Skl - lümfotsüütide segakultuur. HLA matš. Immuniseerimine lümfotsüütidega (LIT). Immunoloogiline tegur raseduse katkemisel

SKL = segatud lümfotsüütide kultuur = MLC = segatud lümfotsüüdi kultuur. See test koosneb kultuuride komplektist, mis määravad kindlaks, mil määral abikaasad tunnevad ära üksteise kudede ühilduvuse antigeene. Lümfotsüüdid - keskrakk immuunsussüsteem.Mis on SKL?Ja. I. Guzov, Ph.D., Ch. Immunoloogia- ja Reproduktsioonikeskuse arst SKL = segatud lümfotsüütide kultuur = MLC = segatud lümfotsüütide kultuur See test koosneb kultuuride komplektist, mis määravad kindlaks, mil määral abikaasad tunnevad ära üksteise kudede ühilduvuse antigeene Lümfotsüüt on immuunsüsteemi keskne rakk süsteem. Lümfotsüütide süsteemi võib võrrelda olekuga, kus on ülemused ja alluvad ning iga töötaja täidab spetsialiseeritud funktsiooni.Kui lümfotsüüt puutub kokku kehale võõraste objektidega (bakterid, viirused, võõrrakud jne), siis immuunsüsteem vastus areneb. Kui a me räägime Võõrkudede või rakkude puhul sõltub immuunvastuse aste kudede ühilduvuse antigeenide (HLA, inimese leukotsüütide antigeenid või MHC, peamine histo-sobivuse kompleks (need on antigeenide sünonüümid)) konfiguratsiooni sarnasusest. Immuunvastus väljendub kloonide (ühe raku järeltulijate) rakkude ilmumises, mis on rangelt spetsialiseerunud spetsiifilistele võõrteguritele). Teisisõnu, kui immuunrakud hakkavad millelegi reageerima, hakkavad nad jagama. Ja rakkude jagunemist saab hinnata DNA sünteesi kiiruse järgi. Mida rohkem DNA-d sünteesitakse, seda rohkem rakud jagunevad, seda aktiivsemalt areneb immuunvastus. DNA sünteesi astet saab määrata radioaktiivse tümidiini nukleotiidi - DNA "telliskivi" - lisamisega rakukultuuri. See põhimõte põhineb lümfotsüütide segakultuuri hindamisel.Tehniliselt tehakse seda järgmiselt. Abikaasadelt võetakse verd, millest eraldatakse lümfotsüüdid. Need lümfotsüüdid asetatakse jagunemiseks soodsasse toitainekeskkonda. Kui segate lümfotsüüte erinevad inimesed nad hakkavad üksteisele reageerima. Kui aga registreerida lihtsalt erinevate inimeste segakultuuri tegevus, siis on võimatu aru saada, kuidas konkreetne inimene reageerib, sest lahingusse astuvad kõigi segakultuuris osalejate rakud.Et hinnata igaühe individuaalset reaktsiooni kultuuris osaleja, ühe abikaasa rakud kokkupuutel muudab rakkude jagunemise võimatuks. Kuid antigeensed omadused lümfotsüüdid säilivad. Sellises kultuuris seostatakse kogu rakutegevus ainult teise abikaasa elusrakkudega. Võrreldes elus- ja inaktiveeritud rakukultuuride erinevaid kombinatsioone, on võimalik saada oluline teave abikaasade immunoloogilise sarnasuse astme kohta. Tegelikult on selles väga töömahukas analüüsis 12 erinevad kultuurid, ja reaktsiooni hinnatakse kultiveerimise 3. ja 5. päeval Saadud 24 numbrit annavad olulist teavet selle kohta, kuidas naine reageerib raseduse ajal oma mehe kudede ühilduvuse antigeenidele Fakt on see, et raseduse säilitamine on aktiivne protsess. Nii nagu äratõukereaktsiooni puhul, on immunoloogilise tolerantsuse tekkeks esimeses etapis oluline tulnuka piisav immunoloogiline äratundmine. Kui see äratundmine on aeglane või ilmneb liiga hilja, ründavad loodet ema loomulikud tapjarakud ja ta sureb. hinnata ühe või teise parandusmeetodi rakendamise väljavaateid. Seega, kui numbrite „halb” konfiguratsioon Avastatakse SCL, on sageli vaja seda korrata pärast terapeutilisi sekkumisi viljatuse, raseduse katkemise ja ebaõnnestunud IVF katsetega.

Saate teine ​​osa 2. juulil.
HLA-geenid ja paljunemise immunoloogia. Naha klapp. Immuniseerimine lümfotsüütidega (LIT). SKL - lümfotsüütide segakultuur. Immunoloogiline tegur raseduse katkemisel.

HLA geenid ja reproduktiivne immunoloogia
Mis on siis kõige mitmekesisem süsteem kehas ja mis pakub kaitset infektsioonide eest? See on immuunsusgeenide süsteem – HLA geenid. Kõik need geenid asuvad 6. kromosoomis ja määravad immuunvastuse individuaalsuse, tundlikkuse teatud stiimulitele.
Siin see taandubki reproduktiiv-immunoloogia selle kohta, mida meie keskus teeb. Kui vaadata meie saiti, siis on näha, et seal on nö alloimmuunne viljatuse ja raseduse katkemise tegur. Seda seostatakse koega kokkusobivuse antigeeniga, millel on kudede ühilduvuse antigeenide sarnasus või erinevus. Riskid reproduktiivprotsessis professor-immunoloog Valentin Ivanovitš Gavallo poolt, kes on meie riigi reproduktiivimmunoloogia rajaja.
Reproduktsiooni immunoloogia ei arenenud kohe eraldi valdkonnana. Immunolooge on alati huvitanud paljud muud asjad ja kõige vähem huvitas paljunemise immunoloogia. Kuid sellegipoolest on selle meditsiinivaldkonna arenguprotsessis reproduktsiooni immunoloogia kujunenud omaette suunaks. Mingil hetkel leiti, et on teatud ained, mida nimetatakse kudede ühilduvuse antigeenid või peamine histo-sobivuse kompleks, või inimese leukotsüütide antigeeni süsteem. Kui need komponendid inimestel ühtivad, saab elundeid siirdada ja need juurduvad uude kehasse.

naha klapp
Selgub, et kui raseduse ajal esineb loote ja ema vaheline erinevus kudede ühilduvuse antigeenide osas, siis tekib ema organismis vastus nendele antigeenidele. Siis võib ema verest (ja üldse sünnitavate naiste verest) leida suur summa koega kokkusobivuse antigeenide vastased antikehad, mille loode päris isalt. Ja olles emakas, tekitas loode ema keha immuunvastuse.
Teadlased on väitnud, et nende antikehade mõju lootele on väga kahjulik, kuna mõnel juhul kahjustasid ja tapsid nad teda. Selliseid juhtumeid nimetatakse "korduvaks raseduse katkemiseks".
Nende juhtumite ja nendega seotud tüsistuste raviks leidsid nad järgmise meetodi: abikaasalt võeti nahaklapp ja pandi naisele nii, et see klapp immunosorbent eelmiste raseduste ajal tekkinud kahjulikud antikehad. Siis oli lootel võimalus rahulikult areneda. Seda raseduse katkemise ravi alustati Ameerikas, Tšehhoslovakkias ja edasi Euroopas ning see tõesti toimis.
Mingil hetkel otsustasid nad Venemaal Moskvas sellise raviga tegeleda. Sünnitusabi ja günekoloogia instituudi juurde loodi kliinilise immunoloogia labor, mida juhtis Lidiya Sergeevna Volkova. Ta pöördus koostööettepanekuga toona noore Valentin Ivanovitš Govallo poole, kes oli Tšehhoslovakkias prostazhirovanie koos tuntud immunoloogi-transplantoloogi Hašekiga; ja külastas Dasse'i laborit Pariisis. Gavallo alustas kudede tüpiseerimise süsteemide väljatöötamist juba Traumatoloogia ja Ortopeedia Instituudis ning viis läbi katseid nahaklappide siirdamiseks hiirtel.
Üks esimesi patsiente oli naine, kellel oli varem olnud 15 raseduse katkemist. Rasedus ise oli tal kerge, aga siis ei pidanud ta seda välja. Ja ta läbis ülalkirjeldatud ravi abikaasa nahaklapi pookimisega, mis oli samuti edukas. Ja pärast seda rasedust oli patsiendil kaks edukat rasedust. Ja sel ajal sel juhul lihtsalt šokeeris selle ravi läbi viinud arste. Sellest ajast alates on seda tehnikat laialdaselt kasutatud Venemaal ja naaberriikides.

Immuniseerimine lümfotsüütidega
Ja paljunemise immunoloogia arenes edasi. Peagi selgus, et mainitud nahaklapid pole sorbendid, vaid immunostimulaatorid, põhjustades tagasilükkamise reaktsiooni. Ja see tehnika on täpselt sama immuniseerimine, mille käigus moodustuvad antikehad. Ja need antikehad ei ole kahjustavad, vaid kaitsevad. Need aitavad emakaõõnes rasedust õigeaegselt ära tunda ja sisaldavad sellele rasedusele adekvaatset reaktsiooni, mille eesmärk on loote säilitamine ja ellujäämine. Järgnes selle tehnika edasine täiustamine. Kusagil 1970. ja 1980. aastate vahetusel, Novosibirskis toimunud konverentsil, esitas V. I. Govallo endale küsimuse nahaklapi siirdamise vajalikkusest. Palju lihtsam, ütles ta, võtta mehe verest lümfotsüüdid(rakud, millel on kõrge teise klassi kudede ühilduvuse antigeenide kontsentratsioon) ja süstige need lihtsalt naisele. Ja lõpptulemus saab olema sama. Pärast konverentsi võttis temaga ühendust raseduse katkemise osakonna juhataja professor Sidelnikova ja pakkus, et hakatakse patsiente immuniseerima tema pakutud meetodil.
Ja nad hakkasid selliseid protseduure läbi viima ja nende patsiendid hakkasid edukalt rasedust kandma. Ja siis juhtus, et Valentin Ivanovitš tülitses professor Sidelnikovaga, nad hakkasid eraldi töötama ja tekkis kaks lümfotsütoimmuniseerimise meetodit.
Sünnitus- ja günekoloogiakeskuses viidi protseduur läbi ravimi korduva süstimise teel väikestes kogustes.
Ja Govallo meetodi järgi süstiti lümfisuspensiooni üks kord 200-250 miljoni raku ulatuses ja meie keskus valis selle meetodi, kuigi mõlemad meetodid töötavad hästi.

SKL - lümfotsüütide segakultuur
Valentin Ivanovitš oli kliiniku loomise ja avamise ajal meie peamine konsultant, ta aitas meie juures oma metoodikat käivitada. Nüüd tipime patsientidele 2. klassi koega ühilduvuse geenid. Kui selline sarnasus avastatakse, siis immuniseerime abikaasa lümfotsüütidega, ainult lisasime siia ka lümfotsüütide segakultuur (MLC).
Ma selgitan, miks. Kui ma veel osakonnas töötasin ja aspirantuuris õppisin, kuskil 80ndate lõpus, oli meie kliiniline baas Kremlile lähim 7. sünnitusmaja Vozdvizhenkal. Pärast tunde läksin Lenini raamatukogusse ja vaatasin läbi kõik uudised alates väljaannetest erinevad riigid rahu.
Üks neist oli huvitav mitmeköiteline "Sünnitusabi ja günekoloogia juhend" Saksamaalt, kus eraldi köide oli pühendatud raseduse katkemisele. Ja selles köites oli terve peatükk raseduse katkemise immunoloogiast, milles soovitati kasutada segatud lümfotsüütide kultuure, et tuvastada paarid, kes tõesti vajasid immuniseerimist, ja katkestada need, kes seda ei teinud. Nii et ma teadsin sellest lisatehnika ja hakkasid seda meie kliinikutes kasutama, kuigi paljud seda mõne keerukuse tõttu ei kasuta. Meie keskuses on see alloimmuunse viljatuse jaoks eraldi programm.

Immunoloogiline tegur raseduse katkemisel: HLA vastete roll
Kuid märgin, et te ei tohiks raseduse katkemise immunoloogilise teguri probleemiga liialdada. Jah, see on märkimisväärne, kuid see pole ainus raseduse katkemise probleem.
Tuleme veidi tagasi geneetika päritolu juurde. Mingil hetkel seksuaalse paljunemise teooriate väljatöötamisel tekkis idee koe antigeenide ühilduvusest. sest seksuaalne paljunemine annab mitmekesisuse eelkõige kudede ühilduvusantigeenide osas, immuunsüsteemi valkude antigeenide osas. Ja siis otsustasime leida elanikkonna, kuhu on oodatud suurpered, kus ei kasutata rasestumisvastaseid vahendeid ja kus tervislik eluviis elu. Raseduse algust ja kulgu mõjutavate tegurite tuvastamise hõlbustamiseks. Ja nad leidsid sobiva elanikkonna Hatterite kristliku kogukonna (Hutter Brotherhood) näol.
Sellises populatsioonis on abikaasade teise klassi kudede ühilduvuse antigeenide osas täielik sarnasus. Ja nende abielupaaride seas leiti, et seksuaalse tegevuse alguse ja esimese lapse sünni vahel on pikem periood; suurenenud raseduse katkemise juhtude arv; ja sünnitustevahelised intervallid suurenesid. Viljatuse juhtumeid pole. Ja peaaegu kõigis neis abielupaarid rohkem kui 10 last.
Sellest uuringust võime järeldada, et kudede ühilduvusteguri mõju on endiselt piiratud. Seega, kui meil on paar, kellel on kudede ühilduvuse geenide sarnasus (ja selliseid paare on ainult umbes 15%) kombinatsioonis raseduse katkemisega, peame läbi viima põhjalikumad uuringud kõigis raseduse katkemisega seotud valdkondades. Siis saab täpselt kindlaks teha vajaduse lümfotsütoimmuniseerimise protseduuri järele.

Lümfotsüütide kooskasvatamine erineva haplotüübiga MHC-II molekulidega põhjustab nende blasttransformatsiooni ja proliferatsiooni. Reageerivad rakud kuuluvad T-lümfotsüütide hulka ja neid stimuleerivad võõrad MHC-II determinandid, mis asuvad B-lümfotsüütidel, makrofaagidel. Reaktsiooni tugevus sõltub histo-sobivuse antigeenide erinevuse astmest. Indiviidi reaktsioonivõime hindamiseks MHC alleelse variandi suhtes valmistatakse ühesuunaline lümfotsüütide kultuur. Selleks töödeldakse stimulaatorrakke eelnevalt mitomütsiiniga või kiiritatakse, samal ajal kui stimuleerivad rakud kaotavad oma jagunemisvõime, kuid jäävad elujõuliseks.

Reaktiivsus lümfotsüütide segakultuuris on üks hindamise kriteeriume rakuline immuunsus. SCL võimaldab HLA tüpiseerimist, doonori-retsipiendi paari valimist kudede ja elundite siirdamiseks ning korrelatsiooni HLA antigeenide ja teatud haiguste vahel.

Reaktsiooni seadistamiseks kasutatakse patsientide (doonori ja retsipiendi) verest eraldatud lümfotsüütide suspensiooni. Pestud reageerivad rakud suspendeeritakse väikeses koguses söötmes 199 (0,5 ml) ja pärast rakkude arvu loendamist reguleeritakse 0,6 x 106 rakku/ml. Stimuleeriv rakususpensioon valmistatakse sarnaselt mitomütsiin C lahuse (500 μg mitomütsiin C 1 ml puhverdatud soolalahuses) lisamisega kiirusega 0,1 ml 1 ml suspensiooni kohta. Rakkude segu inkubeeritakse 40 minutit 37 °C juures veevannis segades, seejärel lisatakse suspensioonile külm sööde 199 ja rakke pestakse kolm korda tsentrifuugimisega. Pellet suspendeeritakse toitainekultuurisöötmes, viies rakkude arvu 0,6*106 rakku/ml.

0,1 ml rakususpensiooni Hanki lahuses lisatakse steriilse ümarapõhjalise immunoloogilise plaadi süvenditesse ja 0,1 ml rakususpensiooni, mis kannab MHC alleelseid variante. Kontrollile lisati sama kogus Hanki lahust.

Tulemuste arvestamine toimub pärast rakkude inkubeerimist temperatuuril 37 °C 3–5 päeva, sõltuvalt reaktsiooni koostisest, kasutades morfoloogilist või isotoopmeetodit (vt RBTL).

Ümberistutamisel luuüdi histo-ühilduva doonori valik põhineb doonori ja retsipiendi HLA tüpiseerimise tulemustel, samuti valitud HLA-ga identsete doonor-retsipiendi paaride ühilduvuse määramisel SCL-is, mis on sobivuse hindamise viimane etapp. Selleks kasutatakse kahesuunalist SCL-i reaktsiooni, kasutades mikrokultuurimeetodit 96-süvendilisel plaadil, hinnates proliferatsiooni ulatust radioaktiivse H3-tümidiini inkorporeerimisega prolifereeruvate lümfotsüütide DNA-sse.

Vanusepiirangud iga testi jaoks (kas on olemas kontrollväärtused lastele või teatud vanusest ületavatele isikutele - näiteks: testi 191 jaoks puuduvad kontrollväärtused üle 80-aastastele inimestele).

Vastuse väljastamisel antakse viiteväärtused vormile, mis vastab patsiendi määratud soole ja vanusele.

INVITRO-s on mõnede testide jaoks vanusepiirangud(kuna teatud vanuse jaoks võrdlusväärtusi pole), peaks meditsiiniamet selle eest hoiatama. Piirangud puudutavad sagedamini lapsi noorem vanus. Usaldusväärsed uuringud selles vanuses laste võrdlusväärtuste väljatöötamiseks ei pruugi olla kättesaadavad ja paljud selles vanuses olevad väärtused erinevad täiskasvanutel oodatavatest väärtustest (lapsed ei ole väikesed täiskasvanud).

Mis puutub üle 80-aastastesse isikutesse, siis kui selle rühma jaoks ei ole kehtestatud kontrollväärtusi, võivad nad teatud ettevaatusega kasutada lähima jaoks saadud kontrollväärtusi. vanuserühm teised täiskasvanud.

Kas vastus aitas teid?

Mitte päris

Miks tehti mõned hemolüüsi testid? Miks ei tehta proovi hemolüüsi kohta kõiki analüüse?

Hemolüüs mõjutab erinevaid analüüse erinevalt, seega ei väljastata analüüsitulemusi, mida hemolüüs võib moonutada. Vastupidi, kui selle mõju testile on ebaoluline või puudub, antakse tulemused patsiendile.

Hemolüüs on vererakkude hävitamine koos nende sisu vabanemisega rakuvälisesse vedelikku (nt seerum, plasma). Selle põhjuseks võivad olla nii patsiendi kehas toimuvad protsessid kui ka verega torude võtmise, transportimise ja töötlemise tehnoloogia rikkumine.

Hävitatud rakkudest vabanevad ained võivad mõne testi tulemusi oluliselt muuta nii otsese mõju tõttu analüüsietappidele kui ka analüüdi kvantitatiivse sisalduse suurenemise tõttu. Hemolüüsi mõju analüüsitulemustele on erinev sõltuvalt testist, seadmest, teostamismeetodist ja hemolüüsi enda intensiivsusest.

Kas vastus aitas teid?

Mitte päris

Miks ei ole erinevate laborite tulemused ühesugused?

Erinevates laborites tehtud samade testide tulemused on enamasti erinevad. Selle põhjuseks on patsiendi individuaalsed omadused, erinevad tingimused biomaterjali võtmine, testi sooritamise meetodid ja tulemuse väljastamine.
Esimene tegur, mis tulemusi mõjutab, on mõõtmisviga. See on uurimistulemuse paratamatu loomulik kõrvalekalle ideaalnäitajatest kõigil etappidel.

Bioloogiline – need on uuritava aine koguse loomulikud kõikumised, olenevalt individuaalsed omadused patsiendi keha, keskkonnategurid, ravitegurid ja biomaterjali võtmise tingimused. Arvestades ajavahet kahe biomaterjali võtmise protseduuri vahel ja ka sel ajal toimunut, võivad analüüsiks valmistumise tingimused muutuda, füüsiline seisund Patsiendi puhul on mõne ainete sisaldus igapäevaste rütmide all, eriti aine muutumisel, kui raviprotsess oli sel ajal käimas.

Analüütiline - mõõdetud näitajate kõikumised vastavalt füüsika ja keemia seadustele, mis on allutatud seadmetele ja reaktiividele. Arvestades laboriprotsessi iseärasusi, ei saa me isegi sama proovi kahte proovi korraga uurides absoluutselt samad väärtused mõõdud.

Teine tegur, laboriuuringud on keerukas mitmeetapiline protsess, mille iga etapp koosneb viiest elemendist, mis aja jooksul ja laborist laborisse muutuvad:

  1. Biomaterjal, selle omadused, tarne-, ladustamis- ja töötlemistingimused.
  2. Personal, nende kvalifikatsioon ja tegevus.
  3. Seadmed, analüsaatorid, reaktiivid.
  4. Töö korraldamise meetodid.
  5. Kvaliteedikontrolli süsteem.
Kõikide nende komponentide kombinatsioon on erinevates laborites erinev ja ei saa anda absoluutselt “sama” tulemust.

Kas vastus aitas teid?

Mitte päris

Kui usaldusväärsed on uurimistulemused?

Invitro poolt läbi viidud analüüside tulemused vastavad rahvusvahelistele kvaliteedistandarditele ja on tunnistatud usaldusväärseteks.

Analüüside tulemuste usaldusväärsus on termin, mis iseloomustab seda, kui lähedal on saadud tulemus aine tegelikule sisaldusele uuritavas biomaterjalis. Analüüside tulemuste usaldusväärsus on osa kvaliteedi mõistest ja koosneb paljudest komponentidest.
Suurima panuse tulemuse usaldusväärsusesse annab uuringuks valmistumine, samuti vereproovi õige manipuleerimine, selles etapis võib esineda kuni 62% kõigist vigadest. Tulemuse kinnitamine, kohaletoimetamine ja tõlgendamine raviarsti poolt võib olla 23% vigade allikaks.

Kaasaegne labor võib põhjustada mitte rohkem kui 15% võimalike vigade koguarvust ja see arv sõltub labori, selle varustuse ja kehtestatud kvaliteedikriteeriumide sidususest.

Invitro on Venemaa suurim erameditsiiniettevõte ja kvaliteedi pärast on selles äärmiselt oluline koht. Invitros on kontrolli all kõik analüüsi etapid - biomaterjali võtmisest kuni tulemuse väljastamiseni: arstikabinettide töö, kullerteenus, labor - kõigele kehtivad ühtsed reeglid nn. standardsed tööprotseduurid, kus iga etappi on võimalike vigade kõrvaldamiseks väga üksikasjalikult kirjeldatud.

Lisaks mitmetasandilisele sisemisele kvaliteedikontrollile aktsepteerib Invitro labor Aktiivne osalemine mitmes süsteemis välishindamine kvaliteeti, võrreldes nende toimivust teiste laborite tulemustega. 2016. aastal kinnitas Invitro laboriteenuste kvaliteeti rahvusvahelisel tasemel - Westgard QC programmis Six Sigma. Programmi järelduse kohaselt ei ole labori töös võimalike vigade arv rohkem kui 3,4 1 000 000 juhtumi kohta.

Kogu selle vaevarikka töö olulisuse tunnustamine meie riigis oli Vene Föderatsiooni valitsuse kvaliteediauhinna üleandmine 2017. aasta novembris.


SKL - lümfotsüütide segakultuur
MLC - segatud lümfotsüütide kultuur

See test koosneb kultuuride komplektist, mis määravad kindlaks, mil määral abikaasad tunnevad ära üksteise kudede ühilduvuse antigeene.

Lümfotsüüdid on immuunsüsteemi keskne rakk. Lümfotsüütide süsteemi võib võrrelda olekuga, kus on ülemused ja alluvad ning iga töötaja täidab spetsiifilist funktsiooni.

Kui lümfotsüüt puutub kokku kehale võõraste objektidega (bakterid, viirused, võõrrakud jne), tekib immuunvastus. Kui me räägime võõrastest kudedest või rakkudest, siis immuunvastuse aste sõltub kudede ühilduvusantigeenide (HLA, inimese leukotsüütide antigeenid või MHC, peamine histo-sobivuskompleks, (need on sünonüümid) antigeenide konfiguratsiooni sarnasusest. ).

Immuunvastus väljendub spetsiifilistele välisteguritele rangelt spetsialiseerunud rakkude kloonide (ühe raku järeltulijate) ilmumises). Teisisõnu, kui immuunrakud hakkavad millelegi reageerima, hakkavad nad jagunema. Ja rakkude jagunemist saab hinnata DNA sünteesi kiiruse järgi. Mida rohkem DNA-d sünteesitakse, seda rohkem rakud jagunevad, seda aktiivsemalt areneb immuunvastus. DNA sünteesi astet saab määrata radioaktiivse nukleotiidi tümidiini - DNA "telliskivi" - lisamisega rakukultuuri. See põhimõte põhineb lümfotsüütide segakultuuri hindamisel.

Tehniliselt tehakse seda järgmiselt. Abikaasadelt võetakse verd, millest eraldatakse lümfotsüüdid. Need lümfotsüüdid asetatakse jagunemiseks soodsasse toitainekeskkonda. Kui segate erinevate inimeste lümfotsüüte, hakkavad nad üksteisele reageerima. Kui aga registreerida lihtsalt erinevate inimeste segakultuuri tegevus, siis on võimatu aru saada, kuidas konkreetne inimene reageerib, sest lahingusse astuvad kõigi segakultuuris osalejate rakud.

Iga kultuuris osaleja individuaalse reaktsiooni hindamiseks puutuvad ühe abikaasa rakud kokku mõjuga, mis muudab rakkude jagunemise võimatuks. Lümfotsüütide antigeensed omadused aga säilivad. Sellises kultuuris seostatakse kogu rakutegevus ainult teise abikaasa elusrakkudega. Elus- ja inaktiveeritud rakkude kultuuride erinevate kombinatsioonide võrdlemine võib anda olulist teavet abikaasade immunoloogilise sarnasuse astme kohta.

Tegelikult asetatakse selles väga aeganõudvas testis 12 erinevat kultuuri ning vastust hinnatakse kultiveerimise 3. ja 5. päeval.

Saadud 24 numbrit annavad olulist teavet selle kohta, kuidas naine reageerib raseduse ajal oma mehe kudede ühilduvuse antigeenidele.

Fakt on see, et raseduse säilitamine on aktiivne protsess. Nii nagu äratõukereaktsiooni puhul, on immunoloogilise tolerantsuse tekkeks esimeses etapis oluline tulnuka piisav immunoloogiline äratundmine. Kui see äratundmine on aeglane või kui see toimub liiga hilja, ründavad loodet ema loomulikud tapjarakud ja see sureb.

SCL võimaldab mitte ainult hinnata abikaasade lümfotsüütide immunoloogilise äratundmise seisundit üksteise poolt, vaid ka kontrollida raviprotsessi lümfotsüütidega immuniseerimise abil, valida immuniseerimismeetodi ja -annuse ning hinnata ühe või teise meetodi rakendamise väljavaateid. parandus.

Seetõttu, kui SCL-is tuvastatakse numbrite "halb" konfiguratsioon, on pärast ravitoimeid sageli vaja seda korrata.

küsimus:
Ütle mulle, palun, kas SCL-i jaoks on võimalik verd loovutada pärast (4-5 päeva pärast) kui patsient on kursuse läbinud intravenoosne infusioon immunoglobuliinid (HSV-2 pärssimiseks; 3 tilgutit 25 ml ülepäeviti)? Kas immunoglobuliinid mõjutavad SCL-analüüsi usaldusväärsust?

Vastas Kuhoreva Tatjana Aleksandrovna

Immunoglobuliinravi kuuri läbiviimine võib mõjutada SCL tulemusi. Kuna immunoglobuliin mõjutab lümfotsüütide aktiivsust ja SCL reaktsioonis just seda aktiivsust uuritakse (spontaanses olekus, pärast segamist abikaasa lümfotsüütide kultuuriga, doonorrakkude kogum).
Uuring on soovitatav läbi viia enne immunoglobuliini kasutamist või mõni nädal (4-5) pärast ravi.
Katsetulemusi võib samuti mõjutada külmetushaigused, vaktsineerimised, menstruatsioon.

küsimus:
Analüüsi tulemuste kohaselt väheneb SCL-i reaktsiooni intensiivsus. IVF programmis kell 14 DPP oli hCG 11. Mida ma peaksin tegema?

Vastas Airapetov David Jurjevitš
Sünnitusabi ja günekoloogia kliinik "Immunoloogia ja reproduktiivkeskus":
Fakt on see, et laps on ema kehale pooleldi võõras. See on normaalne füsioloogiline nähtus, mis käivitab immunoloogilised reaktsioonid, mille eesmärk on raseduse säilitamine. Tuleks moodustada immuunsed spetsiaalsed kaitsevalgud, mis kaitsevad viljastatud munarakk. Abikaasade kokkusobimatus HLA antigeenide suhtes ning erinevus embrüo ja ema organismi vahel on oluline punkt vajalik raseduse säilitamiseks ja kandmiseks. Abikaasade sarnasus kudede ühilduvuse antigeenide osas toob kaasa embrüo sarnasuse ema kehaga, mis põhjustab naise immuunsüsteemi ebapiisavat antigeenset stimulatsiooni ning raseduse säilitamiseks vajalikud reaktsioonid ei vallandu. Rasedust nähakse kui võõrrakud. Sel juhul see juhtub spontaanne katkestus Rasedus. Selliste raseduse katkemise tegurite diagnoosimiseks viiakse läbi II klassi HLA geenide uurimine (HLA-DRB1, DQA1 ja DQB1 tüpiseerimine), samuti lümfotsüütide segakultuur. Abikaasade lümfotsüütide nõrk erinevus MCL-is (lümfotsüütide segakultuur) ja HLA kokkulangevus on lümfotsütoteraapia näidustus. Seda kõike tehakse selleks, et suurendada abikaasa antigeenide äratundmise efektiivsust platsenta moodustumise protsessis, mis võimaldab õigeaegselt käivitada raseduse säilitamise mehhanismid.