Лекция: Летальные инфекции кошек. Принципы диагностики и профилактики. Коронавирус у кошек — о ветеринарном просто

Ветеринарный врач-терапевт ИВЦ МВА

В современном мире очень многие люди отдают свое предпочтение кошкам за их большую независимость от человека, в отличие от собак, которым нужно уделять время; приспосабливание к одиночному образу жизни, грацию и умение согреть своего владельца в холодные зимние дни. Любящий и заботливый владелец пытается оградить своего питомца от неприятностей в виде различных заболеваний, которыми болеют кошки.

Данная забота проявляется в качественном питании и своевременной профилактике вирусных заболеваний. К сожалению, есть ряд видовых неизлечимых вирусных инфекций, которым подвержены кошки. При отсутствии симптомов заболевания и специфической диагностики можно прожить с животным длительное время, не подозревая о наличии хронической вирусной инфекции (далее ХВИ) у любимца. В данной статье хочется подробно раскрыть опасность ХВИ, постараться избежать данной проблемы при приобретении желанного котенка.

Итак, что же представляют собой хронические вирусные инфекции и какую опасность они в себе несут для наших питомцев. ХВИ – это вирусные заболевания, обладающие длительным инкубационным периодом, который может длиться от нескольких недель и продолжаться до нескольких лет. Заражение может произойти, как внутриутробно, так и при контакте здоровых кошек с больными животными, а также носителями.

Коронавирусы – этоРНК- содержащиевирусы. Данное название эти вирусы приобрели из-за схожести отростков в форме булав с corona spinarum. Причина инфекции – вирус семейства Коронавириде. Имеются 2 патогенных штамма - ближайшие родственники одного и того же микроорганизма. Один вызывает перитонит, другой – энтерит.

Делятся коронавирусы на 3 формы:

Бессимптомная форма - животное может быть носителем вируса и способно заражать других кошек, при этом жизни ничего не угрожает.

Легкая форма, она не опасна и способна вызывать достаточно легко протекающие недомогания – энтериты (кишечные коронавирусы кошек - FECV).

Высоко патогенная форма – вирус инфекционного перитонита кошек (FIPV). В организме происходят губительные изменения во всех системах и органах, что приводит к смерти.

Коронавирусный энтерит (FECV) относительно безопасный и возникает у животных в молодом возрасте, в основе симптоматики - жидкий стул, который редко приводит к смерти; Зато крайне опасен вирусный перитонит кошек, поскольку имеет высокую смертность. FIPV и FECV достаточно взаимосвязаны между собой, эти микроорганизмы считаются единой популяцией вирусов, но с разной степенью патогенных изменений. Исследования показали, что коронавирусный энтерит в процессе мутации переходит в вирусный перитонит.

Передача инфекции ороназальная, т.е. заражение происходит через дыхательный тракт воздушно-капельным путем, через фекалии, выкармливание котят, при вязках. У кошек, живущих поодиночке, подобное заболевание встречается реже, больший процент этого заболевания приходится на выставочных кошек, а также кошек, живущих в больших группах.

Симптоматика

Различают 2 формы ВИПК:

1. Экссудативная (с «выпотом»)

«Влажный» перитонит сопровождается ярким признаком наличия жидкости в грудной или брюшной полостях. Жидкость в основном имеет светло-желтый оттенок, имеется некоторая ее тягучесть.

При скоплении биологической жидкости в грудной полости, у животного происходит нарушение дыхания в результате выпота, при этом кошка принимает вынужденную позу. Дыхание чаще грудо-брюшного типа.

При скоплении жидкости в брюшной полости владельцы чаще обращают внимание на увеличившийся живот у питомца.

Также может наблюдаться:

повышенная температура (не всегда);
потеря веса;
общая слабость, угнетение;
увеличение лимфоузлов;
снижение или потеря аппетита.

2. Неэкссудативная («сухая»)

При этой форме симптомы часто слабо выражены. Данная форма трудно диагностируется. Характерные ее признаки – потеря веса и отсутствие аппетита.

Диагностика. Происходит комплексно. Для начала у животного забирают клинический и биохимический анализы крови; проводят УЗИ брюшной полости; серологические методы исследования (ИФА - определение количества антител к данному заболеванию; или ИХА – экспресс-тест), также исследуют выпотную жидкость.

Прогноз . Неблагоприятный. Иногда при экссудативной форме ВИП после удаления жидкости и проведенного симптоматического лечения развивается «сухая» форма болезни. Кошки с «сухим» ВИПК могут жить до года.

Лечение . К сожалению, лечения от этого заболевания нет, проводится лишь симптоматическая терапия, направленная на улучшение качества жизни питомца.

Профилактика . Направлена на уменьшение количества кошек, содержащихся в одном помещении (максимум 6-10 кошек). Чистота и своевременная дезинфекция используемых лотков и достаточное их количество, частая смена наполнителя.

Это хроническое вирусное заболевание, характеризующееся ослаблением иммунной системы, развитием анемий, лимфосарком. Очень подвержены этой инфекции молодые животные. ВЛК диагностируют во всех странах мира, заболевание поражает кошек разных возрастных групп и пород.

Пути передачи . Фекально-оральный (слюна, фекалии, выделения из носовой полости), через молоко инфицированных кошек, укусы, при контакте с больным животным от кошки к кошке, возможна передача блохами, а также при несоблюдении правил асептики и антисептики во время инъекций, взятия крови.

Патогенез . ВЛК обусловлено генетической предрасположенностью, а также иммунологической недостаточностью животных. У больных кошек с титром антител 1:32 клинической картины заболевания может не быть, но таких животных причисляют к вирусоносителям. Антитела могут не выявляться и у клинически больных кошек. ВЛК угнетает деятельность красного костного мозга, это приводит к анемии, снижает иммунитет и способствует развитию других болезней.

Клиническая картина Существуют три формы заболевания:

Устойчивая или персистентная. Иммунитет у такого животного сильно ослаблен, болезнь достаточно быстро прогрессирует и лечение чаще всего неэффективно.
Скрытая или латентная. У животного происходит нарушение кровообращения. Вирус проникает в лимфатическую систему и красный костный мозг. Животное начинает чаще болеть, появляются опухоли.
Переходная или транзиторная. Благодаря сильному иммунитету животное через 3 месяца после заражения восстанавливается.

Чащевсегоутаких животныхнаблюдаетсявыраженная анемия, иммуносупрессия (предрасположенность к другим инфекциям или ее наличие), лимфосаркома – множественная или нетипичная. Инкубационный период 60-80 дней, иногда от 2 до 6 лет. ВЛК протекает в латентной форме без проявления клинических симптомов инфекции и может не проявлять себя в течение длительного времени. Под влиянием негативных факторов (смена условий кормления, переохлаждение, стрессы) вирус активируется, и развивается заболевание. В самом начале можно отметить изменения в крови (лейкоцитоз, лимфоцитоз, появление атипичных клеток крови); бледность/иктеричность слизистых, увеличение лимфоузлов, похудание, снижение аппетита, расстройство пищеварения.

Диагностика

Происходит на основании клинико-гематологических, серологических и вирусологических исследованиях. К наиболее значимым методам диагностики можно отнести:

Иммуноферментный анализ (ИФА), иммунохроматографический анализ (ИХА). Зачастую встречаются ложноотрицательные результаты.
Клинический анализ крови.
Биохимия крови.
УЗИ брюшной полости.
Биопсия и гистология.

Лечение . Лечения не существует. Оно направлено на проведение симптоматической терапии и на улучшение качества жизни животного. Например, при сильно выраженной анемии назначается переливание крови, а также применение препаратов, которые стимулируют выработку эритроцитов в красном костном мозге. Назначаются препараты, стимулирующие повышение иммунной системы. При обнаружении лимфом назначается химиотерапия.

Профилактика . Вирус очень нестоек во внешней среде, вне живого организма он погибает через двое суток. Чтобы уничтожить этот вирус достаточно хорошо продезинфицировать помещения и предметы ухода за животными, миски и прочее. Содержание питомца в чистоте, полноценное питание и ограничение контакта с бездомными животными – залог здоровья питомца.

Это заболевание опасно только для кошек, для человека и других видов животных оно не представляет никакого риска.

Основным методом предупреждения данного заболевания является вакцинация. Для таких целей используется вакцина Purevax FeLV и Лейкоцел. Вакцинацию проводят с девятинедельного возраста. Производится иммунизация двукратно, с интервалом в 21 день. Далее прививать кошек следует раз в год.

Вирусный иммунодефицит (ВИК, FIV)

Инфекционное заболевание кошек, характеризующееся хроническим течением, сопровождающимся поражением иммунной системы, высокой летальностью.

Это заболевание приобрело эндемический характер у кошек во всем мире.

Вирус сохраняется при комнатной температуре около 4-х суток. При нагревании до 60 градусов происходит гибель вируса в течение получаса, во время кипячения он погибает. При обработке спиртосодержащими препаратами вирус инактивируется через 5-10 минут. К ультрафиолету ВИК достаточно устойчив.

ВИК чаще болеют бездомные кошки, приблизительный возраст животных составляет 5-10 лет.

Пути передачи . Основной путь – укусы больных животных, непородистые кошки чаще инфицируются; также инфекция распространена среди животных, у которых имеется свободный доступ на улицу. Заражение возможно при взаимном вылизывании. Вирус обнаруживают в слюне, крови и других жидкостях.

Клиническая картина. Клинические признаки довольно неспецифичны и достаточно разнообразны. Они отражают сопутствующие инфекции, которые развиваются на фоне снижения иммунной системы. У животных появляется:

Слабость;
Потеря аппетита;
Гингивиты;
Хроническая диарея;
Потеря веса и др.

Из-за того, что у животного происходит сбой в работе иммунной системы, к ВИК могут присоединиться различные инфекции: кальцивироз, хламидиоз, вирусный лейкоз и пр., которые усугубляют общее состояние.

У кошек с ВИК повышен риск развития лимфомы, клинические признаки могут быть сходны с проявлениями ВЛК.

Диагностика . Используют клинические лабораторные исследования: ОКА крови (может наблюдаться нейтропения, лимфопения, анемия, моноцитоз). При биохимическом анализе крови обнаруживается большое количество белка, повышение активности печеночных ферментов, азотемия, гипергликемия.

Существует несколько специфических исследований этого заболевания:

Метод иммуноферментного анализа (ИФА); ИХА.

Вирус можно определить методом ПЦР, если серологические тесты дают отрицательный результат.

Лечение. Специфическое лечение в настоящее время отсутствует.

Отмечено, что при лечении Зидовудином у многих кошек улучшается клиническое состояние и работа иммунной системы. Эти препараты дорогостоящие и могут вызывать значительные побочные реакции, например, анемию. Также применяются иммуномодуляторы, которые благотворно действуют на организм.

Клинически нездоровых и кошек с пониженной иммунной системой прививать не следует.

Профилактика . Вакцин не существует. Минимизирование контакта с кошками вне дома. Соблюдение режима питания, содержание животных в чистоте, дезинфекция предметов ухода и своевременная замена наполнителя в лотках. При появлении новых животных – обязательный карантин и диспансеризация нового питомца.

Любите своих питомцев!

Список используемой литературы:

Гаскел, Беннет: Справочник по инфекционным болезням собак и кошек, Аквариум-принт, 2015 г.
Различные источники из интернета

I. Какие анализы надо сдать подобранной на улице кошке или коту?

Строго говоря, назначать исследования должен лечащий врач в зависимости от состояния животного, но грамотный специалист все равно назначит какую-нибудь комбинацию из списка, приведенного ниже. Сдавать анализы я рекомендую даже совершенно здоровым на вид животным. Почему, станет ясно по ходу прочтения этой статьи. А вот у котят до 2-х месяцев брать кровь на анализы, в том числе для проверки на инфекции нет смысла.

Расположим анализы по приоритету:

На панлейкопению (методом ПЦР).
На вялотекущие вирусные инфекции (методом ПЦР).
Общеклинический анализ крови (перед сдачей требуется голодание 4 часа)
Биохимический анализ крови (перед сдачей требуется голодание 8-12 часов).
Анализ мочи. (общеклинический, а также соотношение белок-креатинин).

Рассмотрим подробнее:

Панлейкопения или чума кошек (парвовирусная инфекция). Самое заразное и смертоносное заболевание кошек. Не передается людям и другим видам животных. При отсутствии лечения часто приводит к смерти, особенно котят. Вакцинация импортным препаратом, ежегодно проводимая по всем правилам (с двойной дегельминтизацией) эффективно защищает от этой болезни. Поэтому, если у Вас дома есть непривитые кошки, то анализ крайне важен. Но даже если у Вас дома нет других кошек или они привиты — я все равно настоятельно рекомендую сдать этот анализ.

Даже совершенно здоровое на вид животное может быть носителем этого опаснейшего вируса (инкубационный период составляет от 4-х до 21 дня) и если анализ обнаружит вирус, врачи смогут предпринять соответствующие меры, чтобы смягчить протекание болезни. Пока результат не получен, рекомендую соблюдать .

Анализы на вялотекущие инфекции. Наиболее распространены 4 инфекции: вирусный лейкоз кошек, иммунодефицит кошек, вирусный перитонит кошек (ФИП) и коронавирус (вирусный энтерит). Не передаются человеку и другим видам животных. Сдача анализов крайне необходима, если у вас есть свои кошки (причем неважно, привиты они или нет, т.к. эффективных прививок от этих вирусов не существует). Если других кошек в квартире нет, то все равно желательно знать о наличии вируса в теле животного т.к. эти инфекции могут “дремать” годами без каких-либо видимых проявлений, но активизироваться в случае стрессового воздействия на организм (от сильного глистогонного препарата до наркоза при операции) и перейти в острую стадию. Эффективного лечения лейкоза, иммунодефицита и ФИП в острой стадии нет. Существует поддерживающая терапия, но и она не всегда эффективна. Пока результат не получен, рекомендую соблюдать .

Стоимость анализа методом ПЦР (рекомендую только этот метод) 300-600руб без учета стоимости забора крови за каждый (мазка из прямой кишки), в зависимости от лаборатории или клиники. Результат через 1-3 суток, также в зависимости от лаборатории. Некоторые лаборатории объединяют эти анализы в один т.н. профиль, что дает возможность сэкономить деньги. Например, лаборатория Нуклеом, через ветклинику Зооакадемия, предоставляет возможность сдать анализы на вялотекущие инфекции методом ПЦР в составе профиля за 900руб (причем туда НЕ входит, коронавирус, который рекомендуется сдать дополнительно за 300р, зато включена панлейкопения (!) и добавлен гемобартонеллез). На сегодняшний день, это самое выгодное из известных мне предложений по Москве. В других лабораториях и ветклиниках подобное исследование может обойтись в 2 раза дороже.

Общеклинический анализ крови. Перед сдачей необходимо голодание 4 часа. Очень информативен для врачей. Расскажет об острых состояниях, например, о воспалительных процессах в организме, и поможет врачу правильно подобрать препараты для лечения, если возникнет необходимость. Подтвердить или опровергнуть результаты исследований №1-2. При этом стоит недорого 300-600руб (без учета стоимости забора крови), поэтому строго рекомендуется к сдаче, при любом заборе крови, например, для исследований №1-2.

Биохимическое исследование крови. Перед сдачей необходимо голодание 8-12 часов. Покажет состояние внутренних органов и поможет врачу назначить правильное лечение при необходимости. Также как и исследование №3 анализ может помочь в подтверждении результатов исследований №2. Представляет собой набор показателей, поэтому стоимость варьируется в зависимости от их количества и от лаборатории. Как правило, нет необходимости ломать голову на тему, какие показатели сдавать т.к. любая лаборатория объединяет их в специальные профили. Можно сдать стандартный или расширенный. Стоимость варьируется в зависимости от клиники и лаборатории. Стандартный профиль стоит от 900р, расширенный от 1 200р без учета стоимости забора крови.

Важное замечание. Нет смысла сдавать биохимию крови: а) беременным, б) котятам до 4-х месяцев, в) ранее одного месяца после операции с наркозом! Результат будет сильно искажен и может ввести в заблуждение врача, который назначит ненужное лечение.

Анализ мочи. 5.1. Общеклинический. 5.2. Соотношение белок/креатинин.

Самое сложное по части получения материала исследование. Зато для его сбора не надо вести животное в клинику. Очень важное исследование, которое может выявить на ранней стадии проблемы с почками или признаки мочекаменной болезни, чего никогда не сможет показать исследование №3. В то же время в нем нет такой срочности, как в исследованиях №1-3. Мочу необходимо собирать в чистый(!) лоток. Можно использовать специальный набор для сбора мочи (стоимость 300-400р), представляющий собой гранулы, не впитывающие жидкость, и контейнер для мочи. Для сбора мочи из лотка также можно использовать обычный шприц (20 мл) без иглы. Транспортировать в лабораторию или ветклинику можно также в нем. Необходимые соблюдать некоторые условия. Анализ не должен храниться более 5-ти часов с момента сбора до момента помещения в лабораторное оборудование. Храниться и транспортироваться он должен в холоде. При транспортировке рекомендую использовать термопакет и хладогент. Если у Вас нет хладогента, то можно использовать замороженные овощи J. Средняя стоимость — около 600р.

II. Где сдавать анализы?

А) Можно в клинике, совместив с первичным приемом врача. В любом случае Вам придется идти к врачу с результатами анализов, т.к. интерпретация анализов №3-5 требует врачебной квалификации.

Б) Напрямую в специализированных лабораториях. В этом случае Вам придется самим решать что сдавать, а что нет.

При этом, многие ветклиники имеют собственные лаборатории, способные проводить исследования №3-5, в то время как исследования на вирусы требуют более дорогостоящего оборудования, поэтому клиники, не имея его, отправляют забранный материал в специализированные лаборатории, с которыми они сотрудничают. Наиболее известные лаборатории в Москве (по алфавиту): Веттест, Неовет, Нуклеом, Пастер, ЦМД (звенигородское шоссе), Шанс био (сеть). С какими лабораториями сотрудничает конкретная ветклиника (желательно, чтобы их было более одной), а также стоимость анализов рекомендую узнавать заранее. Как правило, во всех лабораториях имеется высококачественное оборудование, но качество полученных результатов, к сожалению, сильно зависит от человеческого фактора. Так что это в какой-то степени лотерея, и порой приходится пересдавать анализы в разных лабораториях, чтобы подтвердить или опровергнуть тот или иной результат.

О правилах читайте в отдельной статье.

В лабораторной диагностике ветеринарной клиники «Стелла» доступны: ПЦР-комплексы для выявления ДНК возбудителей, вызывающих инфекции, глистные инвазии и болезни кожи у собак и кошек, а также ПЦР-диагностика по определению пола у птиц и выявлению цирковируса птиц. Кроме этого, диагностика хламидиоза/микоплазмоза/уреаплазмоза теперь проводится путем выделения в культуре клеток, что позволяет более рационально подходить к лечению этих инфекций.

ПЦР-комплексы для собак

Стоимость каждого комплекса – от 1500 до 2000 рублей, что значительно дешевле ПЦР-диагностики, проводимой по несколько взятым возбудителям. Время исследования – 1-2 суток.

ПЦР-комплекс респираторный для собак №1 (респираторный коронавирус, вирус парагриппа, чума, стрептококк, стафилококк) – комплексный анализ для выявления инфекционных патогенов у собак с симптомами поражения верхних дыхательных путей (кашель, ринит, коньюктивит, лимфаденит, гипертермия). Актуально для щенков, подобранных на улице или взятых из приютов. Первый этап для диагностики «питомникового кашля», так как он может вызываться любым из перечисленных возбудителей.

ПЦР-комплекс респираторный для собак № 2 (аденовироз, бордетеллез, герпесвирус, хламидиоз, микоплазмоз) – диагностический комплекс на выявление патогенов, наиболее часто вызывающих воспаление верхних дыхательных путей и коньюктивы. Является вторым этапом для диагностики «питомникового кашля», при условии получения отрицательного анализа по комплексу № 1.

ПЦР-комплекс для собак № 3 вирусный (парвовирус, коронавирус, ротавирус, чума, боррелиоз) – этот вид исследования предпочтителен для собак, особенно щенков, с симптомами поражения желудочно-кишечного тракта – диарея, рвота, повышенная температура, резкое исхудание, артрит. Парвовирус и коронавирус

ПЦР-комплекс для собак № 4 инфекции, поражающие печень (токсоплазмоз, бабезиоз, инфекционный гепатит, лептоспироз, гемобартонеллез) – анализ проводится собакам, у которых присутствуют признаки поражения печени – анемия, рвота, диарея, желтушность сдизистых оболочек, признаки гепатомегалии на УЗИ.

ПЦР-комплекс для собак № 5 клещевые инфекции (эрлихиоз 1 тип, тейлериоз, бабезиоз, анаплазмоз) – анализ проводится собакам, у которых в анамнезе присутствуют укусы клещей, анемия невыясненной этиологии, гепатит.

ПЦР-комплекс для собак № 6 клещевые инфекции (гепатозооноз, эрлихиоз тип 2, бартонеллез, боррелиоз – болезнь Лайма) – анализ проводится собакам, у которых в анамнезе присутствуют укусы клещей, анемия невыясненной этиологии, артрит (полиартрит), гепатит, а также вторым этапом после комплекса № 5, когда не удается выяснить причину анемии.

ПЦР-комплексы для кошек

ПЦР-комплекс респираторный для кошек №1 (аденовирус, токсоплазмоз, ринотрахеит, хламидиоз, микоплазмоз) – необходим для выявления патогена, вызывающего конъюктивит, ринит (слезотечение, чихание, кашель). Эти инфекции наиболее часто встречаются у кошек, приобретенных в питомниках и подобранных на улице. При выявлении микоплазмы рекомендуется дополнительно сдать анализ на определение чувствительности к антибиотикам.

ПЦР-комплекс урогенитальный для кошек № 2 (уреаплазмоз, токсоплазмоз, хламидиоз, микоплазмоз, цитомегаловирус) – рекомендуется обследовать кошку перед вязкой, а также кота, во избежание внутриутробного инфицирования плодов. Также обследуется кошка, если вязки были неудачными или ветврач диагностирует цистит, пиометру.

ПЦР-комплекс для кошек № 3 вирусный (иммунодефицит, инфекционный перитонит, лейкемия, гемобартонеллез, панлейкопения) – данный вид комплексного обследования желательно проводить породистым кошкам – британцам и шотландцам, аббисинцам, персидским породам. Но не забываем и про домашних кошек! В каком случае? Если наблюдается диарея неясной этиологии, истощение, анемия, гингивит, дерматит, увеличение объема живота. Очень часто встречается одновременно несколько инфекций.

ПЦР-комплекс для кошек № 4 инфекции слизистых оболочек (вирус паппиломы тип 1 и 2, вирус саркомы, стрептококк и стафилококк) – для диагностики берется смыв, если у кошки образовались паппиломы, язвы или опухоли в ротовой полости (если ветврачом исключена калицивирусная инфекция или терминальная стадия почечной недостаточности).

Общие комплексы для собак и кошек:

ПЦР-комплекс для обнаружения микрофлоры, вызывающей пародонтит (трепонема, актинобациллы, порфирономас гингивалис и другие)– стоматолог может назначить этот вид диагностики, если обнаруживает у животного чрезмерное отложение зубного налета, стоматит, пародонтит, кариес, расшатывание зубов. Выделение возбудителя позволяет правильно назначить лечение и подобрать антибиотики.

ПЦР-комплекс для выявления бактериальной микрофлоры кожи (золотистый стафилококк, стрептококк, кишечная палочка, протей мирабилис) – актуален при дерматитах собак и кошек, хорьков, когда животное длительно страдает и ситуация не позволяет ждать результатов бакпосева.

ПЦР-комплекс для выявления дерматофитов кожи (эпидермофития, трихофития, микроспория, малассезия) – перечисленные грибы являются самыми часто встречающимися патогенами, вызывающими грибковые инфекции кожи (стригущий лишай, атопический дерматит, наружный отит и межпальцевый дерматит). Необходима очень точная дифференциация с помощью ПЦР-диагностики, так как обычный мазок не всегда позволяет это сделать.

ПЦР-комплекс для выявления гельминтов (анкилостомоз, токсокароз, криптоспоридиоз, описторхоз) – очень часто у щенков и котят глистные инвазии протекают скрыто. Животное здорово на вид, хорошо кушает. Яйца гельминтов не всегда выделяются с калом. Поэтому обычный анализ на яйцеглист иногда оказывается ложноотрицательным. В данном случае лучше проводить ПЦР-исследование на наличие гельминтов.

Патология довольно редко протекает в острой форме или имеет значительное влияние на состояние здоровья человека - большинство пациентов даже не догадываются об инфекции. Но существует обстоятельство, когда токсоплазмоз крайне опасен - это беременность. Заражение во время вынашивания ребенка очень опасно - возбудитель способен стать причиной необратимых изменений в организме ребенка, вызвать его гибель еще до рождения.

Что такое токсоплазмоз? Характеристика заболевания

Токсоплазмоз классифицируют в зависимости от способа заражения:

Приобретенный - инфицирование происходит после рождения. Чаще всего протекает незаметно, без выраженной симптоматики, не приносит дискомфорта (хронический тип). Реже встречается острая форма - отличается заметными симптомами.
Врожденный - внутриутробное инфицирование плода. Заражение может стать причиной недоразвитости плода, уродств, инвалидности или смерти.

В зависимости от зоны их жизнедеятельности выделяют типы болезни:

Кардиологический - поражение сердечной мышцы, сопровождается соответствующей симптоматикой: слабость, боли в грудине, одышка.
Лимфонодулярный - поражение лимфатических узлов (их увеличение и болезненность при пальпации).
Офтальмологический - нарушения зрительной функции, поражение глаз при токсоплазмозе.
Менингоэнцефалический - нарушения нервной системы. Самый заметный признак - систематические головные боли.
Генерализованный - с одновременным поражением нескольких систем органов.

Причины и развитие токсоплазмоза

Существуют пути передачи токсоплазмоза:

При контакте с кошкой - простейшие в большом количестве содержатся в фекалиях животных, могут переноситься на шерсть, продукты питания, предметы мебели.
При поедании недостаточно хорошо обработанного зараженного мяса.
При переливании крови от донора, инфицированного токсоплазмами.
При пересадке зараженных внутренних органов.
Внутриутробная инвазия - плод инфицируется от болеющей матери.

Патология протекает незаметно у людей со сформированным иммунитетом, а в случае ослабленной защиты организма, инфекция может дать знать о себе ярко выраженными симптомами. Дефекты иммунитета могут быть вызваны такими серьезными болезнями, как СПИД, онкологические образования. Также активно проявляется болезнь у детей, при внутриутробной инвазии или приеме лекарств, подавляющих работу иммунной системы.

Чем опасен токсоплазмоз? Иммунитет к болезни

Для здорового взрослого человека токсоплазмы не опасны. Инвазия остается незамеченной, не наносит повреждений, которые отобразились бы на самочувствии заболевшего или функционировании внутренних органов.

Опасность существует лишь в случаях:

При беременности - внутриутробное заражение наиболее опасно - плод может получить увечья еще до рождения или погибнуть.
При тяжелых патологиях, угнетающих иммунитет - у больных СПИДом, пациентов с онкологическими опухолями, а также перенесших агрессивное лечение препаратами, подавляющими естественную защиту организма.

При опасном протекании токсоплазмоза, возбудитель может вызвать необратимые изменения в организме или даже стать причиной инвалидности, летального исхода.

Опасность токсоплазмоза может выражаться в изменениях в организме:

Паралич отдельных участков тела.
Кома.
Частичная потеря чувствительности.
Спонтанный выкидыш, замирание плода.
Слепота.
Глухота.
Воспалительные процессы в сердце, легких с последующей остановкой их работы (что становится причиной смерти пациента).

При внутриутробном заражении ребенок часто погибает в короткие сроки после рождения или же имеет патологии, существенно влияющие на его развитие и жизнедеятельность.

При перенесении токсоплазмоза формируется стойкий иммунитет на всю жизнь и в дальнейшем можно не бояться этой болезни даже при стремительном снижении иммунитета или при беременности.

Общие симптомы токсоплазмоза

Признаки заболевания очень обширны и зависят от степени развития патологии, ее локации в организме человека.

К общим симптомам токсоплазмоза относят:

Головная боль.
Повышение температуры тела (от 37 до 39 C).
Кожные симптомы токсоплазмоза: высыпания аллергического характера (крапивница).
Увеличение лимфатических узлов, их болезненность при пальпации.
Боли в мышечных тканях и суставах.
Увеличение селезенки и печени (заметно при пальпации).
Желтушность кожных покровов, глазного яблока.
Нарушения зрения (частичная или полная слепота, двоение изображения, вспышки).
Хроническая усталость, вялость, сонливость.

Подобную симптоматику часто путают с простудой, гриппом или ОРВИ.

Острая форма: симптомы

Острая стадия токсоплазмоза также чаще всего похожа на ОРВИ.

Самые характерные симптомы:

Повышение температуры.
Увеличение лимфатических узлов (шейных и затылочных).
Частые головные боли.
Боль в мышцах и суставах.
Общая слабость, потливость, быстрая утомляемость, сонливость.

Признаки острого токсоплазмоза исчезают через 5-7 дней. Если иммунная система исправно функционирует, болезнь больше не дает о себе знать. При наличии угнетающих факторов, токсоплазмы поражают тело локально, вызывают воспалительные процессы в органах, нарушая их работу.

Симптомы хронической формы

Хроническая форма имеет смазанную симптоматику, и заподозрить болезнь по ощутимым признакам тяжело.

Токсоплазмоз имеет те же признаки, что и любая вяло протекающая форма инфекции:

Головная боль.
Субфебрильная температура тела (37-37,5 C).
Увеличенные лимфатические узлы.
Слабость, хроническая утомляемость.
Снижение работоспособности, концентрации внимания.

Хроническая форма проявляется через 5-7 дней после попадания простейших в тело человека из-за контакта с кошачьими фекалиями или через 2-3 недели после поедания недостаточно обработанного зараженного мяса.

При наличии таких показаний к диагностике, врач назначает ряд анализов, направленных на выявление простейших и антител к ним в организме пациента. Комплекс исследований включает в себя опрос пациента (наличие симптомов, когда впервые возникли, не появились ли новые питомцы или не сменились ли недавно предпочтения в еде) и лабораторные анализы.

Анализы (помимо общего и биохимического исследования крови) информативны и позволяют точно диагностировать патологию и назначить лечение, если это требуется.

Токсоплазмоз при беременности - в чем опасность?

При этом важна тяжесть поражений, которую может вызвать токсоплазма: на сроках формирования внутренних органов плода (первый триместр) поражения будут самыми серьезными и часто несовместимыми с жизнью. При заражении сформировавшегося эмбриона в 3-м триместре урон будет незначительным и меньше повлияет на состояние здоровья малыша в дальнейшем.

Если результаты диагностики свидетельствуют об инфицировании матери до 24 недели беременности, то гинеколог рекомендует прерывание. При отказе от аборта назначается лечение.

Важно! Токсоплазма опасна для плода только в случае инфицирования женщины не более чем за 3 месяца до беременности или после зачатия.

Как определить время попадания инфекции в тело будущей матери?

Даже при выявлении острой стадии токсоплазмоза последствия для ребенка не всегда обязательны или опасны - возможно, ребенок избежит инфекции. Чтобы убедиться в этом, доктор рекомендует провести анализ околоплодных вод: путем прокалывания плодного пузыря через переднюю брюшную стенку, осуществляется забор материала для изучения. Такой метод будет информативен не ранее, чем через 30 суток после инфицирования женщины.

Симптомы токсоплазмоза при беременности не отличаются от протекания болезни в обычный период жизни.

К каким докторам следует обращаться, если у Вас токсоплазмоз?

Лечением токсоплазмоза занимается инфекционист. Но с подозрением на такой диагноз к нему попадают чаще всего по направлению от терапевта, офтальмолога, невролога, гинеколога (при планировании беременности).

Важно! Лечение проводится только в случае острого протекания болезни на фоне сбоев в работе иммунной системы или при беременности. Хронический токсоплазмоз не представляет опасности для женщины и ее будущего ребенка.

Переносчиками возбудителей гельминтозов чаще всего бывают животные. Самый распространенный путь заражения – пероральный. Однако роль переносчиков могут выполнять и некоторые насекомые, в частности, комары.

Симптомы дирофиляриоза

Дирофиляриозом люди заболевают после укуса зараженного комара. Возбудителем инвазии являются нематоды дирофилярии – нитевидные, круглые черви белого цвета. Длина взрослых особей колеблется в диапазоне 50…400 мм, ширина – 0,37…1,2 мм. Самки в два-три раза крупнее самцов.

Время распространения инвазии длится с апреля по октябрь – в зависимости от географической зоны. Чаще всего заражение происходит там, где много комаров, – в сельской местности, в прибрежных полосах водоемов и рек, заросших растительностью.

Механизм заражения следующий. Комар кусает инвазированную собаку, и вместе с ее кровью втягивает в кишечник личинки дирофилярий. Через 2 недели пребывания в комарином организме микрофилярии достигают инвазионной стадии и перемещаются в слюнные железы насекомого. Теперь комару, чтобы передать болезнь дальше, остается только укусить какое-то животное и внедрить в его тело готовые для развития микрофилярии.

Размножения дирофилярий в организме человеке в медицинской практике зафиксировано не было. Это объясняют тем, что внутри человеческого организма самцы и самки не встречаются. Из всего вышесказанного должно быть ясно, что больной для окружающих людей не заразен. И, тем не менее, для самого зараженного инвазия довольно опасна, а в некоторых случаях может закончиться даже смертью.

Различают две формы инвазии – подкожный и сердечный дирофиляриоз.

Главная опасность этой инвазии состоит в отсутствии выраженной симптоматики. В первоначальный момент заражения болезнь проявляет себя появлением на коже (месте, куда укусил комар) небольшой опухоли с ощущением жжения и зуда. Но это проявление поначалу редко связывается с гельминтами.

При поражении глаз (чаще всего одного) черви могут обитать непосредственно в глазном яблоке, коже век, в конъюнктиве. При этом ощущается присутствие чужого тела в глазу, веки воспаляются, отекают и зудят. Глаза с трудом открываются, при моргании возникает сильная боль. При всем этом острота зрения не падает.

Дирофилярии в половом органе и мошонке мужчин диагностируются редко. Проявляются они в виде небольших уплотнений, которые могут на время исчезать и снова появляться. Может возникать боль и дискомфорт, ощущаться перемещение чужеродного тела.

Непродуктивный кашель, реже может появляться мокрота с кровью.
Затрудненное дыхание, одышка.
Снижение аппетита, потеря веса.
Субфебрильная температура.

Интоксикация организма

При любой форме инвазии дирофиляриями организм интоксицируется, в результате чего страдает центральная нервная система. Появляется слабость, усталость, больной становится раздражительным, у него нарушается сон.

Лечение дирофиляриоза у человека

Основным способом лечения дирофиляриоза у людей является хирургическое вмешательство. Узлы и образования с гельминтами удаляются и при необходимости исследуются. При этом возникает необходимость исключить перемещение гельминта во время операции. Для этого больному дают дитразин.

После операции назначается ивермектин или его аналоги. Дополнительно может потребоваться прием:

противовоспалительных препаратов для снятия воспаления;
антигистаминных средств для борьбы с аллергией;
успокоительных.

При глазной форме болезни операция проводится незамедлительно с последующим назначением противовоспалительных лекарств:

левомицетина;
колбиоцина;
сульфата натрия;
дексаметазона.

Назначаются антигистаминные средства: эриус, кларитин, зиртек, диазолин.

Диагностика

Когда-то считалось, что заражению дирофиляриями подвержены только животные, главным образом собаки. Но со временем были зарегистрированы случаи заражения дирофилярией людей.

Основным способом определения инвазии является диагностика по анализу крови. Он предполагает использование различных лабораторных исследований крови больного, в том числе таких.

Кроме крови может исследоваться моча больного. После извлечения гельминта проводится его макроскопическое исследование.

При диагностировании инвазии полезно изучение анамнеза, позволяющее выявить условия, при которых произошло заражение. Место пребывания больного, его контакты, отдыхал ли на природе, подвергался ли укусам насекомых и т. п.

Факторами, способствующими заболеванию дирофиляриозом, считается наличие бездомных и домашних кошек и собак, выезд на рыбалку, охоту, сбор грибов и ягод. Наличие у больного сада или дачи.

Профилактика заболевания

Профилактика заболевания предусматривает следующие мероприятия.

Использование инсектицидов для уничтожения комаров и других насекомых, проникших в жилье, особенно, если их много.
Защиту от комаров репеллентами и специальной одеждой при нахождении на природе, особенно, в вечернее и ночное время.
Обязательное обследование при возвращении из туристических поездок или командировок из стран, где отмечается высокий уровень заражения.
Защита домашних кошек и собак специальными ошейниками или иными средствами против кровососущих насекомых.

Поскольку источником болезни являются кошки и собаки, а комары выполняют лишь роль переносчика, нужно контролировать здоровье домашних животных. При заражении дирофиляриями домашние питомцы:

теряют аппетит;
становятся вялыми и пассивными;
у них повышается температура;
появляется кашель.

Дирофиляриоз у человека на фото

Дирофиляриоз – сравнительно редкая болезнь, многие врачи за всю свою практику так ни разу и не сталкиваются с ней. Поэтому желательно, чтобы люди, особенно живущие или работающие в эндемичных по этой инвазии зонах, хотя бы в общем знали симптомы и лечение дирофиляриоза у человека.

Фото дирофилярий во всех их стадиях и проявлениях легко могут заменить отсутствие личной практики. Впечатление у большинства людей они оставляют неизгладимое. Увидев один раз на фотографии, как выглядит червь под кожей или в глазу, его не трудно будет диагностировать и в собственном организме.

Полезное видео

Дирофиляриоз – неспецифическое, относительно редкое для человека заболевание. Но если заражение произошло, оно иногда требует дорогостоящего и длительного лечения. Важно диагностировать болезнь как можно быстрее.

При обнаружении на коже необычных узелков, ощущении присутствия чужеродного тела, особенно, если оно двигается, нужно немедленно обратиться к врачу. Промедление может привести к развитию гельминтоза и возрастанию ущерба для здоровья.

Анализ на описторхоз: общий, ифа, кала, где и как сдавать, расшифровка результатов

Какие анализы на описторхоз нужно сдавать
Анализ крови на описторхоз
Общий
Биохимический
Расшифровка результатов
Анализ кала на описторхоз
Как правильно сдавать кал
Где можно сдать анализы на описторхоз
В Москве
Сколько делается анализ и насколько он точен

Какие анализы на описторхоз нужно сдавать

Анализ на описторхоз - наиболее ценный метод диагностики. Лечащий врач может назначить больному следующие анализы: исследование каловых масс на наличие яиц гельминта, общий и биохимический анализ крови, ПЦР-диагностику, исследование антител к возбудителю инфекции, анализ мочи. Чаще всего назначают исследование кала и крови. Об этих методах речь пойдет ниже.

Анализ крови на описторхоз

восточный сосальщик ланцетовидный сосальщик печеночная двуустка сибирский сосальщик острицы аскариды головные вши лямблии сибирская двуустка кошачья двуустка кровяные сосальщики бычий и свиной цепни

В норме у человека антитела к возбудителю заболевания в плазме отсутствуют. Поэтому их обнаружение в сочетании с симптоматикой позволяют с уверенностью говорить о наличии инвазии.

Также периодически сдавать кровь на анализ рекомендуется пациентам, продолжительное время проживающим в районах эндемичных описторхозу, употребляющим не прошедшую необходимую термическую обработку рыбу, имеющим заболевания желчевыводящих путей и печени.

Выделяют следующие виды анализов крови на описторхоз:

общий
Биохимический
Иммуноферментный

Общий

Общий анализ крови и биохимия используются на начальном этапе диагностики для установления общих признаков инфицирования.

Биохимический

Биохимический анализ крови – это комплексная лабораторная диагностика, проводимая с целью оценки состояния внутренних органов и систем и выявления потребности организма в микроэлементах и уровня ее удовлетворения. По биохимическим показателям состава крови проводят первичную диагностику функционирования печени, почек, поджелудочной железы и иных органов, получают данные об обменных процессах (липидном, белковом, углеводном метаболизмах).

Если при проведении биохимического анализа отмечается повышенный уровень билирубина, трансаминаз (АЛТ и АСТ), сулеймовой и тимоловой проб, амилазы (фермент поджелудочной железы) крови, то это косвенно позволяет подозревать описторхоз. Все эти показатели свидетельствуют о поражении внутренних органов (больше всего печени) и нарушении их функций.

ИФА

Суть метода состоит в том, что в лунки полистиролового планшета сорбируют (закрепляют) антигены возбудителя описторхоза Opisthorchis felineus в определенной концентрации.

Исследуемый образец (сыворотка крови) титруют последовательным разведением в каждой последующей лунке (например, 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 и т.д.). При наличии антител к Opisthorchis felineus происходит их связывание с антигеном, сорбированном на планшете. Эти антитела обнаруживают с помощью добавления меченного ферментом реагента (конъюгата), который специфически связывается с ними.

После добавления на конечном этапе субстрата — бесцветного вещества — происходит ферментативная реакция. Её результатом является окрашивание субстрата, интенсивность которого пропорциональна количеству выявленных (связанных с коньюгатом) антител. Результат оценивается спектрофотометрически или визуально.

Расшифровка результатов

О наличии или отсутствии гельминтоза говорят, если расшифровка результатов показывает увеличение некоторых компонентов крови или изменение некоторых характеристик:

Исследуемые компоненты и элементы крови	Описторхоз есть	Описторхоза нет
Эозинофилы	> 80-90%
Лейкоциты (кол-во на 1 л крови)	> 10 x10^9	4-9 х 10^9
СОЭ (ед. измерения мм/ч)	Выше нормы	От 2 до 10 у мужчин
		От 3 до 15 у женщин
		От 12 до 17 у детей
Гемоглобин (ед. измерения г/л)	Менее 100	От 120 до 160
IgM	Присутствуют при остром описторхозе	Отсутствуют
IgG	Присутствуют при хроническом описторхозе	Отсутствуют
Лимфоциты	Выше нормы	18-40% у взрослых
Лимфоциты	Выше нормы	от 30 до 75% у детей в зависимости от возраста
АЛТ (печеночный фермент, ед. измерения Ед/л)	> 40	От 10 до 40 в зависимости от возраста и пола
АСТ (печеночный фермент, ед. измерения Ед/л)	> 30	От 10 до 30 в зависимости от возраста и пола
Билирубин (ед. измерения мкмоль/л)	> 17,1	От 3,4 до 17,1 в зависимости от возраста и пола

Анализ кала на описторхоз

Обязательное условие диагностики на описторхоз – это исследование кала. При продолжительном течении болезни увеличивается вероятность выделения яиц глистов, а их численность укажет на степень тяжести инвазии.

Диагностика описторхоза по клинической картине заболевания трудна из-за отсутствия симптомов и синдромов, характерных только для данной болезни. Распознать описторхозную инвазию несложно через месяц после заражения, когда гельминты начинают откладывать яйца (овоскопическое исследование кала и дуоденального сока больного).

Большие затруднения встречаются в распознавании ранней фазы описторхоза. Наличие у новоселов в интенсивном очаге описторхоза лихорадки, гепатомегалии, эозинофильного лейкоцитоза заставляет подозревать раннюю фазу этого гельминтоза.

Описторхоз протекает при довольно разнообразных клинических явлениях. Поэтому необходимо тщательное клинико-лабораторное и рентгенологическое (в т. ч. ультразвуковое) обследование больных.

Яйца кошачьей двуустки у инвазированных чаще обнаруживаются при дуоденальном зондировании, чем в кале. При слабой инвазии их иногда находят лишь во время повторных зондирований. При исследовании кала по методу Фюллеборна яйца опускаются в осадок. Наиболее эффективен метод осаждения Горячева.

Как правильно сдавать кал

Сдача анализа кала предусматривает небольшую несложную подготовку. Перед забором материала рекомендовано опорожниться от мочи, а затем провести гигиенические процедуры с наружными половыми органами, это поможет предупредить попадание в кал влаги и капель мочи.

Фекалии для исследования нужно собирать в сухие емкости по типу «утки», вместо этого можно натянуть на сиденье унитаза пищевую пленку.

Другое условие получения достоверного результата – сдаваемый каловый образец обязательно должен быть свежим. По этой причине лучше всего использовать утренние порции кала, если это невозможно, образец до утра хранят в холодильнике.

Анализ кала на описторхоз будет точным при соблюдении таких условий:

материал получен естественным путем (без применения слабительных препаратов, клизм);
до сдачи анализа минимум за двое суток прекращают применение средств, которые стимулируют перистальтику кишечника;
на протяжении нескольких суток соблюдалась здоровая диета.

Медики акцентируют внимание, что женщинам во время менструации лучше отказаться от сдачи анализа. В противном случае есть вероятность попадания в кал крови.

Для большей надежности следует брать кал в большом количестве, нежели при иных исследованиях, причем в разных местах.

Где можно сдать анализы на описторхоз

В Москве

Примерные цены по РФ:

общий анализ крови ─ 400-500 руб;
общий анализ мочи – 300-400 руб;
биохимия крови ─ 800 руб;
копрограмма – 350-500 руб;
ПЦР – 800 руб;
ИФА – 800-900 рублей.

Сколько делается анализ и насколько он точен

Длительность исследования зависит от разновидности анализа и места, где он был проведен. Обычно получение результатов занимает несколько дней, однако существуют лаборатории, где за дополнительную плату расшифровку могут выдать быстрее. Средняя точность результата - 70-80%.

👉Мнение экспертов о препарате.

Коронавирусные инфекции кошек и собак вызываются представителями рода Coronavirus (семейство Coronaviridae). Основным проявлением коронавирусной инфекции у собак является диарея. V кошек коронавирусы вызывают энтериты и инфекционный перитонит, широко распространенные среди диких и домашних кошек.

Возбудителем коронавирусной инфекции у собак является Canine coronavirus, вызывающий острый коронавирусный энтерит. Заболевание передается при непосредственном контакте с носителем вируса (через слюну и фекалии). Данной инфекции подвержены собаки любого возраста, однако чаще всего поражаются щенки и ослабленные животные, которые уже перенесли другую болезнь, например парвовирусную инфекцию.

Основные симптомы заболевания - рвота и диарея, иногда с примесью крови, обезвоживание организма, потеря в весе, апатия. Через 3-4 недели после выздоровления может развиться повторное заболевание. При проведении диагностики коронавирусный энтерит собак необходимо дифференцировать от парвовирусного энтерита, аденовирусной инфекции кишечного типа и чумы плотоядных.

Коронавирусы, поражающие кошек, представлены двумя биотипами: FECV, или коронавирус энтерита кошек, и FIPV - вирус инфекционного перитонита кошек (2, 3). Носителями FECV является 16-50% домашних кошек, у которых вирус локализуется в тонком кишечнике, не вызывая заболевания или становясь причиной легкой диареи. В то же время у 5-12% носителей может наблюдаться мутация условно-патогенной кишечной формы FECV в патогенную (FIPV), что приводит к развитию болезни (2).

Инфекционный перитонит (ИП, FIP) кошек, заканчивающийся, как правило, летально, протекает в двух формах - влажной и сухой. Влажная (экссудативная) форма ИП характеризуется поражением кровеносных сосудов брюшной или грудной полостей, сопровождающимся выпотеванием плазмы в указанные полости (рис. 1). У больных животных, развивается асцит (рис. 2), а в случае скопления жидкости - нарушение функции дыхания. На серозных покровах органов брюшной полости формируются фибринозные наложения (рис. 3), в дальнейшем могут образовываться спайки. Вследствие нарушения функции печени наблюдается эктеричность склер и кожных покровов.

Сухая (неэкссудативная) форма ИП протекает без скопления жидкости в брюшной и грудной полостях. В этом случае страдают внутренние органы - головной мозг (рис. 4), печень, почки, поджелудочная железа, в 25% случаев наблюдаются поражения глаз (рис. 5) (5).

Поскольку эффективная схема лечения ИП пока не разработана, первостепенное значение имеют профилактические меры, направленные на раннее выявление вирусоносительства (1, 3).

Диагностика инфекционного перитонита кошек также представляет серьезную проблему. Традиционные методы выявления возбудителя, основанные на обнаружении антител к коронавирусам (РНГАи ИФА), дают до 60% ложноположительных результатов. Это обусловлено присутствием в кишечнике кошек условно-патогенных штаммов возбудителя (2, 3). В ряде зарубежных лабораторий применяется комплексная методика диагностики ИП, включающая определение:
- титра антител к коронавирусу;
- соотношения альбуминов/глобулинов в транссудате или плазме крови;
- уровня а-1 кислого гликопро-теина (AGP);
- цитологических и гематологических показателей (4).

Материалы и методы
В исследовании был использован штамм коронавируса «Багира» (5 1оg ТЦД50/мл) в разведениях, 8 изолятов коронавирусов кошек (FCoV), 2 изолята коронавируса собак (CCV) и суспензии вируса панлейкопении кошек и калицивируса кошек.
При испытании ПЦР-тест-системы использовался биологический материал здоровых кошек, животных с клиническими признаками ИП и кошек с неспецифическими симптомами. Среди исследованных животных были как содержащиеся в питомниках, так и находящиеся на индивидуальном содержании.
Биологический материал параллельно исследовался методами ПЦР и РИГА. С помощью ПЦР-системы исследовались фекалии, плазма крови, транссудат при специфическом асците, а методом РИГА - сыворотка крови и транссудат.

Серологические тесты проводились с использованием набора для выявления антител к коронавирусам плотоядных в РИГА (ТУ 9388-025-00494189-01). Биологический материал собак исследовался методом ПЦР.

Однако данное исследование требует значительных затрат времени и средств. В связи с этим эффективным методом диагностики ИП может служить полимеразная цепная реакция (ПЦР), которая позволяет не только выявлять коронавирусы кошек, но и проводить дифференциацию условно-патогенных и патогенных штаммов исходя из различной локализации их в организме. При этом обнаружение вируса в фекалиях кошек свидетельствует о носительстве условно-патогенных штаммов (FECV), а в плазме крови или асцитной жидкости - о циркуляции в организме животного патогенных штаммов (FIPV) и, следовательно, о заболевании.

Цель настоящего исследования - испытание тест-системы для диагностики коронавирусной инфекции у кошек и собак на основе ПЦР.

Выделение РНК проводилось с использованием набора «РНК-сорб» (ЦНИИЭ), в основе которого лежит метод ее сорбции на силикагеле. ПЦР проводилась на амплификаторе ТЕРЦИК («ДНК-технология») по стандартной методике. Полученные ПЦР-продукты визуализировались методом электрофореза в 1,5% агарозном геле, содержащем бромистый этидий.

Результаты и обсуждение
В процессе исследования проведен анализ сведений о нуклеотидных последовательностях представителей семейства Coronaviridae, в частности различных изолятов коронавирусов кошек и собак, опубликованных в базах данных Entrez, GeneBank, EMBL и DDBJ. Кроме того, изучена литература, характеризующая структуру геномов FCoV, CCV и их генетическое родство с другими представителями семейства.

В качестве мишеней для специфических праймеров были выбраны две консервативные последовательности в гене нуклеокапсидного протеина. Специфичность предложенных праймеров изучалась с помощью компьютерных программ FASTA и BLASTA. В результате проведенной работы была выявлена гомология выбранных олигонуклеотидов только с генами нуклеокапсидного протеина FCoV и CCV и не обнаружено их значимой гомологии с нуклеотидными последовательностями иных видов семейства Coronaviridae, а также каких-либо других вирусов, бактерий или эукариот. Таким образом, предложенные праймеры, исходя из теоретических расчетов, должны обладать 100% специфичностью.

На следующем этапе исследования были оптимизированы условия выделения РНК вируса и проведения реакции обратной транскрипции и ПЦР, а также определены специфичность и чувствительность ПЦР-анализа. Размер ПЦР-продукта составил 350 пар нуклеотидов. Метод показал 100% специфичность и высокую чувствительность. Обнаружение коронавируса в фекалиях кошек свидетельствовало о носительстве его условно-патогенных штаммов в кишечнике, обнаружение FECV в транссудате и плазме крови - о развитии заболевания.

При исследовании методом РНГА положительным результатом считалось обнаружение у животного титра антител > 1:128. Однако это могло указывать как на вирусоносительство, так и на манифестированную форму инфекции. Кроме того, положительный титр мог быть обусловлен наличием контакта с коронавирусом ранее. В качестве материала от собак исследовались фекалии, и обнаружение в них РНК коронавируса свидетельствовало о заболевании, вызванном CCV.

В ходе эксперимента был исследован биологический материал, взятый у 193 кошек (таблица). Методом РНГА положительный результат был зафиксирован у 131 животного (титры антител > 1:128). При тестировании «сероположительных» кошек методом ПЦР РНК коронавируса была обнаружена в плазме и асцитной жидкости у 12 животных (9%), только в фекалиях - у 68 (52%) и у 51 (39%) - не обнаружена вовсе. Таким образом, 52% кошек с серопозитивным результатом являлись носителями условно-патогенных штаммов коронавируса, а 39% были здоровы. Очевидно, что исследование методом РНГА дало 63% ложноположительньгх результатов (в пересчете на общее количество исследованных животных).

Заключение
Полученные результаты свидетельствуют о том, что диагностика коронавирусной инфекции кошек традиционным серологическим методом (РНГА) дает более 60% ложноположительных результатов, поскольку не позволяет дифференцировать состояние носительства от истинного заболевания. Кроме того, "сероположительными» считались животные, имевшие контакт с коронавирусом ранее.

Использование метода ПЦР позволило провести дифференциацию условно-патогенных и патогенных штаммов в связи с их раз личной локализацией в организме и отличить состояние носительства от заболевания. Таким образом, данные проведенного исследования говорят о целесообразности использования метода ПЦР для выявления коронавирусов кошек и собак и постановки окончательного диагноза.

В соответствии с приказом № 45 Департамента ветеринарии МСХ РФ в период с 03.08.2004 г. по 06.08.2004 г. были проведены комиссионные испытания тест-системы для диагностики инфекционного перитонита кошек методом ПЦР. Тест-система успешно прошла комиссионную апробацию, показав 100% специфичность и высокую чувствительность в рамках предложенной панели. В настоящее время тест-система «Коронавир» для выявления и идентификации коронавирусов кошек и собак, основанная на ПЦР, успешно используется в ветеринарной практике (ТУ 9388-142-00494189-05; РУ № Р077-1-3.5-0813 зарегистрирована в РФ за № ПВР-1-3.5/01556 от 30.06.06 г. сроком на 5 лет).

ЛИТЕРАТУРА
1, Addie, D, D„ Jarrett, 0. Use of a reverse- transcriptase polymerase chain reaction for monitoring the shedding of feline coronavirus by healthy cats, Vet. Rec, 2001, May 26; 148 (21): 649-53,
2, Vennema, H, atal. Feline Infectious Peritonitis Viruses Arise by Mutation from Endemic Feline Enteric Coronaviruses, Virology, 1998:150-157.
3, Herrewegh, A.A., Mahler, M„ Hedrich, H.J., Haagmans, B.L Egberink, H.F., Horzinek, M.C., Rottier, P.J., de Groot, R,J, Persistence and evolution of feline coronavirus in a closed cat-breeding colony Virology 1997, Aug 4; 234 (2): 349-363,
4, Comparison of Different Tests to Diagnose Feline Infectious Peritonitis; Katrin Hartmann at al„ 2003.
5, Feline infectious peritonitis; Stacy E, Andrew, Veterinary clinics of North America: small animal; vol. 30, number 5, September 2000

Е.А. ЯРАЛОВА, И.Л. ОБУХОВ, ММ РАХМАНИНА, Э.И. ЭЛИЗБАРАШВИЛИ, В.И.УЛАСОВ,
Всероссийский государственный центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов, г. Москва