumid 0 (I), A (II) ja B (III) veregrupiga, viaalid isotoonilise naatriumkloriidi lahusega, alkohol ja jood, imav puuvill, klaas slaid või klaaspulgad ja kolm pipetti, mis peavad olema kuivad (vesi hävitab).
Plaat jagatakse pliiatsiga kolmeks sektoriks, mis tähistavad 0 (I), A (I), B (III). Üks suur tilk standardset 0 (I), A (II), B (III) veregrupi seerumit kantakse erinevate pipettide abil vastavasse sektorisse. Pärast seda, kui pipetist vabaneb tilk seerumit, lastakse see kohe viaali, millest see võeti. Enne vere võtmist pühitakse sõrm alkoholiga. Pärast süstimist sõrme pulpi pigistatakse nõelaga välja tilk verd. Klaaspulga või puhta objektiklaasi nurgaga kantakse kolm tilka verd (igaüks nööpnõelapea suurune) plaadile 0 (I), A (II) ja B (III) vereseerumite kõrval. rühmad. Pärast kellaaja märkimist segage verd iga kord uute klaaspulkadega vaheldumisi 0 (I), A (II) ja B (III) veregrupi seerumitega, kuni segu muutub ühtlaselt roosaks. Veregrupi määramine toimub 5 minuti jooksul. (jälgi kella). Selle aja möödudes lisatakse segu igale tilgale üks tilk isotoonilist naatriumkloriidi lahust. Pärast seda plaati verega raputatakse veidi, kallutatakse eri suundades, nii et segu seguneks hästi isotoonilise naatriumkloriidi lahusega, kuid ei leviks üle klaasi. Positiivse reaktsiooni korral ilmuvad segusse esimestel minutitel segamise algusest, isegi enne isotoonilise lahuse lisamist, pisikesed punased terakesed, mis koosnevad kokkukleepunud punastest verelibledest. Väikesed terad sulanduvad suuremateks ja mõnikord erineva suurusega helvesteks (aglutinatsiooni nähtus). Negatiivse reaktsiooni korral jääb segu ühtlaselt roosaks. Testimisel iga veregrupi kolme ülaltoodud seerumiga võib teatud kombinatsioon positiivsetest ja negatiivsetest reaktsioonidest välja kukkuda (joonis 1-4). Kui kõik kolm seerumit andsid negatiivse reaktsiooni, st kõik segud jäid ühtlaselt roosaks, kuulub testitud veri 0 (I) rühma. Kui ainult veregrupi seerum A (I) andis negatiivse reaktsiooni ning 0 (I) ja B (III) veregrupi seerumid andsid positiivse reaktsiooni, s.t neisse ilmusid terad, siis testitud veri kuulub A (II) rühm. Kui veregrupi seerum B(III) andis negatiivse reaktsiooni ning 0(I) ja A(II) veregrupi seerumid - positiivsed, siis testitud veri kuulub B(III) rühma. Kui kõik kolm seerumit andsid positiivseid reaktsioone, st granulaarsus ilmnes kõikjal, kuulub testitud veri AB (IV) rühma. Kõik muud kombinatsioonid näitavad definitsiooni viga. Veregruppide määramise vigade põhjused ja meetmed nende vältimiseks. 1. Liigne veri, kui võetakse liiga suur tilk. Veretilk peaks olema 10 korda väiksem kui tilk seerumit. 2. Kui seerumid on nõrgad või katsealuse erütrotsüüdid ei kleepu hästi, võib näha aglutinatsiooni (vt), kuna reaktsioon algab hilja või on kerge. Vaja on võtta usaldusväärseid seerumeid, mille aktiivsus on kontrollitud ja aegumiskuupäev pole möödunud. 3. Madalal ümbritseval temperatuuril võib tekkida mittespetsiifiline külma aglutinatsioon – panaglutinatsioon. Isotoonilise naatriumkloriidi lisamine ja sellele järgnev plaadi raputamine välistab tavaliselt külma aglutinatsiooni. Selle vältimiseks ei tohiks välisõhu temperatuur olla madalam kui 12 ja mitte kõrgem kui 25°. 4. Pika vaatluse korral hakkab segu kuivama perifeeriast, kus kohati tekib teralisus. Kui segu vedelas osas puudub granulaarsus, võib rääkida negatiivsest aglutinatsioonireaktsioonist.
Pärast veregrupi määramist peab arst viivitamatult esilehele kande tegema. Pärast töö lõpetamist tuleb plaat, pipetid ja klaasklaasid põhjalikult pesta kraani all sooja veega, pühkida kuivaks ja asetada kappi. ampullides või viaalides hoitakse kuivas ja soojas ruumis lukustatud kapis temperatuuril mitte üle 20 °.
Veregrupi määramist standardsete erütrotsüütidega (nn topeltreaktsioon) kasutatakse ainult laborites ja jaamades. Igapäevatöös kasutavad nad aglutinatsioonireaktsiooni standardseerumitega vastavalt ülalkirjeldatud meetodile.
Materjalid avaldatakse läbivaatamiseks ja ei ole raviretsept! Soovitame pöörduda oma tervishoiuasutuse hematoloogi poole!
Veregrupp ja Rh-faktor on spetsiaalsed valgud, mis määravad selle individuaalse iseloomu, nagu ka inimese silmade või juuste värvi. Rühm ja Rh on meditsiinis suure tähtsusega verekaotuse, verehaiguste ravis ning mõjutavad ka keha moodustumist, elundite talitlust ja isegi inimese psühholoogilisi omadusi.
Veregrupi mõiste
Isegi iidsed arstid püüdsid kompenseerida verekaotust, kandes verd inimeselt inimesele ja isegi loomadelt. Reeglina olid kõik need katsed kurva tulemusega. Ja alles 20. sajandi alguses avastas Austria teadlane Karl Landsteiner inimeste veregruppide erinevused, mis olid erütrotsüütides leiduvad spetsiaalsed valgud - aglutinogeenid, st põhjustasid aglutinatsioonireaktsiooni - erütrotsüütide liimimist. Ta oli patsientide surma põhjuseks pärast vereülekannet.
Aglutinogeene on 2 peamist tüüpi, mida tinglikult nimetati A ja B. Erütrotsüütide liimimine, see tähendab vere kokkusobimatus, tekib siis, kui aglutinogeen ühineb vereplasmas sisalduva samanimelise valguga - aglutiniiniga. ja b. See tähendab, et inimese veres ei saa olla samanimelisi valke, mis põhjustavad erütrotsüütide aglutinatsiooni, st kui seal on aglutinogeen A, siis see ei saa sisaldada aglutiniini a.
Samuti leiti, et veres võivad esineda mõlemad aglutinogeenid, A ja B, kuid siis ei sisalda see ühtegi tüüpi aglutiniini ja vastupidi. Kõik need märgid määravad kindlaks veregrupi. Seetõttu tekib erütrotsüütides ja plasmas leiduvate samanimeliste valkude kombineerimisel konflikt veregrupi üle.
Veregruppide tüübid
Selle avastuse põhjal on inimestel tuvastatud 4 peamist tüüpi veregruppi:
- 1., mis ei sisalda aglutinogeene, kuid sisaldab nii a- kui ka b-aglutiniini, on kõige levinum veregrupp, mida omab 45% maailma elanikkonnast;
- 2., mis sisaldab aglutinogeen A ja aglutiniin b, määratakse 35% inimestest;
- 3., milles on aglutinogeen B ja aglutiniin a, on see 13% inimestest;
- 4., mis sisaldab nii aglutinogeene A kui ka B ning ei sisalda aglutiniini, on see veregrupp kõige haruldasem, seda määratakse vaid 7%-l elanikkonnast.
Venemaal aktsepteeritakse veregrupi määramist AB0 süsteemi järgi, see tähendab vastavalt aglutinogeenide sisaldusele selles. Sellest lähtuvalt näeb veregruppide tabel välja selline:
Veregrupp on päritav. Kas veregrupp võib muutuda – vastus sellele küsimusele on ühemõtteline: ei saa. Kuigi meditsiini ajalugu teab ainsat geenimutatsioonidega seotud juhtumit. Veregruppi määrav geen asub inimese kromosoomikomplekti 9. paaris.
Tähtis! Otsus selle üle, milline veregrupp kõigile sobib, on tänaseks minetanud oma aktuaalsuse, nagu ka universaaldoonori ehk 1. (null)veregrupi omaniku mõiste. On avastatud palju veregruppide alamliike ja ülekantakse ainult ühe rühma verd.
Rh tegur: negatiivne ja positiivne
Hoolimata sellest, et Landsteiner avastas veregrupid, jätkusid vereülekande reaktsioonid vereülekande ajal. Teadlane jätkas oma uurimistööd ning koos kolleegide Wieneri ja Levine'iga õnnestus tal avastada veel üks spetsiifiline erütrotsüütide antigeeni valk - Rh-faktor. Esmakordselt tuvastati see reesusahvis, kust see ka oma nime sai. Selgus, et enamiku inimeste veres on ka Rh: 85% elanikkonnast on see antigeen ja 15% puudub, see tähendab, et neil on negatiivne Rh-faktor.
Rh-antigeeni eripära on see, et kui see siseneb inimeste vereringesse, kellel seda pole, aitab see kaasa Rh-vastaste antikehade tekkele. Korduval kokkupuutel Rh-faktoriga tekitavad need antikehad raske hemolüütilise reaktsiooni, mida nimetatakse Rh-konfliktiks.
Tähtis! Kui Rh-tegur on negatiivne, ei tähenda see ainult Rh-antigeeni puudumist punastes verelibledes. Veres võib esineda reesusvastaseid antikehi, mis võivad tekkida kokkupuutel Rh-positiivse verega. Seetõttu on Rh-antikehade olemasolu analüüs kohustuslik.
Veregrupi ja Rh faktori määramine
Veregrupp ja Rh-faktor on kohustuslikud järgmistel juhtudel:
- vereülekandeks;
- luuüdi siirdamiseks;
- enne mis tahes operatsiooni;
- raseduse ajal;
- verehaigustega;
- hemolüütilise kollatõvega vastsündinutel (reesus-sobimatus emaga).
Ideaalis peaks aga igal inimesel, nii täiskasvanul kui ka lapsel, olema teave rühma ja Rh kuuluvuse kohta. Kunagi ei saa välistada, et tegemist on raske vigastuse või ägeda haigusega, mille puhul võib hädasti vaja minna verd.
Veregrupi määramine
Veregrupi määramine toimub spetsiaalselt saadud monoklonaalsete antikehadega vastavalt AB0 süsteemile, see tähendab seerumi aglutiniinidele, mis põhjustavad erütrotsüütide aglutinatsiooni kokkupuutel samanimeliste aglutinogeenidega.
Veregrupi määramise algoritm on järgmine:
- Valmistage ette kolikoonid (monoklonaalsed antikehad) anti-A-roosa ampullid ja anti-B-sinised ampullid. Valmistage ette 2 puhast pipetti, klaasist segamispulgad ja klaasklaasid, 5 ml ühekordne süstal verevõtmiseks, katseklaas.
- Võtke veenist vereproove.
- Klaasklaasile või spetsiaalsele märgistatud plaadile kantakse suur tilk kolikloone (0,1 ml), väikesed tilgad uuritavat verd (0,01 ml) segatakse eraldi klaaspulkadega.
- Jälgige tulemust 3-5 minutit. Tilk segatud verd võib olla homogeenne - reaktsioon miinus (-) või helbed kukuvad välja - reaktsioon pluss või aglutinatsioon (+). Tulemusi peab hindama arst. Veregrupi määramise uuringu võimalused on toodud tabelis:
Rh faktori määratlus
Rh-faktori määramine toimub sarnaselt veregrupi määramisega, see tähendab, et kasutatakse Rh-antigeeni vastast seerumi monoklonaalset antikeha. Spetsiaalsele puhtale valgele keraamilisele pinnale kantakse samas vahekorras (10:1) suur tilk reaktiivi (zoliklooni) ja väike tilk värskelt võetud verd. Veri segatakse ettevaatlikult klaaspulgaga reaktiiviga.
Rh-faktori määramine kolikoonidega võtab vähem aega, kuna reaktsioon toimub 10-15 sekundi jooksul. Siiski on vaja vastu pidada maksimaalsele ajalimiidile 3 minutit. Nii nagu veregrupi määramise puhul, saadetakse laborisse ka katseklaas verega.
Tänapäeva meditsiinipraktikas kasutatakse laialdaselt mugavat ja kiiret ekspressmeetodit rühma kuuluvuse ja Rh-faktori määramiseks, kasutades kuivi solikloone, mis lahjendatakse vahetult enne uuringut steriilse süsteveega. Meetod kannab nime "Erythrotest-Groupcard", see on väga mugav nii kliinikutes kui ka ekstreemsetes ja välitingimustes.
Inimese olemus ja tervis veregrupi järgi
Inimverd kui selle spetsiifilist geneetilist tunnust ei ole veel täielikult uuritud. Viimastel aastatel on teadlased avastanud vere alarühmade variante, arendatakse uusi tehnoloogiaid ühilduvuse määramiseks jne.
Verele omistatakse ka võime mõjutada selle omaniku tervist ja iseloomu. Ja kuigi see küsimus on endiselt vastuoluline, on paljude aastate vaatlused märganud huvitavaid fakte. Näiteks usuvad Jaapani teadlased, et veregrupi järgi on võimalik kindlaks teha inimese iseloomu:
- 1. veregrupi omanikud on tahtejõulised, tugevad, seltskondlikud ja emotsionaalsed inimesed;
- 2. rühma omanikke eristab kannatlikkus, täpsus, visadus, töökus;
- 3. rühma esindajad on loomingulised isiksused, kuid samas on nad liiga mõjutatavad, domineerivad ja kapriissed;
- 4. veregrupiga inimesed elavad rohkem tunnetega kaasa, on otsustusvõimetud, kohati põhjendamatult karmid.
Mis puudutab tervist, siis olenevalt veregrupist arvatakse, et see on kõige tugevam enamikul elanikkonnast ehk 1. rühmas. 2. rühma esindajad on altid südamehaigustele ja vähile, 3. rühma omanikele on iseloomulik nõrk immuunsus, vähene vastupanuvõime infektsioonidele ja stressile ning 4. rühma esindajad on altid südame-veresoonkonna patoloogiatele, liigesehaigustele, vähile.
See artikkel keskendub veregrupi määramise meetoditele vastavalt AB0 süsteemile, samuti Rh-faktori määramise ekspressmeetodile.
Kõigepealt räägime veregrupi määramise eesmärkidest ja selle probleemi uurimise ajaloost. Huvi vereülekande vastu on olnud juba pikka aega. Isegi Vana-Egiptuses püüdsid arstid seda valada haavatutele, haigetele, surevatele. Doonoriteks kasutati enamasti noorloomi. Usuti, et neil on eriline loomulik jõud ja pealegi ei allu nad pahedele nagu inimesed. Inimeselt inimesele vereülekanne on enamasti ebaõnnestunud. Selle põhjused avastas Austria arst Karl Landsteiner palju hiljem. Ta tegi kindlaks, et inimesel on erinevaid antigeene ja antikehi, mis moodustavad erilise immuunsüsteemi.
Praegu on eraldatud umbes viissada erinevat antigeeni, kuid praktikas määratakse veregrupid AB0 süsteemi järgi.Selle süsteemi järgi veri sisaldab:
- aglutinogeenid A ja B (antigeenid). Lokaliseerimine - erütrotsüüdid;
- alfa- ja beetaaglutiniinid (antikehad). Lokaliseerimine - seerum.
Nende asukoht veres:
- Antigeen A koos alfa-antikehadega;
- Antigeen B koos beeta-antikehadega;
- Ainult alfa- ja beeta-antikehad.
Samal ajal ei saa samanimelisi antigeene ja antikehi leida, kuna nende kohtumine toob kaasa nn. d, mis põhjustavad punaste vereliblede hemolüüsi (hävitamist) ja muid patoloogilisi reaktsioone.
Veregrupi määramise tehnika on selle tunnuse teadmiste rakendamine.- 1. rühm: puuduvad aglutinogeenid, seerum sisaldab aglutiniini;
- 2. rühm: on A ja beeta;
- 3. rühm: on B ja alfa;
- 4. rühm: on A, B, aglutiniinid puuduvad.
Definitsiooni tehnika
Veregrupi määramise tehnika AB0 süsteemi järgi põhineb aglutinatsiooni visuaalsel vaatlusel.
Uuringud tuleb läbi viia, kui:
Esitage oma küsimus kliinilise laboratoorse diagnostika arstile
Anna Poniaeva. Ta on lõpetanud Nižni Novgorodi Meditsiiniakadeemia (2007-2014) ja kliinilise laboridiagnostika residentuuri (2014-2016).
Seda meetodit kasutatakse kõige sagedamini seroloogilistes laborites. Meetodi olemus seisneb selles, et testitavas veres määratakse A- ja B-rühma antigeenide olemasolu või puudumine, kasutades standardseid isohemaglutineerivaid seerumeid, samuti rühmaantikehi α ja β, kasutades standardseid erütrotsüüte. Reaktsioon standardseerumitega viiakse läbi ülalkirjeldatud viisil.
Reaktsioon standardsete erütrotsüütidega viiakse läbi järgmiselt.
Nõutav varustus
Standardsete erütrotsüütidega reageerimise seadmed erinevad selle poolest, et selleks on vaja kolme veregrupi standardseid erütrotsüüte: 0 (I), A (II), B (III). Standardsed erütrotsüüdid valmistatakse teadaoleva veregrupiga doonorite verest ja säilitatakse temperatuuril 4-8°C. Säilivusaeg 2-3 päeva.
Reaktsiooni protseduur
1. Veri uurimiseks võetakse veenist kuiva katsutisse, tsentrifuugitakse või jäetakse seerumi saamiseks 20-30 minutiks üksi.
2. Märgitud plaadile kantakse pipetiga katseklaasist kolm suurt tilka (0,1 ml) uuritavat vereseerumit ja nende kõrvale üks väike tilk (0,01 ml) standardseid erütrotsüütide rühmi.
3. Edasised meetmed viiakse läbi sarnaselt meetodile, kasutades standardseid isohemaglutineerivaid seerumeid: vastavad tilgad segatakse klaaspulkadega, plaati loksutatakse, jälgitakse 5 minutit, tilkadele lisatakse aglutinatsiooniga isotoonilist naatriumkloriidi lahust, misjärel tulemust hinnatakse.
Tabel 6-3. Veregrupi määramise tulemuste hindamine ristmeetodil
Tulemuste tõlgendamine
Hinnake mõlemast reaktsioonist saadud andmeid (standardsete isohemaglutineerivate seerumite ja standardsete erütrotsüütidega – tabel 6-3).
Standardsete erütrotsüütidega reaktsiooni tulemuste tõlgendamise eripära - rühma 0 (I) erütrotsüüdid peetakse kontrolliks (need ei sisalda antigeene, mis muudab spetsiifilise aglutinatsioonireaktsiooni mis tahes seerumiga põhimõtteliselt võimatuks).
Ristmeetodi tulemust peetakse usaldusväärseks ainult siis, kui reaktsiooni tulemuste hindamisel standardsete isohemaglutineerivate seerumite ja standardsete erütrotsüütidega langevad vastused uuritava vere rühma kohta kokku. Kui seda ei juhtu, tuleb mõlemad reaktsioonid uuesti läbi viia.
Veregruppide määramine monoklonaalsete antikehadega
Nõutav varustus
Veregrupi määramiseks kasutatakse monoklonaalseid antikehi, mille tootmiseks kasutatakse hübridoomi biotehnoloogiat.
Hübridoom on rakuhübriid, mis moodustub luuüdi kasvajaraku (müeloom) liitmisel immuunlümfotsüütidega, mis sünteesivad spetsiifilisi monoklonaalseid antikehi. Hübridoom omandab mõlema "vanema" omadused: kasvajarakule omase piiramatu kasvuvõime ja immuunlümfotsüütidele omase võime sünteesida antikehi.
Tabel 6-4. Skeem veregruppide määramise tulemuste hindamiseks, kasutades monoklonaalseid antikehi (anti-A ja anti-B soliclones)
Välja on töötatud standardsed reagendid – monoklonaalsed antikehad: anti-A ja anti-B kolikoonid, mida kasutatakse erütrotsüütide aglutinogeenide määramiseks.
Tsolikloone kasutatakse punase (anti-A) või sinise (anti-B) värvi lüofiliseeritud pulbri kujul, pulbrit lahjendatakse vahetult enne uuringut isotoonilise naatriumkloriidi lahusega.
Reaktsiooni tehnika
Zoliclones anti-A ja anti-B kantakse valgele tabletile üks suur tilk (0,1 ml) vastavate pealdistega: anti-A ja anti-B. Nende kõrvale kantakse üks väike tilk (0,01 ml) uuritavat verd. Pärast komponentide segamist jälgitakse aglutinatsioonireaktsiooni 2-3 minutit.
Tulemuste tõlgendamine
Tulemuste hindamine on väga lihtne (tabel 6-4).
Veregrupi määramise meetod tsolikloni abil võimaldab loobuda doonoriverest saadud standardsetest isohemaglutineerivatest seerumitest.