Skl - תרבית מעורבת של לימפוציטים. משחק HLA. חיסון עם לימפוציטים (LIT). גורם אימונולוגי בהפלה

SKL = תרבות לימפוציטים מעורבת = MLC = תרבית לימפוציטים מעורבת. בדיקה זו מורכבת מסט של תרביות הקובעות את המידה שבה בני זוג מזהים זה את אנטיגנים של תאימות רקמות של זה. לימפוציטים - כלוב מרכזי מערכת החיסון.מה זה SKL? I. Guzov, Ph.D., Ch. דוקטור של המרכז לאימונולוגיה ורבייה SKL = תרבית לימפוציטים מעורבת = MLC = תרבית לימפוציטים מעורבת. בדיקה זו מורכבת מסט של תרביות הקובעות את מידת הזיהוי של בני זוג באנטיגנים של תאימות רקמות של זה. לימפוציטים הם התא המרכזי של מערכת החיסון מערכת. ניתן להשוות את מערכת הלימפוציטים למצב שבו יש בוסים וכפופים, וכל עובד מבצע תפקיד מיוחד.אם לימפוציט נתקל באובייקטים זרים לגוף (חיידקים, וירוסים, תאים זרים וכו'), אז חיסון מתפתחת תגובה. אם אנחנו מדבריםלגבי רקמות או תאים זרים, מידת התגובה החיסונית תהיה תלויה בדמיון של התצורה של אנטיגנים של תאימות רקמות (HLA, אנטיגנים לויקוציטים אנושיים, או MHC, קומפלקס היסטו-תאימות עיקרי, (אלה מילים נרדפות) של אנטיגנים). התגובה החיסונית מתבטא בהופעת שיבוטים (צאצאים של תא אחד) תאים המתמחים אך ורק לגורמים זרים ספציפיים). במילים אחרות, אם תאי חיסוןמתחילים להגיב למשהו, הם מתחילים לשתף. וניתן להעריך את חלוקת התאים לפי קצב סינתזת ה-DNA. ככל שמסונתז יותר DNA, יותר תאים מתחלקים, כך התגובה החיסונית מתפתחת בצורה פעילה יותר. ניתן לקבוע את מידת סינתזת ה-DNA על ידי הכללה בתרבית התא של נוקלאוטיד ה-thymidine הרדיואקטיבי - ה"לבנה" של ה-DNA. עיקרון זה מבוסס על הערכה של תרבית מעורבת של לימפוציטים, מבחינה טכנית הדבר נעשה באופן הבא. דם נלקח מבני הזוג, ממנו מבודדים לימפוציטים. לימפוציטים אלה ממוקמים במדיום תזונתי נוח לחלוקה. אם אתה מערבב לימפוציטים אנשים שוניםהם יתחילו להגיב אחד לשני. עם זאת, אם פשוט רושמים פעילות של תרבות מעורבת של אנשים שונים, אי אפשר להבין איך אדם מסוים מגיב, כי התאים של כל המשתתפים בתרבות המעורבת נכנסים לקרב. על מנת להעריך את התגובה האישית של כל אחד משתתף בתרבית, התאים של אחד מבני הזוג נחשפים הופכת את חלוקת התאים לבלתי אפשרית. למרות זאת תכונות אנטיגניותלימפוציטים נשמרים. בתרבית כזו, כל פעילות התא תהיה קשורה רק לתאים חיים של בן הזוג השני. על ידי השוואת שילובים שונים של תרביות תאים חיים ומומתים, ניתן להשיג מידע חשובעל מידת הדמיון האימונולוגי של בני הזוג.למעשה, בניתוח זה, המפרך מאוד, 12 תרבויות שונות, והתגובה מוערכת ביום ה-3 וה-5 של התרבית. 24 המספרים שהתקבלו מספקים מידע חשוב על האופן שבו אישה תגיב לאנטיגנים של תאימות רקמות של בעלה במהלך ההריון. העובדה היא ששמירה על הריון היא תהליך פעיל. בדיוק כמו במקרה של תגובת דחייה, הכרה אימונולוגית נאותה של הזר חשובה לפיתוח סובלנות אימונולוגית בשלב הראשון. אם זיהוי זה איטי, או אם הוא מתרחש מאוחר מדי, העובר מותקף על ידי תאי ההורג הטבעיים של האם ומת. העריכו את הסיכויים ליישום שיטה כזו או אחרת של תיקון. לכן, כאשר תצורה "רעה" של מספרים ב- SCL מזוהה, לעתים קרובות יש צורך לחזור עליו לאחר התערבויות טיפוליות.עם אי פוריות, הפלה, וניסיונות IVF כושלים.

החלק השני של השידור ב-2 ביולי.
גנים HLA ואימונולוגיה של רבייה. דש עור. חיסון עם לימפוציטים (LIT). SKL - תרבות מעורבת של לימפוציטים. גורם אימונולוגי בהפלה.

גנים של HLA ואימונולוגיה של הרבייה
אז מהי המערכת הכי מגוונת בתוך הגוף ומה מספק הגנה מפני זיהומים? זוהי מערכת של גנים חסינות - גנים HLA. כל הגנים הללו ממוקמים בכרומוזום השישי וקובעים את האינדיבידואליות של התגובה החיסונית, רגישות לגירויים מסוימים.
כאן זה מסתכם אימונולוגיה של רבייהעל מה שהמרכז שלנו עושה. אם אתה מסתכל באתר שלנו, אתה יכול לראות שיש מה שנקרא אלואימוניותגורם של אי פוריות והפלה. זה קשור לאנטיגן של תאימות רקמות, עם דמיון או אי-דמיון באנטיגנים של תאימות רקמות. סיכונים בתהליך הרבייה מאת פרופסור-אימונולוג ולנטין איבנוביץ' גבאללו, שהוא מייסד האימונולוגיה הרבייה בארצנו.
אימונולוגיה של רבייה לא התפתחה מיד כאזור נפרד. אימונולוגים תמיד התעניינו בדברים רבים אחרים, והאימונולוגיה של הרבייה הייתה הפחות מעניינת. אבל עדיין, בתהליך הפיתוח בתחום זה של הרפואה, האימונולוגיה של רבייה נוצרה לכיוון נפרד. בשלב מסוים, נמצא כי ישנם חומרים מסוימים שנקראים אנטיגנים של תאימות רקמותאוֹ תסביך היסטורי תאימות גדול, או מערכת אנטיגן לויקוציטים אנושית. אם רכיבים אלו תואמים באנשים, ניתן להשתיל איברים והם ישתרשו בגוף חדש.

דש עור
מסתבר שאם במהלך ההיריון יש חוסר דמיון בין העובר לאם מבחינת אנטיגנים של תאימות רקמות, אזי מתרחשת תגובה לאנטיגנים אלו בגוף האם. ואז בדם של האם (ובכלל, בדם של יולדות) אפשר למצוא כמות גדולהנוגדנים נגד אנטיגנים של תאימות רקמות שהעובר ירש מהאב. ובהיותו ברחם, העובר גרם לתגובה חיסונית של גוף האם.
חוקרים הציעו כי השפעת הנוגדנים הללו על העובר מזיקה מאוד, שכן במקרים מסוימים הם פגעו בו והרגו אותו. מקרים כאלה נקראים "הפלה חוזרת".
כדי לטפל במקרים אלו ובסיבוכים הקשורים אליהם, הם מצאו את השיטה הבאה: נלקח מהבעל דש עור והונח על האישה כך שהדש הזה היה חומר חיסוןנוגדנים מזיקים שנוצרו במהלך הריונות קודמים. אז הייתה לעובר הזדמנות להתפתח בשלווה. הטיפול הזה בהפלה התחיל באמריקה, בצ'כוסלובקיה, ועוד באירופה, וזה באמת עבד.
בשלב מסוים, ברוסיה, במוסקבה, החליטו לעסוק בטיפול כזה. מעבדה לאימונולוגיה קלינית נוצרה במכון למיילדות וגינקולוגיה, בראשות לידיה סרגייבנה וולקובה. היא פנתה ללנטין איבנוביץ' גובאלו הצעיר דאז בהצעה לשיתוף פעולה, שהיה פרוסטז'ירובני בצ'כוסלובקיה עם האסק, אימונולוג-מושתל ידוע; וביקר במעבדה של דאסה בפריז. Gavallo החל לפתח מערכות הקלדת רקמות עוד במכון לטראומה ואורתופדיה, וערך ניסויים על השתלת דשי עור בעכברים.
אחת המטופלות הראשונות הייתה אישה שעברה בעבר 15 הפלות. ההיריון עצמו היה קל עבורה, אבל אז היא לא יכלה לשאת את זה. והיא עברה את הטיפול המתואר לעיל בהשתלת דש העור של בעלה, שגם הוא הצליח. ואחרי ההריון הזה, למטופלת היו שני הריונות מוצלחים לאחר מכן. ובאותו זמן מקרה זהפשוט זעזע את הרופאים שביצעו את הטיפול הזה. מאז, טכניקה זו נמצאת בשימוש נרחב ברוסיה ובמדינות שכנות.

חיסון עם לימפוציטים
והאימונולוגיה של הרבייה המשיכה להתפתח. עד מהרה התברר כי דשי העור המוזכרים לא היו סופחים, אלא חומרים מעוררי חיסון,גורם לתגובה של דחייה. והטכניקה הזו היא בדיוק אותו חיסון שבמהלכו נוצרים נוגדנים. והנוגדנים האלה לא מזיקים, אלא מגנים. הם עוזרים לזהות הריון בתוך חלל הרחם בזמן וכוללים תגובה נאותה להריון זה, שמטרתה לשמר ולשרוד את העובר. בעקבות שיפור נוסף של טכניקה זו. אי שם בתחילת שנות ה-70 וה-80, בכנס בנובוסיבירסק, שאל את עצמו וי.איי גובאלו את השאלה של הצורך בהשתלת דש עור. הרבה יותר קל, אמר, לקחת מדמו של הבעל לימפוציטים(תאים שיש להם ריכוז גבוה של אנטיגנים של תאימות רקמות מהמחלקה השנייה) ופשוט להזריק אותם לאישה. והתוצאה הסופית תהיה זהה. לאחר הכנס פנתה אליו פרופסור סידלניקובה, ראש מחלקת הפלות, והציעה להתחיל לחסן חולים בשיטה שהציע.
והם החלו לבצע הליכים כאלה, והמטופלים שלהם החלו לשאת הריון בהצלחה. ואז קרה שלנטין איבנוביץ' הסתכסך עם פרופסור סידלניקובה, הם החלו לעבוד בנפרד והתעוררו שתי שיטות של לימפוציטואיממוניזציה.
במרכז למיילדות וגינקולוגיה בוצע ההליך על ידי הזרקת התרופה שוב ושוב בכמויות קטנות.
ולפי שיטת Govallo, תרחיף הלימפה הוזרק פעם אחת בכמות של 200-250 מיליון תאים, והמרכז שלנו בחר בשיטה זו, למרות ששתי השיטות עובדות היטב.

SKL - תרבות מעורבת של לימפוציטים
ולנטין איבנוביץ' היה היועץ הראשי שלנו במהלך הקמת ופתיחת המרפאה, הוא עזר להשיק את המתודולוגיה שלו איתנו. כעת אנו מקלידים מטופלים עבור גנים של תאימות רקמות מסוג 2. אם נמצא דמיון כזה, אנחנו מחסנים בלימפוציטים של הבעל, רק שהוספנו גם כאן תרבות מעורבת של לימפוציטים (MLC).
אני אסביר למה. כשעוד עבדתי במחלקה ולמדתי בבית הספר לתארים מתקדמים, אי שם בסוף שנות ה-80, הבסיס הקליני שלנו היה בית החולים ליולדות 7, הקרוב ביותר לקרמלין, בווזדוויז'נקה. לאחר השיעורים הלכתי לספריית לנין ועיינתי בכל החדשות בפרסומים מ מדינות שונותשָׁלוֹם.
אחד מהם היה "מדריך למיילדות וגינקולוגיה" רב-כרכים מעניין מגרמניה, שבו הוקדש כרך נפרד להפלה. והיה פרק שלם בכרך הזה על האימונולוגיה של הפלה, שהציע להשתמש בתרביות לימפוציטים מעורבות כדי לזהות זוגות שבאמת זקוקים לחיסון ולנתק את אלה שלא נזקקו להליך הזה. אז ידעתי על זה טכניקה נוספתוהחל להשתמש בו במרפאות שלנו, למרות שרבים אינם משתמשים בו בגלל מורכבות מסוימת. במרכז שלנו, זוהי תוכנית נפרדת לאי פוריות אלואימונית.

גורם אימונולוגי בהפלה: התפקיד של התאמות HLA
אבל אני מציין שלא צריך להגזים בבעיית הגורם האימונולוגי בהפלה. כן, זה משמעותי, אבל זו לא הבעיה היחידה של הפלה.
נחזור מעט למקורות הגנטיקה. בשלב מסוים בפיתוח תיאוריות על רבייה מינית, עלה רעיון זה של תאימות לאנטיגנים של רקמות. כי רבייה מיניתנותן גיוון בעיקר מבחינת אנטיגנים של תאימות רקמות, מבחינת אנטיגנים של חלבונים של מערכת החיסון. ואז החלטנו למצוא אוכלוסייה שבה משפחות גדולות מתקבלות בברכה, שבה לא משתמשים באמצעי מניעה ואיפה אורח חיים בריאחַיִים. כדי להקל על זיהוי גורמים המשפיעים על תחילתו ומהלך ההריון. והם מצאו אוכלוסייה מתאימה בדמות הקהילה הנוצרית של ההאטרים (אחוות הוטר).
באוכלוסייה כזו, יש דמיון מוחלט של בני זוג במונחים של אנטיגנים של תאימות רקמות מהמעמד השני. ובקרב הזוגות הנשואים שלהם, נמצא כי ישנה תקופה מוגברת בין תחילת הפעילות המינית לבין לידת הילד הראשון; מספר מוגבר של מקרים של הפלה; והגדלת המרווחים בין הלידות. אין מקרים של אי פוריות. וכמעט בכל אלה זוגות נשואיםיותר מ-10 ילדים.
ממחקר זה, אנו יכולים להסיק שהשפעתו של גורם התאימות לרקמות עדיין מוגבלת. לכן, כאשר יש לנו זוג עם דמיון של גנים של תאימות רקמות (ויש רק כ-15% מזוגות כאלה) בשילוב עם הפלה, אנחנו צריכים לערוך בדיקות מעמיקות יותר בכל התחומים הקשורים להפלה. אז ניתן לזהות במדויק את הצורך בהליך לימפוציטואימוניזציה.

טיפוח משותף של לימפוציטים עם מולקולות MHC-II של הפלוטיפ שונה גורם לטרנספורמציה של הפיצוץ ולהתרבותם. תאים מגיבים שייכים לימפוציטים T ומעוררים על ידי דטרמיננטים זרים MHC-II הממוקמים על לימפוציטים B, מקרופאגים. עוצמת התגובה תלויה במידת ההבדל בין אנטיגנים ההיסטו-תאימות. כדי להעריך את התגובתיות של אדם ביחס לגרסה האללית של MHC, מכינים תרבית חד כיוונית של לימפוציטים. לשם כך, תאים מעוררים מטופלים מראש במיטומיצין או מוקרנים, בעוד שתאים מעוררים מאבדים את יכולתם להתחלק, אך נשארים ברי קיימא.

תגובתיות בתרבית מעורבת של לימפוציטים היא אחד הקריטריונים בהערכה חסינות תאית. SCL מאפשר הקלדת HLA, בחירת זוג תורם-מקבל להשתלת רקמות ואיברים, ומתאם בין אנטיגנים של HLA למחלות מסוימות.

כדי להגדיר את התגובה, משתמשים בתרחיף של לימפוציטים המבודדים מדם של חולים (תורם ונמען). התאים המגיבים שטופים מושעים בכמות קטנה של בינוני 199 (0.5 מ"ל) ולאחר ספירת מספר התאים, מותאמים ל-0.6 * 10 6 תאים/מ"ל. תרחיף התאים המגרה מוכן באופן דומה עם תוספת של תמיסה של מיטומיצין C (500 מיקרוגרם של מיטומיצין C ב-1 מ"ל של תמיסת מלח מאוחסנת) בשיעור של 0.1 מ"ל לכל 1 מ"ל של תרחיף. תערובת התאים מודגרת למשך 40 דקות ב-37 מעלות צלזיוס באמבט מים תוך ערבוב, לאחר מכן מוסיפים לתרחיף מדיום קר 199 והתאים נשטפים שלוש פעמים בצנטריפוגה. הכדור מושעה במצע התרבות התזונתי, ומביא את מספר התאים ל-0.6 * 10 6 תאים/מ"ל.

0.1 מ"ל מתרחיף התאים בתמיסת האנק מתווספים לבארות של צלחת אימונולוגית עגולה סטרילית, ומוסיפים 0.1 מ"ל מתרחיף התא הנושא גרסאות אלליות של MHC. אותה כמות של תמיסה של האנק נוספה לבקרה.

ההתחשבנות בתוצאות מתבצעת לאחר דגירה של התאים ב-37 מעלות צלזיוס למשך 3-5 ימים, בהתאם לניסוח התגובה בשיטה מורפולוגית או איזוטופית (ראה RBTL).

בעת השתלה מח עצםהבחירה של תורם תואם היסטורי מבוססת על תוצאות הקלדת ה-HLA של התורם והמקבל, כמו גם בעת קביעת התאימות של זוגות נבחרים של תורם-מקבל HLA זהים ב-SCL, שהוא השלב האחרון של הערכת התאימות. לשם כך, נעשה שימוש בתגובת SCL דו-כיוונית בשיטה מיקרו-תרבותית בצלחת בעלת 96 בארות עם הערכה של גודל השגשוג על ידי שילוב של H 3-thymidine רדיואקטיבי ב-DNA של לימפוציטים מתרבים.

הגבלות גיל לכל מבחן (האם יש ערכי התייחסות לילדים או לאנשים מעל גיל מסוים - למשל: למבחן 191 אין ערכי התייחסות לאנשים מעל גיל 80).

בעת הוצאת תשובה, ערכי התייחסות ניתנים בטופס התואם למין ולגיל המצוינים של המטופל.

ב-INVITRO לכמה בדיקות יש מגבלות גיל(מכיוון שאין ערכי ייחוס לגיל מסוים), הלשכה הרפואית צריכה להזהיר על כך. הגבלות משפיעות לעתים קרובות יותר על ילדים גיל צעיר יותר. מחקרים אמינים לפיתוח ערכי ייחוס לילדים בגיל זה עשויים שלא להיות זמינים, וערכים רבים בגיל זה שונים מאוד מהערכים הצפויים במבוגרים (ילדים אינם מבוגרים קטנים).

באשר לאנשים מעל גיל 80, אם אין ערכי ייחוס מוגדרים במיוחד עבור קבוצה זו, הם, בזהירות מסוימת, יכולים להשתמש בערכי הייחוס שהושגו עבור הקרובים ביותר קבוצת גילמבוגרים אחרים.

האם התשובה עזרה לך?

לא באמת

מדוע בוצעו כמה בדיקות להמוליזה? מדוע לא מבוצעות כל הבדיקות בהמוליזה מדגימה?

המוליזה משפיעה בצורה שונה על בדיקות שונות, ולכן לא יוצאות תוצאות בדיקה שעלולות להתעוות על ידי המוליזה. להיפך, אם השפעתה על הבדיקה אינה משמעותית או נעדרת, התוצאות ניתנות למטופל.

המוליזה היא הרס של תאי דם עם שחרור תוכנם לנוזל החוץ תאי (למשל, סרום, פלזמה). הסיבה לכך יכולה להיות הן התהליכים המתרחשים בגופו של המטופל, והן הפרה של הטכנולוגיה ללקיחת, הובלה ועיבוד של צינורות בדם.

חומרים המשתחררים מתאי הרוס יכולים לשנות באופן משמעותי את התוצאות של בדיקות מסוימות, הן בשל השפעה ישירה על שלבי הניתוח, והן בשל עלייה בתכולה הכמותית של האנליט. השפעת המוליזה על תוצאות הניתוח שונה בהתאם לבדיקה, המכשיר, שיטת הביצוע ועוצמת ההמוליזה עצמה.

האם התשובה עזרה לך?

לא באמת

מדוע התוצאות של מעבדות שונות אינן זהות?

התוצאות של אותן בדיקות שבוצעו במעבדות שונות ברוב המקרים שונות. הסיבה לכך היא המאפיינים האישיים של המטופל, תנאים שוניםנטילת חומר ביולוגי, שיטות לביצוע הבדיקה ומתן התוצאה.
הגורם הראשון שמשפיע על התוצאות הוא שגיאת מדידה. זוהי סטייה טבעית בלתי נמנעת של תוצאת המחקר ממדדים אידיאליים בכל השלבים.

ביולוגי - אלו תנודות טבעיות בכמות החומר הנבדק, בהתאם מאפיינים אישייםגוף המטופל, גורמים סביבתיים, גורמים טיפוליים ותנאים לנטילת החומר הביולוגי. בהתחשב בהפרש הזמן בין שני ההליכים לנטילת חומר ביולוגי, כמו גם מה שקרה באותו זמן, התנאים להתכונן לניתוח עשויים להשתנות, מצב פיזישל המטופל, התוכן של חלק מהחומרים נתון למקצבים יומיומיים, במיוחד כפוף לשינויים בחומר אם התהליך הטיפולי נמשך באותה תקופה.

אנליטי - תנודות באינדיקטורים נמדדים על פי חוקי הפיזיקה והכימיה, הכפופים לציוד ולריאגנטים. אם לוקחים בחשבון את המוזרויות של תהליך המעבדה, אפילו בחינת שתי דגימות מאותה דגימה בו זמנית, לא נקבל באופן מוחלט אותם ערכיםמידות.

הגורם השני, מחקר מעבדההוא תהליך מורכב רב-שלבי, שכל שלב שלו מורכב מ-5 אלמנטים המשתנים עם הזמן וממעבדה למעבדה:

  1. חומר ביולוגי, תכונותיו, תנאי המסירה, האחסון והעיבוד שלו.
  2. כוח אדם, כישוריהם ופעולותיהם.
  3. מכשירים, מנתחים, ריאגנטים.
  4. שיטות ארגון העבודה.
  5. מערכת בקרת איכות.
השילוב של כל הרכיבים הללו שונה במעבדות שונות, ואינו יכול להוביל לתוצאות "אותן" לחלוטין.

האם התשובה עזרה לך?

לא באמת

עד כמה אמינות תוצאות המחקר?

תוצאות הניתוחים שבוצעו על ידי Invitro עומדות בתקני איכות בינלאומיים ומוכרות כאמינות.

מהימנות תוצאות הניתוחים היא מונח המאפיין עד כמה התוצאה המתקבלת קרובה לתוכן האמיתי של החומר בחומר הביולוגי הנחקר. מהימנות תוצאות הניתוחים היא חלק מתפיסת האיכות ומורכבת ממרכיבים רבים.
התרומה הגדולה ביותר לאמינות התוצאה נעשית על ידי ההכנה למחקר, כמו גם המניפולציה הנכונה של דגימת הדם, בשלב זה יכולות להתרחש עד 62% מכלל השגיאות. אישור, מסירה ופרשנות של התוצאה על ידי הרופא המטפל עשויים להיות המקור ל-23% מהטעויות.

מעבדה מודרנית יכולה לגרום לא יותר מ-15% מסך הטעויות האפשריות, ונתון זה תלוי בקוהרנטיות של המעבדה, בציוד שלה ובקריטריוני איכות שנקבעו.

אינביטרו היא חברת הרפואה הפרטית הגדולה ברוסיה, והדאגה לאיכות תופסת בה מקום חשוב ביותר. ב-Invitro כל שלבי הניתוח נמצאים תחת שליטה - מלקיחת חומר ביולוגי ועד להוצאת תוצאה: עבודת משרדי רפואה, שירות שליחים, מעבדה - הכל כפוף לכללים אחידים, מה שנקרא. נהלי הפעלה סטנדרטיים, כאשר כל שלב מתואר בפירוט רב על מנת למנוע שגיאות אפשריות.

בנוסף לבקרת איכות פנימית רב-שכבתית, מעבדת Invitro מקבלת השתתפות פעילהבמספר מערכות הערכה חיצוניתאיכות על ידי השוואת הביצועים שלהם לתוצאות של מעבדות אחרות. בשנת 2016, Invitro אישרה את איכות שירותי המעבדה ברמה הבינלאומית - בתוכנית Six Sigma של Westgard QC. על פי מסקנת התוכנית, מספר הטעויות האפשריות בעבודת המעבדה אינו עולה על 3.4 לכל 1,000,000 מקרים.

ההכרה בחשיבותה של כל העבודה הקפדנית הזו בארצנו הייתה הצגת הפרס של ממשלת הפדרציה הרוסית בתחום האיכות בנובמבר 2017.


SKL - תרבות מעורבת של לימפוציטים
MLC - תרבית לימפוציטים מעורבת

בדיקה זו מורכבת מסט של תרביות הקובעות את המידה שבה בני זוג מזהים זה את אנטיגנים של תאימות רקמות של זה.

הלימפוציט הוא התא המרכזי של מערכת החיסון. ניתן להשוות את מערכת הלימפוציטים למצב שבו יש בוסים וכפופים, וכל עובד מבצע תפקיד מיוחד.

אם לימפוציט פוגש חפצים זרים לגוף (חיידקים, וירוסים, תאים זרים וכו'), אז מתפתחת תגובה חיסונית. אם אנחנו מדברים על רקמות או תאים זרים, אזי מידת התגובה החיסונית תהיה תלויה בדמיון של התצורה של אנטיגנים של תאימות רקמות (HLA, אנטיגנים לויקוציטים אנושיים, או MHC, קומפלקס היסטו-תאימות עיקרי, (אלה מילים נרדפות) של אנטיגנים ).

התגובה החיסונית מתבטאת בהופעת שיבוטים (צאצאים של תא אחד) של תאים המתמחים אך ורק לגורמים זרים ספציפיים). במילים אחרות, אם תאי מערכת החיסון מתחילים להגיב למשהו, הם מתחילים להתחלק. וניתן להעריך את חלוקת התאים לפי קצב סינתזת ה-DNA. ככל שמסונתז יותר DNA, יותר תאים מתחלקים, כך התגובה החיסונית מתפתחת בצורה פעילה יותר. ניתן לקבוע את מידת סינתזת ה-DNA על ידי הכללת הנוקלאוטיד הרדיואקטיבי תימידין בתרבית התאים – ה"לבנה" של ה-DNA. עיקרון זה מבוסס על הערכה של תרבית מעורבת של לימפוציטים.

מבחינה טכנית, זה נעשה באופן הבא. דם נלקח מבני הזוג, ממנו מבודדים לימפוציטים. לימפוציטים אלה ממוקמים במדיום תזונתי נוח לחלוקה. אם תערבבו את הלימפוציטים של אנשים שונים, הם יתחילו להגיב זה לזה. עם זאת, אם פשוט רושמים פעילות של תרבות מעורבת של אנשים שונים, אי אפשר להבין איך אדם מסוים מגיב, כי התאים של כל המשתתפים בתרבות המעורבת נכנסים לקרב.

על מנת להעריך את התגובה האישית של כל משתתף בתרבית, התאים של אחד מבני הזוג נחשפים להשפעה שהופכת את חלוקת התא לבלתי אפשרית. עם זאת, התכונות האנטיגניות של לימפוציטים נשמרות. בתרבית כזו, כל פעילות התא תהיה קשורה רק לתאים חיים של בן הזוג השני. השוואה בין שילובים שונים של תרבויות של תאים חיים ותאים מומתים יכולה לספק מידע חשוב על מידת הדמיון האימונולוגי של בני זוג.

למעשה, במבחן זה, שגוזל זמן רב, מניחים 12 תרבויות שונות, והתגובה מוערכת ביום השלישי והחמישי של התרבית.

24 המספרים המתקבלים מספקים מידע חשוב על האופן שבו אישה תגיב לאנטיגנים של תאימות רקמות של בעלה במהלך ההריון.

העובדה היא ששימור ההריון הוא תהליך פעיל. בדיוק כמו במקרה של תגובת דחייה, הכרה אימונולוגית נאותה של הזר חשובה לפיתוח סובלנות אימונולוגית בשלב הראשון. אם ההכרה הזו איטית, או אם היא מתרחשת מאוחר מדי, העובר מותקף על ידי תאי ההורג הטבעיים של האם ומת.

SCL מאפשר לא רק להעריך את מצב ההכרה האימונולוגית של לימפוציטים של בני זוג זה בזה, אלא גם לשלוט בתהליך הטיפול באמצעות חיסון בלימפוציטים, לבחור את שיטת ומינון החיסון ולהעריך את הסיכויים ליישום שיטה כזו או אחרת של תיקון.

לכן, כאשר מזוהה תצורה "רעה" של מספרים ב-SCL, לעתים קרובות יש צורך לחזור עליה לאחר השפעות טיפוליות.

שְׁאֵלָה:
תגיד לי, בבקשה, האם ניתן לתרום דם עבור SCL לאחר (בעוד 4-5 ימים) שהמטופל סיים את הקורס עירוי תוך ורידיאימונוגלובולינים (לדיכוי HSV-2; 3 טפטפות של 25 מ"ל כל יומיים)? האם אימונוגלובולינים ישפיעו על מהימנות ניתוח SCL?

ענתה על ידי Kuhoreva Tatyana Aleksandrovna

ניהול קורס של טיפול באימונוגלובולינים עשוי להשפיע על תוצאות SCL. מאחר ואימונוגלובולין משפיע על פעילות הלימפוציטים, ובתגובת SCL פעילות זו נחקרת (במצב ספונטני, לאחר ערבוב עם תרבית הלימפוציטים של הבעל, מאגר של תאים תורמים).
רצוי לערוך מחקר לפני השימוש באימונוגלובולין או מספר שבועות (4-5) לאחר הטיפול.
גם תוצאות הבדיקה יכולות להיות מושפעות הצטננות, חיסונים, מחזור.

שְׁאֵלָה:
לפי תוצאות הניתוח, עוצמת התגובה ב-SCL מופחתת. בתוכנית IVF ב-14 DPP, hCG היה 11. מה עלי לעשות?

ענה על ידי Airapetov David Yurievich
מרפאת מיילדות וגינקולוגיה "מרכז לאימונולוגיה ורבייה":
העובדה היא שהילד חצי זר לגוף האם. זוהי תופעה פיזיולוגית נורמלית המעוררת תגובות אימונולוגיות שמטרתן לשמור על הריון. יש ליצור חלבוני הגנה חיסוניים מיוחדים המגנים ביצית מופרית. חוסר ההתאמה של בני זוג לאנטיגנים HLA וההבדל בין העובר לאורגניזם האימהי הוא נקודה חשובהצורך לשמור על הריון ולשאת אותו. הדמיון של בני זוג מבחינת אנטיגנים של תאימות רקמות מוביל לדמיון של העובר לגוף האם, מה שגורם לגירוי אנטיגני לא מספק של מערכת החיסון של האישה, והתגובות הנחוצות לשמירה על ההריון אינן מופעלות. הריון נתפס כ תאים זרים. במקרה זה, זה קורה הפרעה ספונטניתהֵרָיוֹן. כדי לאבחן גורמים כאלה של הפלה, מתבצעת בדיקה של גנים מסוג HLA מסוג II (הקלדת HLA-DRB1, DQA1 ו-DQB1), כמו גם תרבית מעורבת של לימפוציטים. הבדל חלש של לימפוציטים של בני זוג ב-MCL (תרבות מעורבת של לימפוציטים) וצירוף מקרים ב-HLA מהווה אינדיקציה ללימפוציטותרפיה. כל זה נעשה על מנת להגביר את יעילות ההכרה באנטיגנים של הבעל בתהליך היווצרות השליה, מה שמאפשר להתחיל את המנגנונים לשמירת הריון בזמן.